T7肽修饰的低密度脂蛋白输送长春新碱治疗脑胶质瘤的研究

发布时间：2020-05-30 18:20

【摘要】：目的:构建粒径约30 nm的长春新碱低密度脂蛋白纳米给药系统,并将靶向功能基T7肽共价连接于LDL表面,而T7肽和LDL分别靶向于BBB中的TfR和LDLR,使纳米递送系统能穿透BBB后进一步靶向于脑胶质瘤细胞。方法:利用密度梯度离心法从人血浆中提取分离得到LDL,采用干膜法制备载VCR的LDL纳米粒(LDL-VCR),然后将T7肽修饰于LDL上得到T7-LDL-VCR,并对其进行表征和稳定性的研究。然后用亲酯性荧光探针DiI标记T7-VCR-LDL纳米粒,用激光共聚焦显微镜观察胶质瘤细胞及其肿瘤球模型对DiI-T7-LDL-VCR和DiI-LDL-VCR的摄取和体外跨越BBB情况,并采用MTT法评价制剂对C6细胞的毒性作用。再采用脑胶质瘤细胞C6建立了KM小鼠原位脑胶质瘤模型,选择DiR作为荧光探针,借助活体成像技术在体实时观察了游离VCR溶液、LDL-VCR纳米粒和T7-LDL-VCR纳米粒的体内分布情况。8 h后处死小鼠,取出脑及主要脏器进行离体成像实验。最后以荷胶质瘤模型的小鼠为研究对象,通过体重变化、MRI、脑胶质瘤体积抑制率和生存曲线考察LDL-VCR纳米粒对荷瘤小鼠的治疗效果。结果:对处方进行优化,得到包封率为15.6±0.94%,载药量为4.03±0.61%;T7共价连接于LDL表面的效率为63.88%;纳米粒粒径约30 nm,形态圆整;并且药物在低密度脂蛋白中的释放有延缓作用。体外评价结果表明DiI-T7-LDL-VCR的摄取强度均高于DiI-LDL-VCR,T7-LDL-VCR可以在一定程度上促进药物跨越体外BBB,并呈时间依赖性,MTT实验中得到空白LDL、游离VCR、LDL-VCR和T7-LDL-VCR的IC_(50)分别为0.15μM、0.048μM、0.0075μM和0.95 nM,说明T7-VCR-LDL抗肿瘤细胞增殖作用最强。T7-LDL-VCR纳米粒的脑部蓄积能力更强,对荷瘤小鼠体重下降幅度最小,肿瘤体积最小,肿瘤体积抑制率为70%,是VCR-LDL的1.69倍、游离VCR的2.83倍;中位生存期为36天,高于VCR-LDL 1.38倍、游离VCR 1.85倍和对照组2倍。结论:本课题成功构建了脑靶向给药系统T7-LDL-VCR,具有BBB和脑肿瘤细胞双级靶向能力,为胶质瘤靶向治疗研究领域提供了新思路。
【图文】：

前学者更倾向于选择的策略。蛋白主要分为以下三种：基于实体瘤的高渗识别的主动靶向及基于外界或脑胶质瘤一种研究较少。主动靶向系统又分为二靶向给药系统。研究表明，，TfR 和 LD载体如己糖转运系统和氨基酸转运系统内源性物质具有良好的生物相容性[7-10 通过肝脏多次变换和转运产生，正常情，结构构成如图 1 所示：疏水内核由较脂层和胆固醇覆盖，最外层被体积较大胞内溶酶体，并且可以将靶向分子共价。

图 2 长春新碱分子结构式射后，在血中与红细胞、白细胞和血浆均至各组织，不能通过血脑、脊液屏障进入中便排泄，约 12%由尿中排出，其中又有 21小（成人注射 1-2 mg/周），但是神经毒性目前减少长春新碱神经毒性的主要方法就力学参数，提高其生物利用度及靶向效率思路
【学位授予单位】：湖北科技学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R96

【参考文献】

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1 朱世t

本文编号：2688531