厄贝沙坦和辛伐他汀对大鼠体内吉非替尼药代动力学影响的研究

发布时间：2019-08-01 06:38

【摘要】：目的:酪氨酸激酶由于在肿瘤细胞中高表达,并且与肿瘤的生长、增殖、转移紧密联系,近年来作为肿瘤治疗的一个非常重要的药物靶点被广泛研究。酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)是以受体酪氨酸激酶为靶点的药物,具有选择性较高、疗效较好、不良反应比较少等特点,尤其是对基因突变的敏感性患者,TKIs治疗显示了很好的临床疗效。TKIs之一吉非替尼,主要适用于治疗以往接受过化学治疗,转移性非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的患者,或者不适于化疗的局部晚期肿瘤的患者。这些肿瘤患者中有些同时患有高血压,高血脂等疾病,服用厄贝沙坦或辛伐他汀等降血压,降血脂的药物。厄贝沙坦和辛伐他汀可能会与吉非替尼在体内发生相互作用,产生药代动力学的影响。因此,本试验将建立快速、高效、准确的液相色谱串联质谱法(Liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)测定酪氨酸酶抑制剂吉非替尼血药浓度,并通过药代动力学方法评价厄贝沙坦和辛伐他汀对吉非替尼体内代谢的影响,旨在为临床合理用药提供参考。方法:1 LC-MS/MS法测定吉非替尼血浆药物浓度1.1色谱与质谱条件色谱柱:Gemini C18(50×2.0 mm,5μm);柱温:40℃;自动进样器温度:4℃;流动相:0.05%NH3·H20(A)-乙腈(B);流速:0.5ml·min-1;梯度洗脱条件:0.01-1 min,5%B;1-1.5 min,5%-95%B;1.5-2.5 min,95%B;2.5-3 min,95%-5%B;4 min,5%B。离子源:ESI;离子监测方式:MRM;离子极性:正离子;CUR:25 kPa;CAD:8 kPa;离子源喷雾电压:5500v;离子源温度:500℃;EP:10 V;CXP:6 V;GS1:50 kPa;GS2:50kPa;吉非替尼离子对:446.9/128.0 m/z,CE:30 V,DP:80 V;内标厄洛替尼离子对:394.2/277.9 m/z,CE:37 V,DP:113 V。1.2血浆样品的处理精密取空白血浆90μl,加不同稀释浓度吉非替尼标准溶液10μl,加内标厄洛替尼(1μg/ml)10μl,涡旋20s,加乙腈500μl,涡旋3min,离心(15000g·min-1)5min,精密取上清50μl加入450μl水,涡旋1min,离心(15000g·min-1)3min,进样,建立吉非替尼血药浓度测定方法。2实验动物分组及给药SD大鼠30只,按体重随机分为3组,对照组(吉非替尼单药组)、实验组a(吉非替尼+厄贝沙坦组)、实验组b(吉非替尼+辛伐他汀组),给药剂量吉非替尼片为50mg/kg,厄贝沙坦片为15mg/kg,辛伐他汀片为2mg/kg,在给药后在0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、12、24、48、72h时间点于大鼠眼内眦取血。3比较厄贝沙坦和辛伐他汀分别对吉非替尼药代动力学的影响用das3.0软件处理吉非替尼血药浓度,得到给药后大鼠非房室模型的药代参数,用spss20.0软件处理非房室模型的药代参数,并比较厄贝沙坦和辛伐他汀分别对吉非替尼药代动力学参数的影响。结果:1lc-ms/ms法测定吉非替尼血浆药物浓度方法学结果显示所选方法专属性高,血浆中内源性物质不干扰测定,标准曲线方程:y=0.00543x+0.00548,r=0.9943,最低定量限为5ng/ml,最低定量限精密度的rSD%小于20%,质控样品的日内精密度和日间精密度rSD均小于15%,最低定量限和质控样品的准确度均在85-115%范围内,室温4h、血浆处理后自动进样器12h、反复冻融三次、低温冰箱-70℃长期放置、稀释10倍,20倍稳定性的准确度均在85-115%范围内,基质效应、样品回收率均符合《中国药典》生物样本分析指导原则的要求。2采用das3.0软件处理吉非替尼血药浓度,采用统计学方法评价厄贝沙坦和辛伐他汀对吉非替尼药代动力学的影响。实验组a:(吉非替尼+厄贝沙坦)给药组的非房室模型参数auc(0-t)、auc(0-∞)、cmax、tmax、t1/2、vd、cl、mrt(0-t)、mrt(0-∞)、c_last与对照组(吉非替尼单药组)比较均无统计学差异。实验组b:(吉非替尼+辛伐他汀)给药组的非房室模型参数auc(0-t)、auc(0-∞)、cmax、tmax、t1/2、mrt(0-t)、mrt(0-∞)、c_last、tmax、mrt(0-t)与对照组(吉非替尼单药组)比较均无统计学差异。而vd和cl与对照组(吉非替尼单药组)比较具有显著的统计学差异(P0.05)。结论:1本实验建立的LC-MS/MS法测定吉非替尼血药浓度的方法,具有准确、高效、简便的特点,方法学考察结果均符合生物样品分析的质量控制要求。2本实验通过比较联用厄贝沙坦组和辛伐他汀组与吉非替尼单药组的药代参数,结果显示,厄贝沙坦对大鼠体内吉非替尼的药代动力学参数没有发现有显著影响,辛伐他汀显著影响大鼠体内吉非替尼的Vd和CL,而对其他药代动力学参数无影响。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R965

【参考文献】