安定对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤保护作用及其机制的研究

发布时间：2018-05-01 18:44

  本文选题：安定 + 缺血缺氧性脑损伤　； 参考：《郑州大学》2014年硕士论文

【摘要】：新生儿缺血缺氧性脑损伤(hypoxia-ischaemia brain damage, HIBD)是指围产期新生儿窒息引起的脑部综合征，常可引起不可逆的脑组织损伤和一系列神经系统后遗症，是新生儿病死及发生神经系统残疾的主要原因之一。目的：在本研究中，探讨安定对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠的近远期脑保护作用，并对安定可能的脑保护作用新机制进行了初步探讨，为临床治疗HIBD提供参考。方法：7日龄新生Sprague-Dawley (SD)大鼠，随机分为三组(每组20只)：假手术组(Sham)、缺血缺氧模型组(HIBD)和安定治疗组(Diazepam)。HIBD模型组参照经典Rice-Vannucci法制作HIBD模型；假手术组仅游离出左侧颈总动脉，不做缺血缺氧处理。模型制备成功后安定治疗组立即腹腔注射剂量为10mg.kg-1.8h-1的安定，连续给药3天；其他两组给予相同剂量的生理盐水。通过氯化2，3，5-三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride, TTC)染色以及自主活动和Morris水迷宫实验来探讨安定对新生HIBD大鼠的近远脑期保护作用。同时，通过Real-time PCR、Western-blot以及免疫组织化学实验来检测KCC2mRNA、KCC2蛋白水平的表达情况。 结果： (1)新生大鼠HIBD模型的鉴定：新生大鼠缺血缺氧完成后，动物出现明显的左旋症状，说明HIBD模型建立成功。 (2) TTC染色结果显示：HIBD模型组有大面积的白色脑梗死区域，再次说明HIBD模型的制备是成功的。与HIBD模型组相比，安定治疗组的脑梗死区域明显减少(P0.01)，提示安定对于HIBD新生大鼠有一定的近期脑保护作用。 (3)自主活动实验结果显示：和假手术组相比，HIBD模型组的活动明显减少(P0.05)，给予安定治疗后活动有所增加，但无显著差异(P0.05)。 (4) Morris水迷宫实验结果显示：在定位航行试验中，5天总平均逃避潜伏期为HIBD组＞安定治疗组＞假手术组，从第三天开始各组之间相比结果有差异(P0.05or P0.01)；在空间探索试验中，HIBD模型组大鼠的目标象限停留时间百分比和穿越站台次数明显减少，给予安定治疗后有一定的改善(P0.05orP0.01)。说明HIBD后大鼠学习记忆能力下降，安定治疗能够减轻HIBD对远期学习记忆能力的损害。 (5) RT-PCR、Western-blot以及免疫组织化学实验结果显示：KCC2-mRAN和蛋白表达水平在HIBD后显著下调(P0.05or P0.01)，给予安定治疗后有一定的提高。 结论： (1)早期给予安定治疗可以明显减少HIBD新生大鼠的脑梗死体积，表明安定对HIBD损伤有一定的早期保护作用； (2)早期给予安定治疗可以明显改善HIBD新生大鼠的自主活动能力和空间学习记忆能力，表明安定可以改善远期神经系统预后； (3)安定通过阻止KCC2在mRAN和蛋白水平上表达的下降，从而发挥脑保护作用。 综上所述：安定对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤有一定的近远期保护作用，，其可能的作用机制是通过防止KCC2表达的下调，维持细胞内Cl-的稳态，确保GABA发挥抑制性神经递质的作用，从而起到脑保护的作用。
[Abstract]:Hypoxia-ischaemia brain damage (HIBD) is the brain syndrome caused by neonatal asphyxia in perinatal period, which often causes irreversible brain tissue damage and a series of neurological sequelae. It is one of the main causes of neonatal mortality and neurological disability. Objective: to discuss in this study The protective effect of diazepam on neonatal rats with ischemic and anoxic brain injury and the possible new mechanism of the protective effect of diazepam were preliminarily discussed. Methods: 7 day old Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into three groups (20 each group): sham operation group (Sham), ischemic hypoxia model group (HIBD The.HIBD model group (Diazepam) and the diazepam group (Diazepam) group made the HIBD model with the reference of the classic Rice-Vannucci method. The sham operation group was only free from the left common carotid artery and did not do the ischemic anoxia treatment. After the success of the model preparation, the abdominal cavity injection was 10mg.kg-1.8h-1 diazepam, and the other two groups were given the same dose. Physiological saline. The protective effect of diazepam on newborn HIBD rats was investigated by 2,3,5- three phenyl tetrazolium (2,3,5-triphenyltetrazolium chloride, TTC) staining, autonomic activity and Morris water maze test. Meanwhile, KCC2mRNA, KCC2 protein was detected by Real-time PCR, Western-blot and immunohistochemistry. The level of expression.
Result锛

本文编号：1830611