FA-QDs-FUA纳米靶向给药体系抗肝癌作用的研究

发布时间：2020-04-01 22:27

【摘要】：目的:FA-QDs-FUA纳米靶向给药体系的制备与表征,并研究其体内外抗肝癌作用及其作用机制。方法:1.FA-QDs-FUA纳米给药体系的制备:通过酰胺键将叶酸偶合到量子点表面,得到FA-QDs,再将经溴乙酸修饰的5-氟尿嘧啶-1-乙酸(FUA)键合到QDs上,采用单因素轮换法优化FA-QDs-FUA制备的条件,在优化的条件下成功制备了FA-QDs-FUA纳米给药体系。2.FA-QDs-FUA纳米给药体系理化性质及其体外生物相容性的表征研究:通过紫外(UV)光谱和荧光光谱表征FA-QDs-FUA的光学特性;采用红外光谱确定FA-QDs-FUA的化学结构;利用扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)表征FA-QDs-FUA的形貌特征;通过纳米粒度仪来表征FA-QDs-FUA的粒径分布;通过紫外分光光度法测定FA-QDs-FUA的载药量及其在不同p H下的药物释放性能;利用溶血实验考察FA-QDs-FUA的生物相容性。3.FA-QDs-FUA纳米给药体系的体外抗肿瘤作用及其机制的研究:选用人正常肝细胞L02、人肝癌细胞Hep G2和SMMC-7721为体外实验对象,通过MTT法表征FA-QDs-FUA的体外肿瘤增殖抑制作用;利用划痕愈合实验评价FA-QDs-FUA抑制肿瘤细胞迁移的能力;采用Transwell实验观察FA-QDs-FUA的抑制肿瘤细胞侵袭的能力。采用显微荧光成像来评价FA-QDs-FUA对三种肝细胞的体外靶向性情况。5.FA-QDs-FUA纳米给药体系体内组织分布及其抗肿瘤作用研究:通过建立SMMC-7721肝癌荷瘤裸鼠实验动物模型,并对其随机分组腹腔注射给药,记录其存活率、体重、瘤体积的变化,给药21天后,取出肿瘤组织和动物的肝、肾等主要器官,其中一部分用于组织切片HE染色然后观察其形态,评价FA-QDs-FUA对动物其他器官的毒副作用,另一部分肿瘤组织和实验动物的心、肝、脾、肺、肾等主要器官组织经过消解用于FA-QDs-FUA纳米给药体系体内组织分布的评价;同时通过连续对SD大鼠给药7天后取血,通过全自动生化检测仪测定主要脏器相关指标参数用于评价FA-QDs-FUA毒副作用。结果:筛选出的合成FA-QDs-FUA纳米给药体系最优条件是:配料比为FA:PEG-QDs:FUA=10:1:100,最适温度为37℃,反应时间为2 h。在最优合成条件下获得的FA-QDs-FUA纳米给药体系载药量为36.85%(n=3),平均粒径为220.28 nm,Zeta电位为-13.3 m V;透射电镜结果显示该纳米给药体系粒径分布均匀;红外、紫外和荧光光谱表明成功合成出FA-QDs-FUA且不改变量子点的荧光特性;动态透析法结果表明FA-QDs-FUA的具有良好的缓释效果;FA-QDs-FUA的溶血率在5%以下,说明其具有良好的生物相容性;MTT法的结果表明QDs的浓度小于40 n M是安全的,FA-QDs-FUA对肿瘤细胞具有较好的增殖抑制作用并存在时间和剂量依赖性;划痕愈合实验和Transwell实验结果表明FA-QDs-FUA具有抑制肝癌细胞SMMC-7721细胞迁移和侵袭的能力;荧光拍照结果显示FA-QDs-FUA对肝癌细胞具有良好的靶向性;体内外实验结果表明,FA-QDs-FUA在一定程度上减少了5-FU对主要脏器的毒副作用。FA-QDs-FUA在体内外均具有良好的抗肿瘤作用。结论:成功制备了肝癌靶向性的FA-QDs-FUA纳米给药体系,该体系生物相容性好、安全、缓释并且具有良好的体内外抗肿瘤效果。
【图文】：

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FA-QDs-FUA纳米给药体系的制备与其靶向肝癌示意图

给药体系,纳米

A-QDs-FUA 纳米给药体系的红外外吸收光谱UA 和 FA-QDs-FUA 的红外吸收光谱如图 2.2 所示。从图中4 cm-1(-COOH 伸缩振动) 和 1603 cm-1(-NH2弯曲振动)。F图 2.1 FA-QDs-FUA 纳米给药体系的紫外吸收光谱图
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R96

【参考文献】