氯化锂腹腔注射联合嗅鞘细胞玻璃体腔内移植对损伤视网膜神经节细胞的影响

发布时间：2017-10-09 04:14

  本文关键词：氯化锂腹腔注射联合嗅鞘细胞玻璃体腔内移植对损伤视网膜神经节细胞的影响

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【摘要】：目的： 研究不同剂量氯化锂(LiCl)腹腔注射,嗅鞘细胞(OEC)玻璃体腔内移植以及两者联合作用对成年SD大鼠视神经(ON)横断后视网膜神经节细胞(RGCs)存活的影响，并分析视网膜内脑源性神经营养因子(BDNF)的表达情况,对其机制进行初步研究。 方法： 1雌性SD大鼠120只,随机分为腹腔注射生理盐水(saline)对照组和腹腔注射低剂量(30mg/kg/d)、中剂量(60mg/kg/d)、高剂量(85mg/kg/d)LiCl实验组。术前1D按分组给予腹腔注射相应药物。眶内据视神经根部1.5mm处横断视神经且残端留置荧光金及术后每天腹腔注射saline或不同剂量的LiCl溶液,直至术后2D、7D和14D处死动物。平铺视网膜后取样计数荧光金(FG)逆行标记的存活RGCs,并由此计算出每一视网膜内RGCs的平均密度。并在7D和14D时在蛋白和基因水平研究视网膜内BNDF的表达情况。 2眶内横断60只成年雌性SD大鼠左侧视神经且残端留置荧光金后,随机分为玻璃体腔内移植DF12组,玻璃体腔内移植OEC组,其中36只SD雌性大鼠在术后7D,14D,21D处死,平铺视网膜后取样计数荧光金逆行标记的存活RGCs,并由此计算出每一视网膜内RGCs的平均密度。剩余24只SD大鼠在7D和14D两个时间点,处死动物取视网膜,在蛋白和基因水平研究视网膜内BNDF的表达情况。 3选取48只SD雌性大鼠,随机分为腹腔注射中剂量LiCl联合玻璃体腔移植OEC组,腹腔注射saline联合玻璃体腔内移植12组。术前一天按分组腹腔给药,眶内横断据视神经根部1.5mm处横断视神经并在残端留置荧光金,取7D和14D两个时间点,平铺视网膜后取样计数荧光金逆行标记的存活RGCs,并由此计算出每一视网膜内RGCs的平均密度,并在蛋白和基因水平研究视网膜内BNDF的表达情况。 结果： 1视神经横断后2D后,各剂量LiCl组RGCs平均密度与对照组相比无显著性差异(P0.05)。当存活时间增至7D时,各剂量LiCl组RGCs密度均明显高于对照组(P0.01),且中剂量LiCl组RGCs密度增高最为显著。且各剂量组BDNF在蛋白和基因水平的表达明显高于对照组,其中中剂量组BDNF的表达明显高于低剂量组。术后14D后,低剂量与中剂量组RGCs密度仍显著高于对照组(P0.01),但高剂量组RGCs密度与对照组相比无统计学差异(P0.05)。BDNF在蛋白和基因水平的表达低剂量组和中剂量组与对照组之间有显著性差异(P0.01),且中剂量组BDNF的表达明显高于低剂量组。 2玻璃体腔内移植OEC在术后7D和14D时RGCs密度均明显高于玻璃体腔内移植DF12组(P0.01),且玻璃体腔内移植OEC的视网膜内BDNF在蛋白和基因水平的表达与玻璃体腔内移植DF12组相比有显著性差异(P0.01)。但在术后21D时,玻璃体腔内移植OEC组RGCs密度与玻璃体腔内移植DF12组无显著性差异(P0.05)。 3在视神经横断7D和14D后,腹腔注射中剂量LiCl联合玻璃体腔内移植OEC组RGCs的密度与腹腔注射sali ne联合玻璃体腔内移植DF12组相比有显著性差异(P0.01),且腹腔注射中剂量LiCl联合玻璃体腔内移植OEC组视网膜内BDNF在蛋白和基因水平的表达与腹腔注射salinc联合玻璃体腔内移植DF12组相比有显著性差异(P0.01)。 结论： 1腹腔内注射LiCl可显著促进成年SD大鼠视神经切断后RGCs的存活,这种神经保护作用为剂量依赖性,在中剂量(60mg/kg/d)时作用最显著。且这种作用是可以通过视网膜内BDNF表达的提高来发挥作用的。 2玻璃体腔内移植OEC与玻璃体腔内移植DF12相比可以促进RGCs的存活,与在视神经残端注入OEC相比最长可以维持14D,延长了OEC存活的时间。且这种作用是通过提高视网膜内BDNF的表达产生的。 3玻璃体腔内移植OEC联合腹腔注射中剂量LiCl组可以在7D时显著提高BDNF的表达,进一步促进了RGCs的存活。
【关键词】：视神经切断 视网膜神经节细胞 嗅鞘细胞 锂剂 神经保护 大鼠
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R774.1
【目录】：

• 中文摘要5-8
• Abstract8-12
• 前言12-14
• 第一部分 实验一 不同剂量氯化锂腹腔注射对大鼠视网膜神经节细胞的影响14-28
• 1 材料14-16
• 2 方法16-21
• 3 结果21-24
• 4 结论24-25
• 5 讨论25-28
• 第二部分 实验二 嗅鞘细胞玻璃体腔内移植对大鼠节细胞的保护作用的研究28-37
• 1 材料28-29
• 2 方法29-31
• 3 结果31-35
• 4 结论35
• 5 讨论35-37
• 第三部分 实验三 氯化锂腹腔注射联合嗅鞘细胞玻璃体腔内移植对大鼠节细胞的影响37-44
• 1 材料37
• 2 方法37-38
• 3 结果38-42
• 4 结论42-43
• 5 讨论43-44
• 参考文献44-48
• 综述48-56
• 参考文献53-56
• 缩略词表56-57
• 攻读学位期间发表论文情况57-58
• 致谢58-59
• 作者简介59

【共引文献】

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本文编号：998099