吲哚菁绿联合EDTA介导光动力抗菌疗法协同抗菌药物增强对糖尿病足感染耐药细菌的体外抗菌作用

发布时间：2020-03-25 01:35

【摘要】：目的:抗菌药耐药已成为糖尿病足溃疡感染结局最重要的决定因素之一。光动力抗菌疗法(Photodynamic antimicrobial chemotherapy,PACT)已经被提出作为灭活细菌尤其耐药菌的有效替代方法。本研究旨在探讨通过光敏剂吲哚菁绿(Indocyanine green,ICG)联合乙二胺四乙酸(Ethylenediamine tetraacetate,EDTA)介导光动力抗菌疗法协同抗菌药对糖尿病足溃疡常见致病菌金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的体外协同杀菌作用及对其耐药菌生物膜破坏作用。方法:选取糖尿病足感染常见病原菌金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌标准菌株、和耐药金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和铜绿假单胞菌(Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa,MRPA)为研究对象,分别与ICG和(或)EDTA一起孵育培养,然后激光辐照处理。计数菌落形成单位(Colony forming units,CFU)以估计杀菌效果。MRSA、MRPA经ICG联合EDTA介导光动力作用后,采用纸片扩散法和微量肉汤稀释法检测MRSA和MRPA的抗菌药物敏感性。微量肉汤稀释法检测MRSA和MRPA的最低生物膜抑制浓度(Minimum biofilm inhibitory concentration,MBIC)。激光共聚焦显微镜检测PACT协同抗菌药处理后生物膜的形态结构,刃天青法检测生物膜中细菌的代谢活性。结果:与ICG介导PACT相比,ICG联合EDTA介导的PACT对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌能明显减少CFU数量,具有更加明显的杀菌作用,而且铜绿假单胞菌比金黄色葡萄球菌对ICG联合EDTA介导的PACT更加敏感。经过PACT后,MRSA和MRPA对其药敏实验药物MIC显著降低,MRSA和MRPA的MBIC分别降低到原来的四分之一。此外,PACT联合抗菌药处理能显著地杀灭生物膜细菌、破坏生物膜结构、降低生物膜细菌代谢活性。结论:光敏剂ICG联合EDTA介导PACT能够对糖尿病足感染的常见病原菌金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌产生显著的灭活作用,而革兰氏染色阴性细菌比革兰氏染色阳性细菌更敏感。ICG联合EDTA介导的PACT联合抗菌药物可以协同增强耐药菌的杀灭作用、常用抗菌药物的敏感性和生物膜结构的破坏作用。该结果有望为糖尿病足溃疡耐药菌感染患者提供一种替代治疗方法。
【图文】：

图 1.1 四株细菌的生长曲线Fig. 1.1 Growth curve of four strains of bacteria.reviations: MRSA, methicillin-resistant Staphylococcus aureus; MRPmultidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa.图 1.2 MRSA 和 MRPA 的生物膜生成Fig. 1.2 Biofilm production of MRSA and MRPA.

图 1.1 四株细菌的生长曲线Fig. 1.1 Growth curve of four strains of bacteria.iations: MRSA, methicillin-resistant Staphylococcus aureusmultidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa.
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R96

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本文编号：2599183