新型芳杂环连三氮唑类衍生物的抗肿瘤活性及机制的研究

发布时间：2020-06-11 16:30

【摘要】：本课题组经过前期查阅大量文献,开始设计路线并利用拼合原理合成出了一类新型芳杂环连三氮唑类衍生物。本论文通过MTT方法对该类衍生物做了活性筛选,发现序号为H27的化合物具有较好的抗肿瘤活性,为了进一步探索其生物机制,其抗肿瘤作用需要通过一系列实验进行深入研究和评价。具体研究结果如下:1、通过MTT方法,分别用MGC803、PC3、EC109三株癌细胞筛选该系列衍生物的抗增殖活性,氟尿嘧啶作为阳性对照药物,结果显示化合物H27抗增殖活性最好。2、化合物H27对胃癌MGC803细胞的抗增殖效果非常明显,其IC_(50)为7.59±0.28μM,而对人正常胃上皮细胞GES1毒性较小(IC_(50)为31.71±1.24μΜ)。3、通过细胞生长曲线和克隆形成实验,发现化合物H27可以减缓胃癌MGC803细胞的生长速度,阻碍MGC803细胞的增殖,具有浓度-时间依赖性。4、将化合物H27以不同的浓度作用于胃癌MGC803细胞48小时,通过细胞周期试剂盒测定,结果表明化合物H27可以将MGC803细胞阻滞在G2/M期,从而阻滞癌细胞的过度增殖。Western Blotting实验结果显示:化合物H27能够通过调节CyclinB1、CDK1、p21蛋白的表达将细胞阻滞在G2/M期。5、将化合物H27作用于MGC803细胞一段时间后,通过细胞的形态学观察,我们发现细胞呈现出了凋亡的特征。6、将化合物H27以不同浓度作用于MGC803细胞48小时,然后通过FITC-Annexin V/PI试剂盒处理细胞,FCM结果显示:随着化合物H27浓度的增大,该细胞的凋亡百分比显著增加。7、将化合物H27以不同浓度作用于MGC803细胞48小时,然后通过JC-1试剂盒处理细胞,FCM结果显示:随着化合物H27浓度的增大,MMP(Ψm)显著降低。Western Blotting实验结果显示:化合物H27可以调控Bcl-2家族蛋白的表达以及激活Caspase-9、Caspase-3,对PARP进行切割,诱导细胞凋亡。8、将化合物H27以不同的浓度作用于MGC803细胞48小时,Western Blotting实验结果显示:化合物H27还可以通过外源性途径激活DR4,再进一步激活Caspase-8促使细胞产生凋亡。9、划痕实验和Transwell实验结果显示:化合物H27可以显著降低MGC803细胞的侵袭和转移能力。Western Blotting结果显示:化合物H27可以通过降低MMP-9和Vementin蛋白的表达抑制细胞侵袭和转移的能力。综上所述,本论文有效证明了新型芳杂环连三氮唑类衍生物H27对胃癌细胞具有较好的选择性,特别是MGC803细胞,研究结果显示化合物H27低浓度可以有效抑制MGC803的增殖、侵袭和转移,高浓度导致细胞凋亡,为发掘抗癌药物供应了重要的候选化合物。
【图文】：

目标化合物结构图

目标化合物结构图
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R96

【参考文献】

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本文编号：2708161