地塞米松对小鼠输卵管炎组织中TLR2和TLR4表达的影响及其意义

发布时间：2018-12-12 00:20

【摘要】：目的 近年来输卵管感染的发病率居高不下,直接危害着人类的生殖健康,如何有效地及时治疗并防止其后遗症的发生是亟待解决的问题。天然免疫是机体抵御病原体感染的第一道防线,Toll样受体是组成天然免疫的最重要的模式识别受体家族之一,是启动天然免疫反应第一步的关键,其适度表达有利于病原体的清除,而表达过度或不足可能发生输卵管炎症病变。TLR2和TLR4在输卵管组织中表达,并且可与金黄色葡萄球菌的病原体相关模式分子结合,参与输卵管炎的形成。传统上认为糖皮质激素(GCs)可抑制免疫应答、减弱机体抗感染能力,但GCs在临床治疗中的使用并未被普遍接受。纵然,目前抗生素能解决输卵管感染的问题,但在很大程度上并不能改变炎症对输卵管组织的破坏。本研究拟通过比较低、中、高三组不同剂量地塞米松(DXM)、青霉素以及DXM+青霉素干预下,金黄色葡萄球菌致小鼠输卵管炎组织中Toll样受体2和4(TLR2、TLR4) mRNA的表达变化,了解DXM在输卵管炎症中的可能作用机制,并明确不同浓度DXM对炎症反应的调控,以期了解其对输卵管炎症愈后的影响,从而改善输卵管炎症的预后和生育结局。 方法 将35只小鼠随机分成空白组、金黄色葡萄球菌组、1mg/kgDXM组、5mg/kgDXM组、10mg/kgDXM组、青霉素组、1mg/kgDXM+青霉素组共7组,每组5只；建立金黄色葡萄菌致小鼠输卵管炎模型。空白组：不处理。金黄色葡萄球菌组：经阴道-宫颈接种1×109/mL金黄色葡萄球菌悬液50ul,注入宫底。1mg/kgDXM组：接种方法同金葡菌组,3天后腹腔注射1mg/kgDXM,每天一次连续4天。5mg/kgDXM组：接种方法同金葡菌组,3天后腹腔注射5mg/kgDXM,每天一次连续4天。10mg/kgDXM组：接种方法同金葡菌组,3天后腹腔注射10mg/kgDXM,每天一次连续4天。青霉素组：接种方法同金葡菌组,3天后腹腔注射青霉素5万单位,每天一次连续4天。1mg/kg DXM+青霉素组：接种方法同金葡菌组,3天后腹腔注射1mg/kgDXM和5万单位青霉素,每天一次连续4天。通过组织病理学观察输卵管炎症病变程度,Real-time PCR测定各组小鼠输卵管组织中TLR2mRNA和TLR4mRNA的表达。病理学判断输卵管炎症程度标准：“-”表示上皮细胞排列整齐,无明显实质性变性、坏死,纤毛丰富,管腔无狭窄,无结缔组织增生、炎细胞浸润；“+”表示上皮细胞呈立方状或矮柱状,纤毛增粗、部分消失,管腔少量粘连,结缔组织少量增生,有少量炎细胞浸润；“++”表示上皮细胞呈扁平状,纤毛进一步消失,管腔部分粘连,结缔组织部分增生,有部分炎细胞浸润；“+++”表示上皮细胞大量增生,管腔严重粘连,纤毛完全消失,结缔组织显著增生,大量炎细胞浸润。结果 1.病理学观察空白组：输卵管管壁组织结构清晰,管腔通畅,黏膜层可见排列整齐的上皮细胞,纤毛丰富。除DXM1+青霉素组外,其余实验组管腔不同程度的增厚、严重的有粘连,纤毛不同程度的脱落甚至消失,结缔组织增生、炎细胞浸润。本实验各组小鼠输卵管病变程度表现为：10mg/kgDXM组5mg/kgDXM组1mg/kgDXM组金黄色葡萄球菌组青霉素组1mg/kgDXM+青霉素组。 2.RT-PCR检测发现TLR2mRNA和TLR4mRNA在输卵管炎组织中的表达有不同程度的升高。①TLR2mRNA的表达：金葡菌组表达显著高于空白组(p0.05),1、5、10mg/kgDXM组和金葡菌组相比均达到统计学差异(p0.05),并随着DXM剂量的减少,表达增高,1mg/kgDXM组表达最高。TLR2mRNA的表达量为：1mg/kgDXM组青霉素组5mg/kgDXM组金黄色葡萄球菌组10mg/kgDXM组1mg/kgDXM+青霉素组空白组。②TLR4mRNA的表达：金葡菌组表达略高于空白组,无统计学意义(p0.05)。1mg/kgDXM组表达最高,1mg/kgDXM组、青霉素组与金黄色葡萄球菌组相比,均达到统计学差异(p0.05);1mg/kgDXM+青霉素组与金黄色葡萄球菌组相比无显著差异(p0.05).TLR4mRNA表达量表现为1mg/kgDXM组5mg/kgDXM组1mg/kgDXM+青霉素组金黄色葡萄球菌组空白组10mg/kgDXM组青霉素组。结论 1、调节TLR2mRNA和TLR4mRNA的表达可能是DXM影响输卵炎愈后的因素之一 2、青霉素联合小剂量DXM能改善输卵管炎症的愈后。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R965

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本文编号：2373519