依博素检测方法的研究
本文选题:依博素 + ICE酶 ; 参考:《中国新药杂志》2015年01期
【摘要】:目的:依博素是一种链霉菌产生的新天然化合物,体内具有较强抗类风湿关节炎活性,有可能发展成为具有我国自主知识产权的新药。为了确定发酵液中依博素的含量,基于其对ICE酶(IL-1β转化酶)具有抑制活性,本研究建立了一种检测依博素的方法。方法:以荧光标记的ICE酶底物Ac-Trp-Glu-AlaAsp-AMC与含依博素的发酵液进行反应,采用不加依博素及重组ICE酶的样品作为对照,用多标记微孔板检测仪测定产物荧光强度,确定发酵液中依博素的含量。结果:采用上述方法,分别对多批次摇瓶及发酵罐培养的发酵液进行了测定,结果显示,本方法可有效确定发酵液中依博素的含量。结论:本方法是检测依博素发酵水平的有效方法。
[Abstract]:Objective: ephedrin is a new natural compound produced by Streptomyces. It has strong anti-rheumatoid arthritis activity in vivo and may develop into a new drug with independent intellectual property rights in China. In order to determine the content of ephedrin in fermentation broth, based on its inhibitory activity on ICE enzyme (IL-1 尾 invertase), a method for the detection of ephedrin was established in this study. Methods: the fluorescence labeled ICE substrate Ac-Trp-Glu-AlaAsp-AMC was used to react with the fermentation broth containing epophorin. The fluorescence intensity of the product was determined by multi-label microplate detector. To determine the content of ephedrin in fermentation broth. Results: the fermentation broth cultured in many batches of shaking flask and fermenter were determined by the above method. The results showed that the method could effectively determine the content of ephedrin in fermentation broth. Conclusion: this method is an effective method for detecting the fermentation level of ephedrin.
【作者单位】: 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所 卫生部抗生素生物工程重点实验室;华北制药集团新药研究开发有限责任公司;
【基金】:国家“重大新药创制”科技重大专项(2012ZX09301002-001-023-02)
【分类号】:R927
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,本文编号:2118572
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