孟鲁司特钠经直肠、鼻腔给药的吸收及促进剂对吸收影响的研究

发布时间：2019-05-29 09:19

【摘要】：研究背景及目的哮喘作为一种常见的变态反应,诱发因素众多。临床治疗哮喘通常是使用长效吸入型β2受体激动剂(LABA)和吸入型糖皮质激素(ICS),茶碱类,抗胆碱类药物等。采用呼吸道吸入,或是口服给药的形式。我国的哮喘发病率呈上升趋势,且儿童的患病率高于成年人。而我们国家儿童人数大,且儿童越来越受到重视,因此关注儿童给药制剂成为一种趋势,国家近年来为儿童用药出台相关文件,越来越多的企业会生产适合儿童使用的药物剂型,儿童用药将会得到支持和普及。目前儿童常用剂型有:分散片、咀嚼片、泡腾制剂、颗粒剂等,但不宜于婴幼儿吞咽且依从性差。直肠给药是重要的临床给药途径,对不易吞咽的儿童、精神病患者或是昏迷患者尤为适用。用药方便、起效快、用后无创伤感,可以发挥局部或全身的治疗作用。直肠褶皱少,无绒毛,正常情况下是空的,因此当药物吸收时,较少受到其他肠道内容物的影响。同时有一条下直肠静脉可以绕过肝脏,经过骼内静脉直接进入体循环,避免首过效应,直肠成为药物吸收的理想部位。直肠给药还可避免胃酸和各种胃肠道酶对药物分子的降解,提高生物利用度;同时还避免药物对胃肠道刺激。直肠给药后,药物起效的速度和程度还取决于药物的理化性质、药物的剂型、药物的处方组成等。目前常见直肠制剂有栓剂、微型灌肠剂、凝胶剂等。鼻腔给药也是重要的临床给药途径,无首过效应、使用方便、速效、顺应性好,易于被婴幼儿患者被接受。鼻腔吸收药物的主要区域是位于鼻腔上部的黏膜,鼻黏膜存在着大量的细微绒毛,药物可吸收的有效表面积大大增加,因黏膜处含有丰富的毛细血管和淋巴网,使得药物向血液和组织处渗透,药物即可迅速通过血管壁进入体循环和脑。一些水溶性大的药物在胃肠道难以被吸收,通过鼻腔给药,可提高生物利用度且减少毒副作用。鼻腔制剂主要剂型有:滴鼻剂、喷雾剂等。孟鲁司特钠作为抗哮喘药物,常用的给药剂型为片剂、颗粒剂等口服制剂,尚无通过直肠、鼻腔给药的制剂。结合直肠、鼻腔给药部位的药物吸收特点,制备孟鲁司特钠的直肠、鼻腔给药剂型,有可能达到快速缓解哮喘症状的治疗效果;本实验目的是以静脉注射为对照,考察孟鲁司特钠经直肠和鼻腔的吸收情况,为直肠、鼻腔给药剂型提供依据。研究方法第一部分孟鲁司特钠血药浓度测定方法的建立实验采用高效液相色谱法和荧光检测建立孟鲁司特钠家兔体内血药浓度测定方法,对该测定方法的精密度、准确度、稳定性等进行考察,评价该方法的可行性,为实验后期提供依据。孟鲁司特钠对照品用甲醇溶解、稀释成系列标准对照品溶液、再用空白血浆稀释成系列标准样品溶液后,按拟定的血浆样品处理方式及色谱条件进行分析测定,制备标准曲线。根据标准曲线,在设定的最低定量限、低、中、高四个浓度制备血浆样品并处理测定,对方法的精密度、回收率、稳定性等指标进行评价.第二部分孟鲁司特钠经直肠、鼻腔给药的生物利用度考察选取禁食24小时的家兔,以静注给药途径作为对照,进行孟鲁司特钠经直肠、鼻腔给药的绝对生物利用度考察。孟鲁司特钠按50mg/kg、10mg/kg的剂量对家兔进行直肠、鼻腔给药。根据预实验结果在给药后0.17、0.33、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00h和1、3、5、10、20、30、45、60、90、120、180分钟时间点经耳缘静脉取血,按确定的孟鲁司特钠血药浓度测定方式测定其浓度,得出血药浓度曲线并使用药动学数据统计软件DAS3.1.6进行分析,计算药动学参数,由公式F直=AUC直肠/AUC静脉、F鼻=AUC鼻腔/AUC静脉计算绝对生物利用度。第三部分不同类型促进剂对孟鲁司特钠经直肠给药吸收影响的研究根据预实验结果,选取癸酸钠、吐温-80、月桂酸钠、胆酸钠、L-精氨酸、月桂氮卓酮、EDTA-2NA、盐酸氯丙嗪8种吸收促进剂,与孟鲁司特钠制成灌肠液,按50mg/kg的剂量对禁食24小时的家兔进行直肠给药。根据预实验结果在给药后的0.17、0.33、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00h时间点经耳缘静脉取血,按确定的孟鲁司特钠血药浓度测定方式测定其浓度,每个浓度使用5只家兔平行测定,得出血药浓度曲线并使用药动学数据统计软件DAS3.1.6进行分析,计算药动学参数,对促进剂的促吸收作用效果进行评价。