来氟米特在中国健康人群中的群体药代动力学研究

发布时间：2020-05-22 19:00

【摘要】：目的:建立来氟米特(Leflunomide)口服给药在中国健康受试者体内的群体药代动力学模型,探讨其群体药代动力学特征及可能的影响因素,为来氟米特临床个体化给药提供相应的参考信息。方法:1)建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测中国健康受试者血浆中来氟米特活性代谢产物-特立氟胺(Teriflunomide)的定量分析方法,并对其特异性、准确度、精密度、稳定性以及提取回收率等进行验证。2)筛选符合入排标准的健康受试者,经知情同意后,参考人体生物利用度研究技术指导原则采集静脉血;收集人口学信息(年龄Age、身高High、体重Weight、体重指数BMI等)和血生化指标(总胆红素TBIL、谷丙转氨酶ALT、谷草转氨酶AST、谷氨酰转肽酶GGT、碱性磷酸酶ALP、血尿素氮BUN、血清肌酐Cr等);测定样本中来氟米特活性代谢产物-特立氟胺的血药浓度。3)将所测得的特立氟胺血药浓度数据,结合对应的人口学信息和血生化指标等协变量,应用Phoenix NLME(Vision8.0)软件中的群体药代动力学模块,估算来氟米特口服给药后相关药代动力学参数及其变异情况,非参数自助取样法(Bootstrap)和可视化预测检验法(VPC)对最终模型进行验证,确保模型稳定、可靠。结果:1)本研究建立了HPLC-MS/MS检测中国健康受试者血浆中来氟米特活性代谢产物-特立氟胺浓度的定量分析方法,其特异性、准确度、精密度、稳定性以及提取回收率均符合要求。2)21名男性健康受试者完成本次研究,Age 22.59±2.04;High 1.72±0.05m;Weight 64.43±6.49kg;BMI 21.72±1.64。3)来氟米特活性代谢产物-特立氟胺在健康受试者体内符合一级吸收的一室模型,吸收速率常数k_a、分布容积V、药物清除率CL的群体典型值分别为0.691h~(-1)、12.843L和0.031L·h~(-1)。群体药代动力学模型中,特立氟胺的个体、群体预测值与实测值相关性良好,模型预测浓度、采样时间与条件权重残差之间无明显偏倚,多数浓度的预测差在2倍标准偏差之内,模型预测效果良好。协变量筛选结果显示,BMI对分布容积V有显著影响(P0.01)。结论:1)本研究中建立的HPLC-MS/MS检测中国健康受试者血浆中来氟米特活性代谢产物-特立氟胺浓度的定量分析方法特异性、准确度、精密度、稳定性以及提取回收率均符合要求,测定结果准确、稳定、可靠。2)本研究成功的构建了来氟米特在中国健康人群体内的群体药代动力学模型,模型诊断结果良好,最终模型可对个体药代参数做出精确的估计。协变量考察结果显示,BMI对分布容积V有显著影响,表明BMI可能影响了来氟米特在中国健康人群的药代动力学特性。
【图文】：

扫描图,扫描图,质谱,参数群

以其中位数作为点估计，以各参数群体典型值的 2.5%和 97.5%作为其95%置信区间[36]。通过将计算得到的各参数群体典型值均值和标准差与最终模型的估算值比较，以此判断来氟米特最终模型的稳定性和有效性。3 结果3.1 定量分析结果3.1.1 质谱扫描图和色谱图分别配置特立氟胺和内标依非韦伦的标准品溶液，采用 HPLC-MS/MS 分别扫描两种标准品。特立氟胺母离子[M-H]- m/z268.9、碎片子离子 m/z 82.0，依非韦伦母离子[M-H]- m/z314.0、碎片子离子 m/z244.0，见图 2-1。特立氟胺和内标依非韦伦标准品的 MRM 质量色谱图，见图 2-2。

标准曲线,质量色谱图,内标,标准品

图 2-2 特立氟胺和内标依非韦伦标准品的 MRM 质量色谱图Fig 2-2 The MRM mass chromatogram of terflunomide and efavirenz注：A 特立氟胺标准品的 MRM 质量色谱图； B 依非韦伦空标准品的 MRM 质量色谱图3.1.2 分析方法特异性根据特立氟胺标准曲线制备方法或质控样品制备方法，将 6 个不同来源的空白人血浆样本进行处理分析，通过将人空白血浆样本中干扰物质的峰面积与最低定量限（LLOQ）样品中特立氟胺和内标依非韦伦的峰面积进行比较，判断该方法的特异性。图 3A、3B 为典型的人空白血浆样品 MRM 质量色谱图，从图中可见，特立氟胺和内标依非韦伦在人空白血浆中无内源性干扰，所以本实验条件对特立氟胺的分离和测定无内源性干扰。图 3C、3D 为 LLQC 样品中特立氟胺和内标依非韦伦的 MRM 质量色谱图，，其色谱峰分离良好，目标药物峰不受杂峰的影响，
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R969.1

【参考文献】