BTG1在喉鳞状细胞癌中发生的作用及分子机制研究

发布时间：2017-09-16 03:38

  本文关键词：BTG1在喉鳞状细胞癌中发生的作用及分子机制研究

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【摘要】：目的1分析喉鳞状细胞癌组织和喉部正常组织中BTG1蛋白表达水平差异，研究BTG1蛋白在喉鳞状细胞癌组织中表达水平与喉癌生物学行为之间的关系。2研究BTG1基因高表达对喉癌细胞的生长增殖、凋亡的影响及其相关作用机制。探讨在喉鳞状细胞癌发生发展中BTG1的作用及机制，并为BTG1作为预测喉癌发生发展的新分子标志物及基因治疗的靶点提供理论基础和实验依据。 方法1应用免疫组织化学、Western blot实验方法检测70例喉鳞状细胞癌组织及35例喉部正常组织中BTG1蛋白的表达情况。2构建pEGFP-N1-BTG1真核表达质粒，培养并转染喉癌Hep-2细胞，分为实验组（转染BTG1的Hep-2细胞）和对照组（转染空质粒的Hep-2细胞）。上述两组分别应用实时荧光定量PCR和Western blot方法鉴定两组细胞中BTG1mRNA和BTG1蛋白的表达水平；MTT实验检测转染细胞的生长增殖能力；流式细胞仪检测细胞细胞周期分布；磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V-FITC/PI）实验测定细胞早晚期凋亡的情况；Western blot法测定转染细胞的细胞周期调控蛋白CyclinD1、抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平。 结果1BTG1与喉癌生物学行为的关系：喉癌患者中BTG1蛋白表达的阳性率明显低于正常组差异有统计学意义（P＜0.05）。在70例喉鳞状细胞癌组织中，BTG1蛋白的表达与患者性别、年龄、肿瘤所在部位无关（P＞0.05）；BTG1蛋白的表达水平与肿瘤局部浸润深度、区域淋巴结转移、病理分期、组织学分级呈负相关，不同期别间差异有统计学意义（P＜0.05）。2喉癌Hep-2细胞中实验组与对照组相比：实验组细胞BTG1mRNA与蛋白的表达水平均显著提高（0.908±0.086和0.921±0.091vs0.212±0.017和0.308±0.047，P＜0.05）；实验组细胞生长速度减慢，细胞增殖能力降低（P＜0.05）；实验组细胞中CyclinD1蛋白表达水平降低（0.436±0.023vs0.916±0.092，P＜0.05），细胞周期的G0/G1期细胞比例升高（85.1±5.2%vs63.8±3.1%，P＜0.05），S期细胞比例降低（8.3±1.1%vs23.1±1.5%，，P＜0.05）；实验组细胞磷脂酰丝氨酸外翻增加，细胞早期凋亡显著（10.3±1.1%vs2.8±0.3%，P＜0.05），细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平降低（0.167±0.009vs0.834±0.084，P＜0.05）。 结论1喉癌组织比正常组织BTG1蛋白的表达阳性率明显降低，其表达水平与肿瘤局部浸润深度、区域淋巴结转移、临床分期、组织学分级呈负相关，提示BTG1在喉鳞状细胞癌的发生和发展中可能起着重要的生物学作用。2BTG1高表达能明显抑制喉癌Hep-2细胞的增殖、诱导凋亡， BTG1反向调节细胞周期蛋白CyclinD1、抗凋亡蛋白Bcl-2进而能调控细胞周期阻滞、促进细胞凋亡可能是其具体的发生机制之一。
【关键词】：喉癌 BTG1 增殖 凋亡 细胞周期
【学位授予单位】：河北联合大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R739.65
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文缩略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 研究部分13-45
• 1.1 BTG1 蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达及与其临床特征的关系13-23
• 1.1.1 材料与方法13-18
• 1.1.2 结果18-20
• 1.1.3 讨论20-23
• 1.2 BTG1 对喉癌 Hep-2 细胞增殖和凋亡的影响及其机制的研究23-41
• 1.2.1 材料与方法23-31
• 1.2.2 结果31-37
• 1.2.3 讨论37-41
• 1.3 结论41
• 参考文献41-45
• 第3章 综述 BTG1 与肿瘤关系的研究45-53
• 3.1 BTG1 的发现45
• 3.2 BTG1 与 BTG/TOB45-46
• 3.3 BTG1 与肿瘤46
• 3.4 BTG1 的生物学特性46-50
• 3.4.1 BTG1 促进细胞分化46-47
• 3.4.2 BTG1 抑制肿瘤细胞增殖及调控细胞周期47-48
• 3.4.3 BTG1 诱导肿瘤细胞凋亡48
• 3.4.4 BTG1 抑制肿瘤细胞侵袭转移48-50
• 3.5 前景与展望50
• 参考文献50-53
• 附录 喉癌分期53-55
• 致谢55-56
• 导师简介56-57
• 作者简介57-58
• 学位论文数据集58

【参考文献】

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1 左敏夏 ,利刚,杨晓东,苏学劲;直肠癌淋巴结微转移标志物的比较研究[J];大肠肛门病外科杂志;2005年02期

本文编号：860694