第四部分不同类型促进剂对孟鲁司特钠经鼻腔给药吸收影响的研究选取吐温-80、胆酸钠、癸酸钠3种不同类型吸收促进剂,与孟鲁司特钠制成滴鼻液,按10mg/kg的剂量对禁食24小时的家兔进行鼻腔给药。根据预实验结果在给药后的1、3、5、10、20、30、45、60、90、120、180分钟时间点经耳缘静脉取血,按确定的孟鲁司特钠血药浓度测定方式测定其浓度,每个浓度使用5只家兔平行测定,得出血药浓度曲线并使用药动学数据统计软件DAS3.1.6进行分析计算药动学参数,对促进剂的促吸收作用效果进行评价。主要研究结果第一部分孟鲁司特钠血药浓度测定方法的建立1.1标准曲线:孟鲁司特钠在0.1~10μg/m L的浓度范围内线性关系良好,r=0.9998。1.2精密度日内精密度:在定量下限、低、中、高浓度为0.1、0.2、1、8μg/m L时,RSD分别是7.70%、5.05%、1.97%、3.65%。日间精密度:在定量下限、低、中、高浓度为0.1、0.2、1、8μg/m L时,RSD分别是7.40%、5.51%、3.63%、4.66%。结果表明,方法重现性良好,满足实验要求。1.3回收率方法回收率:在定量下限、低、中、高浓度为0.1、0.2、1、8μg/mL时,RSD分别是8.86%、4.94%、2.71%、2.72%。绝对回收率:在低、中、高浓度为0.2、1、8μg/m L时,SD分别是2.66%、1.51%、5.33%结果表明,方法的灵敏度、准确度满足实验要求。1.4稳定性血浆样品室温放置4h的稳定性:低、中、高浓度为0.2、1、8μg/m L的血浆样品室温放置0、2、4时测定血药浓度,浓度测定结果的RSD分别是7.43%、6.90%、5.76%。经历2次冷冻-解冻循环:低、中、高浓度为0.2、1、8μg/m L的血浆样品,经历1、2次冷冻-解冻循环后测定血药浓度,并与第0次相比,浓度测定结果的RSD分别是3.01%、4.45%、6.43%。-70℃冷冻放置14天:在低、中、高浓度为0.2、1、8μg/m L的血浆样品,在-70℃冷冻放置7天、14天后测定血药浓度,浓度测定结果的RSD分别是7.12%、2.04%、2.36%。孟鲁司特钠标准液在4℃放置4天:标准液在4℃的HPLC样品处理室放置4天后,RSD为7.65%。结果表明孟鲁司特钠在上述条件下稳定性良好,满足实验要求。1.5血浆样品稀释100倍后测定孟鲁司特钠浓度,浓度测定结果的RSD为4.03%,表明稀释步骤对结果影响小,满足实验要求。第二部分孟鲁司特钠经直肠、鼻腔给药的生物利用度考察孟鲁司特钠按50mg/kg的剂量直肠给药后的T_(max)为0.33h,C_(max)为0.92mg/L,绝对生物利用度为0.51%;75mg/ml孟鲁司特钠鼻腔给药后,T_(max)为0.75h,C_(max)为0.39mg/L,绝对生物利用度为3.23%。结果表明孟鲁司特钠本身可通过直肠、鼻腔进行吸收,但生物利用度低,直肠、鼻腔为该药物的非良好吸收部位;经直肠、鼻腔给药的T_(max)远小于资料报道的孟鲁司特钠口服后T_(max)3h,表明孟鲁司特钠经直肠和鼻腔吸收迅速。第三部分不同类型促进剂对孟鲁司特钠经直肠给药吸收影响的研究在不同浓度促进剂作用下,孟鲁司特钠按50mg/kg的剂量直肠给药后的药动学参数及绝对生物利用度为:3.1癸酸钠在浓度为1%时孟鲁司特钠的绝对生物利用度是3.01%,是未加吸收促进剂的5.9倍,T_(1/2)、T_(max)、C_(max)、AUC_(0-t)分别是2.49h、1h、3.46mg/L、10.62mg/L*h。促进效果和该促进剂使用浓度有关:1%0.5%0.2%。3.2吐温-80在浓度为10%时孟鲁司特钠的绝对生物利用度是5.28%,是未加吸收促进剂的10.4倍,T_(1/2)、T_(max)、C_(max)、AUC_(0-t)分别是1.38h、1h、6.18mg/h、18.62mg/L*h。促进效果和该促进剂使用浓度有关:10%5%15%。3.3月桂氮卓酮在浓度为4%时孟鲁司特钠的绝对生物利用度是2.33%,是未加吸收促进剂的4.6倍,T_(1/2)、T_(max)、C_(max)、AUC_(0-t)分别是4.98h、1h、2.30mg/L、8.22mg/L*h。