【摘要】：众所周知,药物在血浆中不同程度地与血浆蛋白结合,其结合程度能够影响药物的体内过程(ADME),即机体对药物的处置过程,进而影响药物的药效学行为。因此,药物蛋白结合率(PPB)可以作为治疗药物监测(TDM)及ADME评估的重要参数。然而,PPB监测在临床实践中并未得到重视,其原因主要是表征PPB的方法仍存在问题,进而限制PPB在临床TDM中的应用及临床意义的探究。因此,血浆PPB分析方法的建立及其在非健康条件下的影响因素及临床意义的探讨成为临床药师面临的一个难题。目前分析PPB的方法通常需要两份血浆样品在两个体系中分别采用两种前处理方法测得游离药物浓度(C_f)和总浓度(C_t),这就意味着其PPB结果的准确性主要取决于C_f和C_t的分析方法准确性。HFCF-UF法作为直接进样技术,已成功用于临床C_f的分析,其结果的准确度及精密度高,可直接代入公式求算PPB。因而,C_t方法的准确性成为PPB结果是否可靠的关键。文献报道C_t的前处理方法多为蛋白沉淀法(PPT)、液液萃取法(LLE)及固相萃取法(SPE)。每种方法皆有各自的优缺点。总体而言,C_t的整个分析过程,繁琐、耗时,多步操作易导致最终结果误差增大,难以保证C_t及PPB结果的准确性;加之分析C_f和C_t时,因两份血浆受采集时间及存储条件不同等因素影响,使得最终PPB测定结果造成偏差,难以在临床实践中对患者实施治疗药物的PPB监测。为此,本研究利用HFCF-UF技术成功改造了传统C_t分析方法,建立一种简单、准确且只需一份血浆样品即可同时分析C_f、C_t及PPB的样品前处理方法,为临床医师依据PPB及C_f来进行剂量调整提供可靠的分析平台。通常在健康生理状态下,药物的PPB在药-时曲线所对应的整个时间段内保持恒定,此时,C_f与C_t呈良好的相关性,C_t在一定水平上可反映C_f。然而,在非健康状态下,如肝肾功能不全、低蛋白血症等情况,PPB可以发生改变,进而直接影响C_f,使得药物疗效产生个体差异。在这种情况下,机体中药物的PPB结合C_f才能反映药物ADME,为个体化治疗提供参考依据。第一部分中空纤维离心超滤法简单快速分析卡马西平蛋白结合率及其在治疗药物监测中的意义目的:研究建立用同一份血浆样品简单、快速、准确分析卡马西平(CBZ)的C_f、C_t及PPB的样品前处理方法,初步探索PPB及C_f在临床TDM中的意义。方法:利用HFCF-UF技术准确测定C_f的基础上,对传统C_t分析方法进行改造,并对其中加入的释放剂种类及加入量进行优化,以保证结合药物完全从蛋白结合位点上脱离下来,从而在同一份血浆样品中准确分析得到药物C_f、C_t及PPB。将所建立的方法应用到20名接受CBZ治疗的患者中,并对测定结果进行统计学分析。C_f及C_t的分析方法采用HPLC法。结果:C_f和C_t在0.535-21.4μg/mL的浓度范围内线性关系良好(R~20.999),日内、日间精密度CV%及准确度%bias均小于±3.0%。丙酮作为释放剂且体积为200μL时,C_t的绝对回收率为100.2-100.8%(CV%2.0%)。临床初步探索表明,进行CBZ治疗的20名临床患者的PPB平均值为46.3%(10.1%-68.9%),其与健康志愿者的PPB均值(76%)之间存在明显差异;20名患者的C_f和C_t之间的相关性较差(R~2=0.470)。结论:该样品前处理方法简单、快速,成功地在同一份血浆中分析CBZ的C_f及C_t,其结果的准确度及精密度高,从而提高了PPB结果的准确性,为今后临床医师利用C_f和PPB进行剂量调整提供可靠的分析手段。在非健康条件下患者的PPB有较大的变异,因此临床实践中应当对PPB进行监测,以保证患者用药的合理性。第二部分多索茶碱蛋白结合率测定方法研究及其在非健康条件下的影响因素及临床意义初探目的:研究建立准确的多索茶碱(DFL)蛋白结合率测定方法,并初步探讨DFL的PPB与患者生理病理条件的关系,为个体化给药方案的制定提供理论依据。方法:采用HFCF-UF样品前处理技术结合HPLC法在同一血浆中准确分析DFL的C_f及C_t,并通过公式计算求得PPB。