贝前列素钠对全脑缺血再灌注大鼠脑损伤的作用及机制

发布时间：2019-09-12 14:23

【摘要】：目的：观察PGIS-PGI2-IP信号通路在全脑缺血再灌注脑损伤大鼠海马中的时程表达变化特征，以及IP激动剂贝前列素钠对全脑缺血再灌注致大鼠脑损伤的保护作用。方法：采用夹闭双侧颈总动脉合并低血压的方法建立大鼠全脑缺血再灌注脑损伤模型。多普勒激光脑血流仪监测大鼠在缺血再灌注手术过程中的脑血流变化。分别在再灌注30min、2h、6h、24h、48h、7d和15d时观察SOD活性，MDA与PGI2含量，PGIS与IP表达变化。贝前列素钠（50，100ug·kg-1）术前30min灌胃给药。水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力，HE染色观察大鼠海马神经元形态结构变化；黄嘌呤氧化酶法，TBA法分别测定大鼠海马中SOD活性，MDA含量变化；ELISA测定大鼠海马PGI2含量，RT-PCR检测大鼠海马PGIS与IP mRNA表达情况。结果：全脑缺血大鼠脑血流降低74.45%。与假手术组相比，全脑缺血再灌注大鼠寻台潜伏期，寻台路径显著增加；海马神经元出现明显核固缩，细胞层次紊乱，，神经细胞数目明显减少，并随再灌注时间延长而损伤加重；全脑缺血再灌注大鼠海马SOD活性降低，MDA含量增加，PGI2含量明显增加；PGIS与IP mRNA表达明显增加。与模型组相比较，贝前列素钠能明显改善大鼠空间学习记忆能力；减轻大鼠海马神经元损伤；升高海马SOD活性，降低MDA含量；明显降低海马PGI2含量，抑制海马PGIS及IP mRNA表达。结论： PGIS-PGI2-IP信号通路可能参与了大鼠全脑缺血再灌注致脑损伤过程。贝前列素钠对全脑缺血再灌注大鼠脑损伤具有明显的保护作用，其机制可能涉及调控PGIS-PGI2-IP信号通路平衡。
【图文】：

含量测定,具体操作,标准品,标准管

MDA 含量(nmol/mg protein)=（测定管吸光度值-测定空白管吸光度值）/（标准管吸光度值-标准空白管吸光度值）×标准品浓度（10 nmol/ml）/蛋白含量（mgprotein/ml）。1.2.7 PGI2含量测定每组各取 4 只大鼠用于 PGI2含量测定，PGI2易被代谢为较稳定但无生物活性的 6-keto-PGF1α，因而用 6-keto-PGF1α的含量间接反映海马组织中 PGI2含量变化，用 ELISA 法测定大鼠海马组织中 6-keto-PGF1α含量，具体操作按照说明书进行，步骤如下：1.2.7.1 制备 0.5%海马组织匀浆液将海马组织从-80 ℃取出，海马称重后按质量体积比 1∶199 加入 EIAbuffer，匀浆，于 4 ℃，1200×g，离心 15 min，分取上清液备用。1.2.7.2 海马组织中 6-keto-PGF1α含量测定（1）用 EIAbuffer 稀释标准品，具体操作如下：

脑血流变化,再灌注,血流,基线

GIS、IP 的光密度值，分别用 PGIS、IP 与 β-actin 的光密度比值A 的相对表达量。分析Quantity One 分析 PCR 结果，Image-Pro Plus 6.0 分析 HE 结果x±s 表示，SPSS17.0 进行统计学处理，用单因素 ANOVA 分析Dunnett’s t 进行分析，以 P<0.05 为有显著性差异。IR 大鼠脑血流变化缺血处理前，基线血流设定为 100%，当微型动脉夹夹闭双侧迅速降低，在全脑缺血 20 min 过程中，CBF 较基线下降 74.45%，血流迅速回升至基线血流的 75.60%±6.14%（图 2）。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R965

【参考文献】