甘草次酸与腙键共同修饰聚合物胶束的构建与靶向药物动力学评价

发布时间：2020-05-19 08:00

【摘要】：目的肝癌是最常见的恶性肿瘤之一。化疗药物在抗肝癌进程中发挥了重要作用。靶向性差,毒副反应严重是它们面临的主要问题。肝脏和肝癌细胞表面存在大量甘草次酸的特异性结合位点并且肝癌细胞内液具有微酸性环境。本文合成mPEG-HZ-PLA和GA-PEG-PLA两种嵌段共聚物,构建甘草次酸与腙键共同修饰的的聚合物胶束(GA-PEG-HZ-PLA),并通过靶向药物动力学研究对聚合物胶束的靶向性进行评价。期望发挥聚合物胶束的主动与pH敏感双重靶向作用。方法PEG经叠氮化与还原反应生成双氨基聚乙二醇(H_2N-PEG-NH_2),再与GA和PLA反应,生成具有GA靶向的嵌段共聚物(GA-PEG-PLA)。聚乙二醇单甲醚(mPEG)通过一系列反应生成末端连接腙键的大分子引发剂mPEG-HZ-OH,引发D,L-丙交酯开环聚合,制备具有pH敏感性嵌段共聚物(mPEG-HZ-PLA)。用红外光谱、核磁共振氢谱以及凝胶渗透色谱确定两种嵌段共聚物的结构和分子量。以香豆素6(Cou6)为荧光探针,采用薄膜分散-超声法制备聚合物胶束,动态激光散射法、透射电镜扫描法、微柱离心法分别测定粒径、形态、包封率和载药量,动态透析法测定聚合物胶束在系列pH值释放介质中的释放性能。构建荷H22小鼠为动物模型,经尾静脉注射给药,眼球取血,处死,取出心脏、肝脏与肿瘤组织。以Cou30为内标,采用高效液相色谱-荧光检测法测定小鼠血液、心脏、肝脏和肿瘤中Cou6的浓度,拟合药物动力学方程,计算靶向参数,评价聚合物胶束的靶向效率。结果三种聚合物胶束的粒径在100 nm左右且分布均匀,包封率均大于85%,载药量为4.33~4.76μg/mg。含有腙键的胶束,在pH5.0的释放介质中,释放速率较快。靶向药物动力学实验表明,与Cou6溶液相比,聚合物胶束在血液中有较高的平均滞留时间、药时曲线下面积和较低的血浆清除率。GA-PEG-HZ-PLA在肿瘤和肝脏组织中的Cou6的含量明显较高,肿瘤中的Cou6的含量高于肝脏中的含量。在肿瘤组织中,GA-PEG-HZ-PLA的相对摄取效率为3.24、靶向效率为4.04、相对靶向效率为3.00和相对浓度比为2.47。结论成功合成甘草次酸修饰的嵌段共聚物(GA-PEG-PLA)和腙键修饰的嵌段共聚物(mPEG-HZ-PLA)并构建甘草次酸和腙键修饰的聚合物胶束。聚合物胶束延长体内平均滞留时间。GA-PEG-HZ-PLA在pH5.0的介质中断裂,释放药物并有效地积累在肝脏和肿瘤组织。因此,甘草次酸和腙键共同修饰的聚合物胶束(GA-PEG-HZ-PLA)具有明显的靶向作用,可为肝癌的靶向治疗提供可借鉴的新思路。
【图文】：

路线图,路线,溶于,溴代乙酸乙酯

图 2-1 GA-PEG-PLA 的合成路线EG-HZ-PLA 嵌段共聚物的合成步反应制得 mPEG-HZ-PLA，，合成路线见图 2-2。PEG-NH-NH2 叔丁醇钾溶于 15 mL 叔丁醇后，加入含有 4 g mPEG2000保护下，50 ℃反应 20 min，将 2.2 mL 溴代乙酸乙酯溶于上述溶液，50 ℃反应 48 h，过滤，滤液旋蒸除去部分溶干燥，即得到 mPEG-COOCH3。将 3.6 gmPEG-COOCH3溶 23 mL 水合肼（80％），60 ℃回流反应 24 h，反应结束机溶剂，冰乙醚沉淀，干燥，得到黄色固体，产率 64.8H2。PEG-HZ-OHPEG-NH-NH2与 1 g 对羟基苯甲醛溶于 30 mL 四氢呋喃，

路线图,路线,聚合物,分子量

图 2-2 mPEG-HZ-PLA 的合成路线）产物的表征FTIR 表征叶红外光谱仪对已合成的两种聚合物进行红外表征。将样末按 1:100 的质量比混合，研磨压片，进行红外光谱检测辨率 2cm-1。H-NMR 表征共振波谱仪对两种聚合物进行结构表征。取少量共聚物粉振频率为 300 HZ 进样分析。GPC 表征渗透色谱仪测定已合成的两种聚合物的分子量及分子量分
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R943;O643.12

【参考文献】