替米沙坦对长期HSHF膳食喂养大鼠肝脏巨噬细胞极化状态的影响

发布时间：2018-03-06 19:43

本文选题：替米沙坦　切入点：高糖高脂饮食　出处：《山西医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:1.观察替米沙坦对长期高糖高脂(high sugar and high fat,HSHF)膳食喂养大鼠空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)及稳态模型胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)的影响。2.观察替米沙坦对长期HSHF膳食喂养大鼠肝脏病理形态及其内巨噬细胞极化状态的影响,探讨替米沙坦改善长期HSHF喂养大鼠胰岛素抵抗的机制。方法:将购自中国人民解放军军事科学院实验动物中心的6-8周龄健康雄性SD(Sprague Dawley)大鼠30只适应性喂养1周后随机分成两组:对照组10只,高糖高脂组20只。对照组饲以山西医科大学动物实验中心的普通饲料;高糖高脂组饲以课题组多项研究已经使用过的高糖高脂饲料,饲料配方如下:70%普通饲料(面料,由山西医科大学动物实验中心提供)+20%猪油+10%蔗糖+1%胆固醇+0.25%胆酸。两组大鼠均在天黑前投食并自由饮水。饲养至第6个月时将HSHF组中存活的20只再随机分为2个亚组:HSHF组10只,替米沙坦组10只。HSHF组继续用上述高糖高脂饮食喂养;替米沙坦组接受上述高糖高脂饮食喂养的同时予以替米沙坦5mg/kg.d灌胃。将对照组、HSHF组、替米沙坦组继续喂养3个月后,三组分别存活9只、8只、9只,随机选取三组中存活大鼠各6只,禁食8-12小时后测定大鼠体重,经腹腔注射乌拉坦(4ml/kg)麻醉,待大鼠麻醉后打开腹腔,经腹主动脉采血,将血浆离心(3000r/min 15min)分离出血清并分装于无菌EP管内,标本暂冻存于-70℃冰箱,统一测FPG、FINS并计算HOMA-IR(HOMA-IR=FPG(mmol/L)×FINS(μIU/mL)/22.5)。于无菌条件下摘取大鼠相同的两叶肝脏,其中一叶统一用10%中性甲醛固定做石蜡切片,后期经苏木精一伊红(HE)染色观察肝组织病理形态学变化;另一叶用锡箔纸包装标记并快速投放于液氮中,Western Blot法检测肝脏中M1型巨噬细胞特异性标志物诱导型一氧化氮合酶(iducible nitric oxide synthase,iNOS)和M2型巨噬细胞特异性标志物精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)蛋白的表达水平。结果:1.与对照组相比,HSHF组大鼠FPG、FINS及HOMA-IR均明显升高,差异有统计学意义(P0.05);与HSHF组大鼠相比,替米沙坦组大鼠FPG、FINS及HOMA-IR均明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。2.与对照组相比,HSHF组大鼠肝组织HE染色结果均可见弥漫性的脂肪变性,细胞核位于边缘,细胞多呈空泡状,体积显著增大,胞浆内可见中、大泡性的脂滴沉积,气球样变多见,胞质疏松,肝小叶和汇管区大量炎细胞浸润,点状坏死灶明显;与HSHF组相比,替米沙坦组肝组织HE染色结果可见肝细胞体积减小,脂滴体积变小,以小、中泡性的脂滴为主,气球样变及小叶内炎症均明显改善。3.与对照组相比,HSHF组大鼠肝脏iNOS蛋白表达水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05);与HSHF组大鼠相比,替米沙坦组大鼠iNOS蛋白表达水平显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。4.与对照组相比,HSHF组大鼠肝脏Arg-1蛋白表达水平显著降低,差异有统计学意义(P0.05);与HSHF组大鼠相比,替米沙坦组大鼠Arg-1蛋白表达水平显著增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:1.替米沙坦可降低长期HSHF膳食喂养大鼠的FPG、FINS水平,并改善其胰岛素抵抗状态。2.替米沙坦可减少长期HSHF膳食喂养大鼠肝脏脂肪含量及炎细胞浸润;并且可减少大鼠肝脏M1型巨噬细胞的标志物,并增加肝脏M2型巨噬细胞的标志物,推测替米沙坦可通过改变长期HSHF膳食喂养大鼠肝脏巨噬细胞极化状态进而减轻胰岛素抵抗状态。
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【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R965

【参考文献】