pH-响应性聚乙二醇和四苯基乙烯双重修饰的聚乙烯亚胺作为基因载体的构建及性能研究

发布时间：2020-05-13 18:49

【摘要】：近些年,阳离子基因载体由于无免疫原性、水溶性好及DNA保护能力强等诸多优点备受科研工作者的青睐。尤其,树枝状的聚乙烯亚胺(PEI)凭借较高的表面胺基密度,具有良好的细胞摄取和溶酶体逃逸能力,因此转染活性高,被视为基因载体的“黄金标准”。然而过高的电荷密度会导致复合体稳定性降低、蛋白吸附严重和生物相容性差等缺陷,有待于进一步优化。本研究中,我们通过pH响应性的席夫碱连接键在PEI表面覆盖了一层PEG外壳,然后将疏水的、聚集诱导发光的四苯基乙烯(TPE)通过静电作用融合进阳离子高分子中,得到集pH响应性PEG脱离和功能分子TPE修饰于一体的新型基因载体。我们用核磁谱图及傅里叶红外光谱确定了高分子和TPE的结构,用荧光光谱证明了PEI-PEG/TPE复合体的成功制备。然后,通过静电作用将PEI-PEG/TPE与pDNA复合,并对复合体在基因递送方面的性能进行了研究。凝胶电泳实验和抗蛋白吸附实验证明,PEG外壳和TPE的双重修饰在很大程度上提高了复合体的稳定性和抗蛋白吸附能力。另外,PEG外壳在酸性环境下选择性脱离的设计有效促进了细胞内化、溶酶体逃逸和pDNA的释放。值得注意的是,疏水分子TPE会进一步加剧溶酶体膜的不稳定性,提高溶酶体逃逸能力。最后,体内外的转染和毒性实验表明,该复合体具有较高的转染效率和较低的毒性。
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第一章 绪论实践方面也取得了一些成就，但至今仍没有哪一种方法可以的转移同时又能够将毒副作用最小化[29, 30]。所以，我们当前法来抑制恶性肿瘤的生长和转移。性肿瘤发生的根本机制在于基因突变，即在某些因素的刺激了机体对其正常的调控作用而异常增殖形成肿瘤，同时肿瘤发生新的基因突变导致其对化学药物及某些疗法失去敏感性，就必须从其发病机理出发，也就是必须在基因水平上对肿

第一章 绪论基因递送领域的一大缺陷[84]。有研究证实，CaP 的衍生物——羟基磷灰石（核酸复合以用作转染试剂（图 1-4），而且在小鼠及人的 MSCs 细胞中，，n现出了比商业 CaP 转染试剂盒更高的转染活性[87]。进一步，通过对 nHA 粒的修饰也可将 miRNA-mimic 和 antagomiR 传递到人的 MSCs 细胞中，而且就可达到高于 90%的基因沉默效率，甚至比病毒或脂质体的效率还要高[87]
【学位授予单位】：天津理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R943;O632.63

【参考文献】

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1 钱立军;佟斌;支俊格;杨帆;申进波;石建兵;董宇平;;含磷酰杂菲苯甲酸对苯二酯的聚集诱导发光增强性能及其在检测过渡金属离子中的应用[J];化学学报;2008年09期

2 钱妍;解令海;王双清;杨国强;;聚集诱导的荧光增强体系研究进展[J];南京邮电大学学报(自然科学版);2008年01期

本文编号：2662386