柱前衍生化液相色谱-质谱联用法测定大鼠血浆中5-羟色胺的浓度

发布时间：2019-01-21 19:56

【摘要】：目的:建立应用液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)测定大鼠血浆(包括富含血小板血浆)中5-羟色胺浓度的方法,并将其应用于感染后肠易激综合征模型大鼠体内5-HT的测定。方法:血浆样品在加入甲巯咪唑(内标)后用苯甲酰氯作为衍生试剂,以四硼酸钠为催化试剂,室温下进行柱前衍生。样品在甲醇沉淀蛋白后采用ESI电离源在正离子模式下检测,用Agilent Zorbax eclipse plus C18色谱柱,甲醇-水溶液为流动相洗脱,流速为1.0ml·min-1。结果:经衍生后5-HT在大鼠富含血小板血浆及血浆中其线性范围及定量限均符合测定要求,日内、日间精密度及基质效应均15%;肠易激综合征大鼠血浆中游离5-HT相较正常组大鼠显著增高。结论:本方法快速、灵敏、专属性强且重现性好,可用于大鼠血浆中5-HT浓度的测定。
[Abstract]:Objective: to establish a method for the determination of serotonin in rat plasma (including platelet-rich plasma) by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS/MS). It was applied to the determination of 5-HT in rats with irritable bowel syndrome after infection. Methods: after adding methimazole (internal standard) to plasma samples, benzoyl chloride was used as derivative reagent, sodium tetraborate as catalytic reagent and pre-column derivatization at room temperature. After the protein was precipitated by methanol, the samples were detected by ESI ionization source in a positive ion mode. The chromatographic column was Agilent Zorbax eclipse plus C18, the mobile phase was methanol-aqueous solution, and the flow rate was 1.0ml min-1.. Results: the linear range and the quantitative limit of 5-HT in platelet-rich plasma and plasma of rats were in accordance with the requirement of determination. During the day, the interday precision and matrix effect were 15%. The level of free 5-HT in plasma of irritable bowel syndrome rats was significantly higher than that of normal rats. Conclusion: this method is rapid, sensitive, specific and reproducible, and can be used for the determination of 5-HT in rat plasma.
【作者单位】： 兰州大学第一医院药剂科;兰州大学药学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号81341145,81400596)
【分类号】：R927.2;O657.63

【共引文献】

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本文编号：2412985