将该方法应用到接受DFL治疗的48名患者的PPB测定中,并对PPB结果与患者的性别、年龄、生化指标、疾病状态进行相关性分析。结果:该方法的日内、日间精密度CV%及准确度%bias均小于±4.5%,C_t绝对回收率为99.4-100.3%(CV%2.3%);48名患者的PPB平均值为39.6%(3.02%-93.2%),其与健康志愿者的PPB均值(48%)之间存在明显差异;相关性分析结果表明,患者的白蛋白水平、总胆红素、直接胆红素、尿素和肌酐与PPB的相关性良好(P0.05)。结论:该方法成功地在同一份血浆中同时分析DFL的C_f、C_t及PPB,为进一步研究非健康状态下PPB的影响因素提供了可靠的分析平台。临床初步探索表明,接受DFL治疗的48名患者的PPB存在个体间及个体内差异,因此临床上应对PPB进行监测以指导医师优化用药剂量。同时PPB易受白蛋白、肝肾功能状况的影响,因而在制定个体化的给药方案时,临床医师应充分考虑患者的白蛋白水平及肝肾功能状况。
【图文】：
图 1 Cf分析的样品前处理过程Fig. 1 The experimental procedure for the analysis of free CBZ by HFCF-UF
图 1 Cf分析的样品前处理过程Fig. 1 The experimental procedure for the analysis of free CBZ by HFCF-UF
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R969
【参考文献】
相关期刊论文 前10条
1 张娟红;王荣;谢华;徐丽婷;孙爱军;李文斌;贾正平;;高原环境对大鼠体内呋塞米和醋甲唑胺血浆蛋白结合率的影响[J];中国医院药学杂志;2015年20期
2 戴博;张华峰;宋青;;高效液相色谱与串联质谱法测定游离丙戊酸钠与人血浆蛋白的结合率[J];中国药事;2015年03期
3 郑荔莉;方剑英;翁爱彬;;HPLC测卡马西平的血清药物浓度[J];海峡药学;2015年03期
4 张娟红;王荣;谢华;尹强;贾正平;李文斌;;平原与急进高原后(4100m)氨茶碱在大鼠体内药动学比较[J];中国医院药学杂志;2015年02期
5 王金明;王石健;张晓芬;杨赛成;王彬辉;;HPLC测定人血清中多索茶碱的浓度[J];中国现代应用药学;2014年08期
6 张娟红;王荣;谢华;贾正平;李文斌;鹿辉;王昌;孙玉环;王延玲;张晓惠;郝颖;;高原环境对阿莫西林药代参数的影响研究[J];解放军药学学报;2014年02期
7 牛晓霞;丁保清;;左氧氟沙星联用多索茶碱致精神错乱的病例分析[J];中国现代药物应用;2013年18期
8 尚利娜;王存良;洪明岳;顾袁琴;;癫痫患者卡马西平血药浓度的监测及合理用药研究[J];安徽医学;2012年11期
9 贾昊迪;王建明;刘宪英;房琳琳;秦芳;颜羽;黄芸;;绿原酸与牛血清白蛋白的相互作用及酒精对其的影响[J];时珍国医国药;2011年06期
10 葛卫红;于锋;阳丽梅;;基因多态性与华法林剂量需求关系的研究进展[J];中国临床药理学杂志;2010年03期
相关硕士学位论文 前6条
1 陈茂林;伏立康唑血药浓度和蛋白结合率测定方法及影响其体内分布主要因素[D];第三军医大学;2017年
2 杜朝辉;血浆中游离药物浓度相关参数分析及其在治疗药物监测中的应用[D];河北医科大学;2016年
3 张金凤;血浆中游离药物浓度分析方法及其与药物药效学关系的研究[D];河北医科大学;2015年
4 董维冲;血浆中游离药物分析方法的理论研究与临床应用[D];河北医科大学;2014年
5 侯自立;中空纤维离心超滤法在药代动力学研究中的应用[D];河北医科大学;2012年
6 张文颖;多索茶碱与阿魏酸药物相互作用研究[D];沈阳药科大学;2009年
，
本文编号：
2699710
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/2699710.html
