载氧脂质微泡的制备及体外实验研究

发布时间：2020-05-11 23:15

【摘要】：目的：调整载氧脂质微泡(LOM)气体核内O2与C3F8的体积比，构建一种较稳定、高效的LOM，并评价其理化性质。方法：以DSPC+DPPE-MPEG5000脂质体为外壳材料，采用机械振荡法制备六种不同体积比气体核的LOM，即O2与C3F8的体积比为0:1、1:0、1:1、3:1、5:1、10:1。光镜下观察各组微泡不同时间（3h、1d、3d、7d）微泡的形态，计数板计数各组微泡不同时间（3h、1d、3d、7d）的浓度，Malvern激光测量仪检测各组微泡不同时间（1d、3d、7d）粒径大小，溶解氧测定仪测定各组微泡在制备后0.5h、3.0h、1d在极度缺氧溶液中溶液溶解氧浓度（DO）的变化。选择较优的O2与C3F8体积比，并观察该体积比微泡的Zeta电位，7天内PH值的变化，以及60Co辐照后，微泡的形态、大小、浓度、Zeta电位及释氧能力的改变。MTT法检测较优LOM对缺氧胎鼠海马神经元有无细胞毒性作用，分为四组:①缺氧+LOM组、②缺氧对照组、③triton-x100组、④未缺氧正常组。结果：机械振荡法制备的各种LOM中，以LOM5:1最优，其制备后微泡形态好，大小分布均匀，微泡浓度约为（4.01±0.69）×109/mL，平均粒径约为（959.7±161.2）nm，Zeta电位为－（12.9±2.4）。7d观察时间内，上述物理性质无显著变化（p0.05）。LOM5:1在极度缺氧（DO=0.4mg/l）溶液中能高效释放氧气，使溶液DO值增加约12倍，载氧能力最强，且在1d内其释氧时间-强度曲线无明显变化。60Co辐照LOM5:1后，微泡形态大小、浓度、Zeta电位及释氧能力无明显变化（p0.05）。MTT结果显示：50μl LOM5:1对细胞无毒性。①和④组比较，其MTT吸光值差异无统计学意义（p0.05）；而和②、③组比较，差异具有统计学意义（p0.05）。结论：以DSPC+DPPE-MPEG5000为外壳材料，气体核内O2与C3F8体积比为5:1构建的LOM5:1，，微泡形态好，浓度高，粒径小且分布范围较窄，7天内物理性质无明显变化,1天内微泡能稳定载氧。同时，LOM5:1对缺氧的胎鼠大脑海马神经元无细胞毒性作用。目的：评价LOM5:1在中度缺氧溶液及离体人静脉血中的释氧能力；探讨超声辐照对LOM5:1释氧量的增强效果；观察LOM5:1增强兔肝显影的效果。方法：机械振荡法制备LOM5:1，溶氧仪检测LOM5:1对中度缺氧(DO=4.0mg/L)溶液DO值的影响；在有超声辐照的条件下，检测中度缺氧溶液DO值的改变，对比有无超声辐照LOM5:1释氧量的改变。LOM5:1与离体人静脉血混合后，检测静脉血Po2值的变化，并通过物理推算LOM5:1中的含氧量。评价微泡增强兔肝超声显影的效果。结果：LOM5:1使中度缺氧溶液DO值增加约0.5倍；超声辐照条件下，能显著增加微泡的释氧量，使中度缺氧溶液DO值增加约1倍；LOM5:1能使离体人静脉血Po2增加约4倍，显著升高离体人静脉血Po2（p0.05）。载氧脂质微泡可明显增强兔肝实质超声显影,且持续增强约30min。结论：LOM5:1在中度缺氧环境中较在极度缺氧环境中释放氧气量少；超声辐照下，该微泡在中度缺氧环境中的释氧量明显增加；能显著增加离体人静脉血Po2。LOM5:1有望成为一种安全、有效的静脉携氧剂。
【图文】：

微泡,时间点,浓度

16图 1-3 各组微泡各时间点光镜观察（×400）Fig.1-3 Microscope images of different LOMs at different time(×400)2 各组 LOM 浓度随时间的变化①LOM 0:1：制备后 3 h，微泡浓度为（2.720±0.647）×109/ml；制备后 1 d，泡浓度为（2.637±0.657）×109/ml；制备后 3 d，微泡浓度为（2.734±0.743）109/ml；制备后 7 d，微泡浓度为（2.629±0.623）×109/ml； ② LOM 1:0：制后 3 h，微泡浓度为（0.446±0.104）×109/ml；制备后 1 d，微泡浓度为（0.041

PH值,微泡,溶液,悬液

LOM 5:1 微泡在制备后0.5 h、1 d、3 d及7 d，其悬液PH值分别为7.120±0.078、7.073±0.031、7.070±0.075及7.010±0.026，表明该组微泡在7天内溶液PH值无明显变化（P>0.05）（图1-7）。LOM 5:1 微泡溶液Zeta电位为－（12.9±2.4）
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R943

【参考文献】