宛氏拟青霉菌甲醛脱氢酶的分离纯化及酶学性质

发布时间：2017-10-14 08:40

  本文关键词：宛氏拟青霉菌甲醛脱氢酶的分离纯化及酶学性质

  更多相关文章： 宛氏拟青霉菌 甲醛脱氢酶 分离纯化 酶学性质

【摘要】：[目的]以甲醛降解菌宛氏拟青霉菌F1-23为实验菌株,分离纯化得到甲醛脱氢酶的酶液,并考察其酶学性质。[方法]从液体培养液中收集菌体,通过细胞粉碎,采用(NH4)2SO4沉淀、透析、DFAE-Sepharose离子交换层析及Superdex-200凝胶过滤层析,纯化得到电泳纯的FADH。[结果]该酶的分子量约为112.81 k Da;亚基分子量分别为65k Da和42 k Da;纯酶液活力为336.10 U/mg,较纯化前提高了4.02倍。对该酶的酶学性质分析结果表明,该酶最适反应温度为37℃,在25~45℃时稳定性很好;最适反应p H为8.0,在p H 6.5~8.0范围内酶活力较为稳定。底物特异性研究表明FADH最适底物为甲醛,相对偏好短链醛类。金属离子对酶活性的影响试验表明,Zn~(2+)、Mn~(2+)、Ag~+、Fe~(3+)和Hg~(2+)几乎完全抑制FADH酶活力;Ca~(2+)对酶活有促进作用。纯酶液在4℃环境下,在24h内可保存78%的活性。[结论]FADH结构较为特殊,且活性较大,为后期表达和深入研究其生物学功能提供理论和数据支持。
【作者单位】： 常熟理工学院生物与食品工程学院;
【关键词】： 宛氏拟青霉菌 甲醛脱氢酶 分离纯化 酶学性质
【基金】：常熟理工学院2016届毕业论文重点资助课题
【分类号】：R915
【正文快照】： 甲醛是一种能与核酸、蛋白质以及脂类产生非特异性反应的活泼化合物,对所有生物都具有很高毒性[1-2]。为了防止甲醛对生物体的致死以及突变作用,生物体已建立了多种修复机制,使之能在含甲醛的环境中更好地生存,其中谷胱甘肽(GSH)依赖型的甲醛氧化途径就是微生物中广泛存在的一

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 陈晓飞;冯菲;孙玉飞;王雪妍;周伏忠;;一株甲醛降解菌的分离鉴定及其降解特性分析[J];河南科学;2015年09期

2 高勇;顾锐;汪令翔;孔芳;蔡为荣;;降解甲醛的假单胞菌菌株的固定化研究[J];安徽工程大学学报;2015年02期

3 傅婷;王丹;万骥;唐云明;;猪肝乙醇脱氢酶的分离纯化及部分性质[J];食品科学;2015年17期

4 姚璐晔;李想;邢捚;高杏;曹叶萍;顾佳佳;;紫外诱变选育高效降解甲醛菌株及其降解特性[J];食品科学;2015年13期

5 孔芳;郭凤献;吴木章;杨超英;王幼平;;一株甲醛降解菌的筛选及降解特性的研究[J];微生物学通报;2014年06期

6 徐娴;贾红华;何冰芳;韦萍;;甲酸脱氢酶基因在大肠杆菌Rosetta中的高效表达[J];食品与发酵工业;2007年05期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 姚正颖;Issatchenkia terricola XJ-2乙醛脱氢酶的纯化和性质及其基因的克隆与表达[D];南京农业大学;2011年

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 李海艳;甲醛检测降解基因工程菌的构建[D];吉林大学;2016年

2 周桂兰;海洋沉积物中甲醛耐受菌多样性和一株甲醛降解菌Halomonas sp. JC-5B的初步研究[D];厦门大学;2014年

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 姚璐晔;李欣怡;史琦琳;沈博文;沈玉燕;;宛氏拟青霉菌甲醛脱氢酶的分离纯化及酶学性质[J];生物技术;2016年06期

2 李晓梅;李杰男;刘菲;张航;郭庆美;;添加含硫化合物促进废水中甲醛的生物降解[J];环境工程学报;2016年05期

3 周景明;李鹏飞;张改平;祁艳华;裴艳艳;扣莉云;蒋敏;王爱萍;;猪瘟病毒E2蛋白在大肠杆菌中的表达及其可溶性分析[J];西北农业学报;2015年11期

4 陈晓飞;冯菲;孙玉飞;王雪妍;周伏忠;;一株甲醛降解菌的分离鉴定及其降解特性分析[J];河南科学;2015年09期

5 高勇;顾锐;汪令翔;孔芳;蔡为荣;;降解甲醛的假单胞菌菌株的固定化研究[J];安徽工程大学学报;2015年02期

6 赫荣乔;;微生物菌种资源及其特性是国内环境微生物研究热点[J];微生物学通报;2015年01期

7 李萍;王东阳;许云;;自然环境中甲醛降解菌的分离筛选与鉴定[J];南方农业学报;2014年09期

8 吴琦;谭菲;刘晓晴;;嗜热菌Thermus thermophilus HB8铁硫簇合成途径中IscA和IscU蛋白的表达、纯化和功能研究[J];首都师范大学学报(自然科学版);2014年02期

9 卢明倩;董蓉;温顺华;张韦;王巧贞;黄庶识;陈丽梅;;单细胞激光拉曼光谱检测重组大肠杆菌细胞表达甲酸脱氢酶[J];分析化学;2012年12期

10 张婧;年洪娟;李昆志;陈丽梅;;甲醛氧化途径关键酶重组蛋白的生化特性及固定化酶吸收甲醛效果研究[J];生命科学研究;2012年01期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 姚璐晔;高杏;曹叶萍;顾佳佳;邢捚;冀宏;;一株甲醛降解菌鉴定及其降解性能研究[J];生物技术;2014年01期

2 孔芳;郭凤献;吴木章;杨超英;王幼平;;一株甲醛降解菌的筛选及降解特性的研究[J];微生物学通报;2014年06期

3 孙芳;任美凤;胡瑞斌;唐云明;;韭菜酸性磷酸酶的分离纯化及酶学性质[J];食品科学;2013年17期

4 李端林;卢徐节;;固定化微生物技术在印染废水处理中的应用[J];江汉大学学报(自然科学版);2013年01期

5 汤甜甜;周亮;吉鹏飞;鲍文娜;龚兴国;;人乙醇脱氢酶ADH1B2在毕赤酵母中的表达及活性分析[J];浙江大学学报(理学版);2012年05期

6 谢文娟;王洁;孙s钍，

本文编号：1030126