PCDH8基因对鼻咽癌细胞株CNE-1作用机制的研究

发布时间：2017-10-05 21:52

  本文关键词：PCDH8基因对鼻咽癌细胞株CNE-1作用机制的研究

  更多相关文章： PCDH8 鼻咽癌 CNE-1

【摘要】：目的探讨PCDH8基因表达对鼻咽癌细胞体外增殖、周期、侵袭、药物敏感性等生物学行为的影响及其机制研究。 方法采用脂质体介导将质粒pcDNA3.1-PCDH8（实验组）与质粒pcDNA3.1（对照组）转染至鼻咽癌细胞株CNE-1，应用RT-PCR、Westernblot技术检测转染后CNE-1细胞中PCDH8mRNA及蛋白的表达情况；通过CCK-8细胞生长曲线试验，，流式细胞周期试验，Transwell侵袭试验、CCK-8细胞药物敏感性试验及裸鼠皮下种植瘤模型，进一步对转染PCDH8基因的细胞株CNE-1的增殖能力、生长周期、细胞侵袭能力、对化疗药物的敏感性及其体内成瘤能力进行分析，并与转染对照质粒的细胞株进行对比。通过Real time PCR检测实验组与对照组MMP-9、MMP-2、VEGF基因mRNA水平表达变化，Western blot检测实验组与对照组CDK-4、P21、P27、JNK基因蛋白水平表达变化，了解PCDH8基因在鼻咽癌细胞内的作用机制。 结果①RT-PCR、Western blot检测表明转染质粒pcDNA3.1-PCDH8的实验组细胞株中PCDH8mRNA及蛋白成功表达并明显高于转染质粒pcDNA3.1的对照组细胞株（P0.05）。②CCK-8细胞生长曲线试验表明试验组细胞株的生长速度明显低于对照组（P0.05）。③流式细胞周期试验检测实验组细胞株G0/G1期较对照组增加，S期细胞较对照组减少（P0.05）；④Tramswell侵袭试验表明实验组细胞株侵袭能力明显低于对照组（P0.05）。⑤CCK-8细胞药物敏感性试验表明PCDH8基因表达能显著提高鼻咽癌细胞株CNE-1对顺铂化疗药物的敏感性（P0.05）；⑥裸鼠鼻咽癌皮下移植瘤模型中表达PCDH8基因的实验组CNE-1细胞的成瘤能力低于对照组CNE-1细胞（P0.05）。⑦Realtime PCR试验证明在mRNA水平上MMP-9在实验组的表达量低于对照组（P0.05），而MMP-2、VEGF在实验组的表达量与对照组无明显差别(P0.05)；⑧Western bolt试验中CDK-4、P27、JNK基因在实验组中的表达高于实验组的表达（P0.05）。P21在实验组中的表达高于对照区但差异无统计学意义（P0.05）。结论脂质体成功介导pcDNA3.1-PCDH8与pcDNA3.1质粒转染入鼻咽癌CNE-1细胞株并建立稳定细胞株。PCDH8基因的表达能降低CNE-1细胞的增殖、侵袭能力，延缓细胞分裂周期，提高对顺铂化疗药物的敏感性，降低鼻咽癌细胞体内成瘤能力。PCDH8基因可能通过MMP-9、CDK-4、P27、JNK基因及相关通路，作用于鼻咽癌细胞，在抑癌方面起到一定作用。
【关键词】：PCDH8 鼻咽癌 CNE-1
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 第一部分 PCDH8 基因转染鼻咽癌细胞株 CNE-1 及其对细胞生物学行为的影响12-30
• 1 实验材料与方法12-22
• 2 结果22-28
• 3 讨论28-30
• 第二部分 PCDH8 基因对人鼻咽癌细胞株 CNE-1 相关蛋白的影响30-41
• 1 材料与方法30-35
• 2 结果35-38
• 3 讨论38-41
• 全文总结41-43
• 参考文献43-47
• 附插图47-51
• 文献综述51-58
• 参考文献55-58
• 致谢58-59
• 攻读学位期间发表的学术论文59-60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 杨明;侯敢;黄迪南;;明胶酶与恶性肿瘤[J];现代肿瘤医学;2008年01期

2 邓伟;黄天壬;陈万青;张思维;郑荣寿;利基林;;中国2003—2007年鼻咽癌发病与死亡分析[J];肿瘤;2012年03期

3 胡琴;胡国华;;鼻咽癌中PCDH17基因启动子甲基化状态的研究[J];重庆医科大学学报;2012年01期

本文编号：979035