人IL-29第43位Lys的定点突变及抗肿瘤活性初步分析

发布时间：2017-12-15 07:09

  本文关键词：人IL-29第43位Lys的定点突变及抗肿瘤活性初步分析

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【摘要】：为获得人白介素-29(h IL-29)变异体并考察其对肿瘤细胞增殖的影响,基于对h IL-29成熟肽生物信息学的分析结果,通过大引物PCR方法将其肽链第43位赖氨酸(Lys)编码基因进行定点突变。将得到的h IL-29变异体基因插入质粒p PIC9KM,构建重组真核表达质粒p PIC9KM-h IL-29~(mut43),导入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,经G418筛选得到高产菌株p PIC9KM-h IL-29~(mut43)/GS115,用甲醇诱导表达重组蛋白rh IL-29~(mut43)。检测rh IL-29~(mut43)对肿瘤细胞增殖的影响,结果显示该重组蛋白对结肠癌细胞HCT8、肺腺癌细胞A549、胃癌细胞SGC7901和肝癌细胞BEL7402的增殖均有抑制作用,且高浓度(1 000 ng/ml)下对上述4种肿瘤细胞的增殖抑制作用更强,增殖抑制率分别为(18.45±0.83)%、(27.14±2.99)%、(29.94±1.95)%和(25.22±0.42)%。与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P0.01)。且其抑制增殖效应强于野生型h IL-29和阳性对照药人干扰素(IFN)-a2b。
【作者单位】： 江南大学生物工程学院;江南大学无锡医学院;
【基金】：无锡市科技发展资金(CLE01N1412)
【分类号】：R96
【正文快照】： 白介素29(interleukin-29,IL-29)是由Kotenko等和Sheppard等于2003年共同发现的[1,2],又称干扰素(IFN)-λ1,与IFN-λ2(IL-28A)和IFN-λ3(IL-28B)同属于IFN-λ家族(Ⅲ型IFN)。IL-29受体(IFN-λR)是由IL-28R1和IL-10R2链组成的异二聚体复合物,其中IL-28R1为特异性结合亚基。IL-2

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