沃替西汀晶型药物的药代动力学研究

发布时间：2020-06-19 12:57

【摘要】：抑郁症是一类患病率、复发率及死亡率高的精神疾病,严重影响患者工作与生活,在临床上引起高度重视。沃替西汀是一种抗抑郁新药,2013年9月30日被美国FDA批准用于治疗成人重度抑郁症(Major Depressive Disorder,MDD),其制剂形式是沃替西汀氢溴酸盐。和传统的抗抑郁药相比,沃替西汀通过调节受体活性和抑制5-羟色胺转运蛋白再摄取两种作用机制联合发挥抗抑郁作用,使其有效性、安全性和耐受性更高。沃替西汀本身的水溶性较差(0.1 mg/mL),本实验室针对这个问题,制备了一种新的制剂形式-沃替西汀半盐酸盐,作为新药候选药物进一步开发。药物代谢研究是新药研发过程中重要的一环,研究内容包括体外代谢研究和体内代谢研究。体外代谢研究包括测定药物体外代谢的酶促动力学参数和确定参与代谢的CYP450酶表型,用来预测药物在体内的代谢清除过程和药物的相互作用,为药物在体内的代谢过程研究提供实验依据。体内代谢研究包括药物在体内的代谢动力学和代谢产物研究,为药物的安全性、有效性提供依据。本文将沃替西汀半盐酸盐作为潜在的抗抑郁药候选药物进行了体外和体内代谢初步研究,并与沃替西汀原药、沃替西汀氢溴酸盐及盐酸盐进行了系统比较。比较沃替西汀不同盐晶型在体外溶解度及大鼠体内口服吸收上的差异,并探讨了溶解度和生物利用度的关系,为沃替西汀制剂提供依据。研究的主要内容有:(1)溶解度研究用HPLC-UV法测定沃替西汀及其3种盐(氢溴酸盐、盐酸盐和半盐酸盐)在盐酸溶液(0.1mol/L,pH1.0)、醋酸缓冲液(pH4.5)、磷酸缓冲液(pH6.5)、水、SDS溶液(0.2%和0.5%)中的溶解度,比较其溶解度的差异。结果显示,在0.1mol/L盐酸溶液和pH6.5磷酸缓冲液中,沃替西汀及其3种盐的溶解度基本一致;在pH4.5醋酸缓冲液中,沃替西汀的溶解度最大,溶解度大小依次为:VOTVOT-HClVOT-HBrVOT-0.5HCl;在水中,溶解度大小依次为:VOT-HClVOT-HBrVOT-0.5HClVOT;在0.2%SDS溶液中,溶解度大小依次为:VOT-HBrVOT=VOT-0.5HClVOT-HCl;在0.5%SDS中,溶解度大小依次为:VOT-HBrVOT=VOT-HCl=VOT-0.5HCl。(2)沃替西汀及其盐晶型体内药动学研究采用超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法(UHPLC-MS/MS)建立新的大鼠血浆中沃替西汀的检测方法,并对其进行了系统的方法学验证。结果表明该分析方法专属性好,线性关系良好,基质效应、精密度、准确度、稳定性均符合要求,可用于沃替西汀在大鼠血浆中的定量分析。通过对大鼠灌胃给药等摩尔沃替西汀10.07μmol/kg(相当于沃替西汀3.0 mg/kg,沃替西汀氢溴酸盐3.82mg/kg,沃替西汀盐酸盐3.36 mg/kg,沃替西汀半盐酸盐3.18 mg/kg)和33.57μmol/kg(相当于沃替西汀10.0 mg/kg,沃替西汀氢溴酸盐12.73 mg/kg,沃替西汀盐酸盐11.20mg/kg,沃替西汀半盐酸盐10.6 mg/kg)的沃替西汀及其3种盐晶型,研究了其在大鼠体内的药代动力学过程。研究发现在两种给药剂量下,沃替西汀及其3种盐晶型在大鼠体内口服吸收没有统计学差异。由上述数据推测,在盐酸溶液(pH1.0)和的磷酸缓冲液(pH 6.5)中沃替西汀及3种晶型的溶解度相差不大,这可能是大鼠体内沃替西汀多晶型口服吸收没有统计学差异的原因之一。另外,影响药物吸收的因素,除了溶解度还有别的因素,比如适当的油水分配系数,因此沃替西汀晶型药物溶解度的差异并未影响其在大鼠体内的生物利用度。(3)沃替西汀在大鼠体内的代谢产物分析鉴定灌胃给予沃替西汀半盐酸盐10mg/kg,收集血浆、尿液和粪便。采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)技术筛选和鉴定了沃替西汀在大鼠血浆、尿液及粪便中的代谢产物。结果发现了29个代谢产物,其中血浆中17个,尿液中9个,粪便中12个,第一次发现的代谢产物有11个。主要的代谢途径有甲基化、羟化、氧化和葡萄糖醛酸化。(4)沃替西汀在大鼠肝微粒体中代谢表型及酶促动力学研究将系列浓度的沃替西汀与大鼠肝微粒体进行共孵育,采用UHPLC-MS/MS法测定孵育液中剩余沃替西汀的浓度,利用GraphPad Prism 6.0软件进行数据拟合并计算酶动力学参数。采用选择性化学抑制剂,测定不同抑制剂对沃替西汀代谢的影响,探讨大鼠肝微粒体中参与沃替西汀代谢的主要代谢酶亚型。在大鼠肝微粒体中,沃替西汀的Vmax为(23.76±2.99)ng·min~(-1)·mg~(-1);Km为(88.04±31.84)ng·mL~(-1);CLint为0.27 mL·min~(-1)·mg~(-1)。特异性抑制剂除了环丙沙星外,其他6种抑制剂对沃替西汀的代谢均有显著的抑制作用,其中氟西汀和酮康唑对沃替西汀的抑制作用呈浓度依赖。结果表明,沃替西汀在大鼠肝微粒体中被广泛代谢,其中包括Ⅰ相CYP450酶CYP2C9,CYP2D6,CYP3A4,CYP2C19,Ⅱ相代谢酶SULT和UGT。
【学位授予单位】：华南理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R965
【图文】：

结构式,抗抑郁药,抑郁症,抑制力

图 1-2 沃替西汀结构式he chemical structure of v抑郁症（Major Depressive公司联合研发，被美国2013 年 9 月 30 日批准以沃替西汀是一种新型的具备郁作用：调节受体活性环类抗抑郁药和单胺氧沃替西汀的作用机制研究，是 5-HT3、5-HT7、5动剂和 5-HT 转运体抑制力学研究结果显示，在人1 h，半衰期 t1/2平均为 66

色谱图,血浆,空白,色谱图

图 2-1A 空白血浆图，B 空白血浆+VOT（2.5 ng/mL）+ IS (20 ng/mL)色谱图，C S鼠灌胃给药沃替西汀 3.0 mg/kg 后 1.0 h 的血浆样品色谱图Fig 2-1 Representative chromatograms of a blank plasma sample (A), a blank plasma saspiked with Vortioxetine (2.5 ng/mL) and the IS (20 ng/mL) (B), and a plasma saobtained from a rat 1.0 h after oral administration of vortioxetine (3.0 mg/kg) (C)2.5.2 线性以沃替西汀的浓度（ng/mL）为横坐标，以沃替西汀和内标卡马西平峰面积比坐标，采用加权最小二乘法，得到标准曲线，如图 2-2。由图可知，大鼠血浆样品替西汀的标准曲线方程为 y=0.3023X+0.0673 (R2=0.9995)，结果表明沃替西汀0.078-40.00 ng/mL 范围内，线性关系良好。

【参考文献】