青霉菌对甾体肟的生物转化及对HeLa,RD细胞增殖抑制作用研究

发布时间：2019-08-01 07:21

【摘要】：近年来,为得到不同生理活性的甾体化合物,在其母核或支链上引入不同官能团。甾体肟类化合物具有抑菌、抗肿瘤、抗病毒等生理活性。本研究通过生物转化获得甾体肟类衍生物,为甾体药物的研究开发提供物质基础和理论依据,具有一定的实际应用价值。从土壤中筛选得到一株能转化甾体肟的菌株,经形态鉴定,确定为沙门柏干酪青霉菌。利用沙门柏干酪青霉菌对合成的3β-羟基-5-烯类甾体肟进行生物转化研究,转化产物通过硅胶柱层析法进行分离,利用波谱学方法对结构进行鉴定。采用MTT法检测甾体酮原料、甾体肟及生物转化产物对宫颈癌He La细胞和人恶性胚胎横纹肌瘤RD细胞的增殖抑制作用。沙门柏干酪青霉菌对甾体肟的生物转化结果表明,生物转化过程中主要发生羟基化反应,并且伴有肟基的水解。16α,17α-环氧孕甾烯醇酮肟(5)的环氧键发生了复杂反应,产生稳定的五元杂环新化合物3β,7α,16α-三羟基-雄甾-5-烯-[16,17-d]-3′-甲基异VA唑(9),同时得到转化产物7α-羟基~(-1)6α,17α-环氧孕甾烯醇酮肟(8)。孕甾烯醇酮肟(6)发生了7α,11α-双羟基化及C-20位肟基的水解反应,得到转化产物7α-羟基-孕甾烯醇酮肟(10)、7α,11α-二羟基-孕甾烯醇酮(11)和6α-羟基-20-肟-孕甾-4-烯-3酮(12)。去氢表雄酮肟(7)的生物转化主要发生在7α-羟基,并伴有C-3羟基氧化为羰基同时C-6位发生6α-羟基化,得到转化产物7α-羟基-去氢表雄酮肟(13)、7β-羟基-去氢表雄酮肟(14)和7α-羟基-20-肟-孕甾-4-烯-3-酮。采用MTT法对甾体化合物进行体外活性测试,结果表明:He La细胞和RD细胞在甾体化合物作用下均出现细胞增殖抑制,呈时间-剂量依赖性。孕甾烯醇酮肟(6)对两种肿瘤细胞的增值抑制作用最强,He La细胞和RD细胞的IC50分别为14.0μg·m L~(-1)和11.7μg·m L~(-1)。在转化产物中,7α-羟基去氢表雄酮肟化合物(13)对两种肿瘤细胞的增殖抑制作用最强,IC50值分别为38.2μg·m L~(-1)和22.7μg·m L~(-1)。综上所述,从土壤中筛选出一株能转化甾体肟的菌株,利用该菌株对甾体肟进行生物转化得到甾体肟类衍生物。体外活性测试结果表明:甾体酮,甾体肟及转化产物对He La和RD细胞均有一定的抑制作用。
【学位授予单位】：黑龙江八一农垦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R915

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