一种新型长循环靶向紫杉醇脂质体的制备、表征、药代动力学及急性毒性研究

发布时间：2020-05-20 10:24

【摘要】：目的:本论文旨在根据腺癌细胞表面过表达的雌激素受体的特点,设计并制备一种新型的长循环靶向紫杉醇脂质体制剂,将药物特异性的靶向于乳腺癌细胞,延长药物半衰期、提高药物的生物利用度,减少药物的毒副作用。并对改长循环靶向紫杉醇脂质体制剂的表征、药代动力学、急性毒性等进行研究。方法:(1)利用薄膜水化法制备紫杉醇普通脂质体(L-PTX)、紫杉醇长效靶向脂质体(ES-SSL-PTX)制剂,建立了紫杉醇的HPLC含量测定方法,对脂质体制剂的表征进行研究,利用马尔文Nano-ZS90型粒径分析仪脂质体平均粒径和Zeta电位,采用低速离心法分离脂质体制剂中游离的紫杉醇,以此测定脂质体包封率及载药量。(2)建立了紫杉醇小鼠生物样品HPLC分析方法。以ICR小鼠为动物模型,进行了药代动力学实验,检测了紫杉醇注射液、紫杉醇普通脂质体、紫杉醇长循环靶向脂质体不同时间的血药浓度及在心肝脾肺肾等主要脏器的浓度,统计分析t_(1/2)、AUC、MRT等药代动力学参数,并分析了48小时内三种紫杉醇制剂在小鼠体内组织分布情况。(3)以ICR小鼠为模型,进行了紫杉醇注射液、紫杉醇普通脂质体、紫杉醇长循环靶向脂质体三种制剂小鼠急性毒性实验。考察了三种药物对ICR小鼠的半数致死剂量LD_(50)及最大耐受剂量MTD,记录小鼠给药后症状、体重变化情况、主要血液学参数以及不同性别小鼠给药后的差异,综合评价不同紫杉醇制剂的安全性。结果:(1)本研究采用薄膜水化法,成功制备了一种含有雌酮靶向片段ES-PEG2000-DSPE及长效片段DSPE-mPEG2000具有雌激素受体靶向性的紫杉醇长效脂质体制剂,该制备方法简单易行,所制得脂质体粒径在120-140nm范围内,均一稳定,带有一定的负电荷,包封率为86%左右,载药量在6.0%-7.4%之间,包封率与载药量较高,4℃条件下储存48小时释放率小于10%,有临床应用的潜力。(2)药代动力学实验显示,PTX、L-PTX及ES-SSL-PTX组消除半衰期分别为1.79、2.26、20.98小时。紫杉醇长效靶向脂质体的消除半衰期分别是游离紫杉醇和紫杉醇普通脂质体的11.1倍和9.3倍,消除半衰期显著延长。紫杉醇长效靶向脂质体的AUC_(0-∞)为107.69mg/L*h,分别是游离紫杉醇和紫杉醇普通脂质体的5.2倍和3.8倍,表明长效靶向脂质体组生物利用度显著提高。此外,紫杉醇长效靶向脂质体清除速率CL显著降低,平均驻留时间MRT显著延长。(3)杉醇长效靶向脂质体对ICR小鼠的LD_(50)值为166.39mg/kg,是紫杉醇注射液的4.6倍,与紫杉醇普通脂质体相比也有显著增高;ICR小鼠对紫杉醇的最大耐受计量,紫杉醇注射液是20mg/kg,而紫杉醇普通脂质体及长循环靶向脂质体提高至80mg/kg,这说明长循环靶向脂质体制剂能够有效降低紫杉醇注射液的毒副作用。结论:根据乳腺癌细胞高度表达雌激素受体这一特性,本实验以雌激素受体为靶点,成功制备一种长循环靶向紫杉醇脂质体制剂(ES-SSL-PTX)。建立了紫杉醇生物样品的HPLC检测方法,并对该制剂进行药代动力学实验和急性毒性实验。结果表明,相对于紫杉醇注射液和普通脂质体制剂,ES-SSL-PTX能够显著延长药物半衰期,增加其体内循环时间,提高生物利用度,降低其毒副作用。ES-SSL-PTX能够显著改善紫杉醇的药代动力学性能,避免原溶媒的过敏反应并减小药物毒副作用,有应用于临床的潜力。
【图文】：

曲线,长扫描,紫杉醇,全波

W/WL×100％计算。ES-SSL-PTX 制剂分别于 4 ℃和室温下保存，，分出 50μL 脂质体，加入 350μL PBS，1000rpm 离法测定上清中 PTX 浓度，记为 Cn（n 为不同时渗漏率=（1-Cn/C0）×100%。标，渗漏率为纵坐标，绘制稳定性曲线。论PLC 检测方法，PTX 的最大紫外吸收波长为 λ=227nm，与药作为 HPLC 检测波长。

专属性,溶液,紫杉醇,对称因子

第 2 章脂质体制备及表征2.3.1.2 专属性考察结果如图 2.2 所示，在 2.2.1.2 色谱条件下，紫杉醇保留时间为 4.6 min，磷脂等物质的峰在 2min，对紫杉醇检测无干扰，紫杉醇峰形较好，与杂质峰分离度好（R>1.5），理论塔板数、对称因子等均符合高效液相色谱检测要求。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R943;R96

【参考文献】