促进效果和该促进剂使用浓度有关:4%2%10%。3.4胆酸钠在浓度为0.2%时孟鲁司特钠的绝对生物利用度是2.12%,是未加吸收促进剂的4.15倍,T_(1/2)、T_(max)、C_(max)、AUC_(0-t)分别是2.36 h、0.5h、2.30 mg/L、7.48mg/L*h。促进效果和该促进剂使用浓度有关:0.2%0.5%0.1%。3.5 L-精氨酸在浓度为1.5%时孟鲁司特钠的绝对生物利用度是2.31%,是未加吸收促进剂的4.53倍,T_(1/2)、T_(max)、C_(max)、AUC_(0-t)分别是4.36 h、1h、2.29mg/L、8.14mg/L*h。促进效果和该促进剂使用浓度有关:1.5%1%0.5%。3.6月桂酸钠在浓度为3%时孟鲁司特钠的绝对生物利用度是1.62%,是未加吸收促进剂的3.18倍,T_(1/2)、T_(max)、C_(max)、AUC_(0-t)分别是2.98h、1h、2.11mg/L、5.71mg/L*h。促进效果和该促进剂使用浓度有关:3%2%1%。3.7盐酸氯丙嗪在浓度为2%时孟鲁司特钠的绝对生物利用度是0.83%,是未加吸收促进剂的1.63倍,T_(1/2)、T_(max)、C_(max)、AUC_(0-t)分别是2.34h、1h、1.51mg/L、3.91mg/L*h。3.8 EDTA-2NA在浓度为1%时孟鲁司特钠的绝对生物利用度是0.73%,是未加吸收促进剂的1.43倍,T_(1/2)、T_(max)、C_(max)、AUC_(0-t)分别是2.22h、1h、1.40mg/L、3.56mg/L*h。结果表明,上述促进剂均能提高孟鲁司特钠在直肠的吸收,但促进程度不同,与该促进剂使用浓度有关,目前所考察的促进剂尚未达到满意效果。第四部分不同类型促进剂对孟鲁司特钠经鼻腔给药吸收影响的研究在孟鲁司特钠给药剂量为10mg/kg时,不同促进剂作用下孟鲁司特钠的药动学参数与绝对生物利用度为:4.1癸酸钠在浓度为1%时,孟鲁司特钠的绝对生物利用度是7.4%,是未加吸收促进剂的2.3倍,T_(1/2)、T_(max)、C_(max)、AUC_(0-t)分别是8.08h、3h、0.60mg/L、1.39mg/L*h。4.2胆酸钠在浓度为1%时,孟鲁司特钠的绝对生物利用度是4.4%,是未加吸收促进剂的1.4倍,T_(1/2)、T_(max)、C_(max)、AUC_(0-t)分别是1.07h、0.5h、0.82mg/L、0.82mg/L*h。4.3吐温-80在浓度为5%时,孟鲁司特钠的绝对生物利用度是5.3%,是未加吸收促进剂的1.7倍,T_(1/2)、T_(max)、C_(max)、AUC_(0-t)分别是3.25h、0.75h、0.55mg/L、1.00mg/L*h。结果表明,上述促进剂均能提高孟鲁司特钠在鼻腔的吸收,但促进效果不明显。结论1.所建立测定孟鲁司特钠在家兔体内血药浓度的HPLC检测方法,其线性范围、精密度、准确度、稳定性等满足实验要求。2.孟鲁司特钠能够经直肠和鼻腔吸收,但生物利用度较低,表明直肠和鼻腔不是该药物的良好吸收部位。3.所考察的8种直肠吸收促进剂均能促进孟鲁司特钠的直肠吸收,促进剂的作用与使用浓度有关,大多随浓度的增加而提高;不同促进剂对孟鲁司特钠直肠吸收促进作用为:10%吐温-801%癸酸钠0.2%胆酸钠4%月桂氮卓酮3%月桂酸钠1.5%L-精氨酸,2%盐酸氯丙嗪与1%EDTA-2Na效果相近。所考察的吸收促进剂对孟鲁司特钠生物利用度提高不够理想,需进一步的考察与筛选。然而,孟鲁司特钠灌肠液直肠给药后的T_(max)除含胆酸钠的为0.5h外,其他吸收促进剂T_(max)均为1h,表明药物在直肠的吸收速度快较快。4.所考察的3种吸收促进剂胆酸钠、吐温-80、癸酸钠均能促进孟鲁司特钠的鼻腔吸收,不同促进剂对孟鲁司特钠鼻腔吸收促进作用为:1%胆酸钠1%癸酸钠5%吐温-80,生物利用度较低。含胆酸钠、吐温-80、癸酸钠的孟鲁司特钠滴鼻液鼻腔给药后的T_(max)分别为0.5、0.75、3h,表明胆酸钠能使孟鲁司特钠鼻腔吸收速度加快。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R965

【参考文献】