阿托伐他汀对阿霉素致大鼠肝脏损伤的保护作用及其机制研究

发布时间：2020-06-21 01:16

【摘要】：目的:阿霉素(Dox)是临床常用的抗恶性肿瘤药物,广泛用于多种实体瘤和血液系统肿瘤的治疗。然而阿霉素在发挥抗肿瘤作用的同时,普遍存在多种毒副作用包括心血管、肝脏、肾脏损伤和脂代谢紊乱等。阿托伐他汀(Ato)属于羟甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-Co A)还原酶抑制剂,是临床用量最多的降血脂药。近年来研究发现,他汀类药物不仅有明显的调血脂作用,还具有改善内皮功能、减轻炎症反应、抗氧化及抗血小板聚集等“多效性”特点。但目前并无证据证明阿托伐他汀对阿霉素所致的肝损伤是否有保护作用。因此本研究旨在建立阿霉素肝脏损伤动物模型,在整体水平探讨阿托伐他汀对阿霉素所致肝脏损伤的影响及其可能的分子机制。方法:SD大鼠,随机分为四组:对照组(Con)、阿霉素组(Dox)、阿霉素+阿托伐他汀低剂量组2 mg/kg(Dox+Ato low)、阿霉素+阿托伐他汀高剂量组6 mg/kg(Dox+Ato high)。各组均灌胃给药,对照组及阿霉素组给予等容积羧甲基纤维素钠,每日一次,连续两周。阿霉素组与阿托伐他汀各剂量组均于治疗前1小时一次性腹腔注射(i.p.)Dox 10 mg/kg,对照组i.p.相同体积的生理盐水。每周末最后一次给药后禁食12小时,次日眼内眦取血测定血清中各种生化指标(ALT、AST、ALB、TP、TG及NEFA等)。之后将动物麻醉,剖开腹腔和盆腔,将肝脏和脂肪称重,计算脏器系数。测定脂肪中激素敏感性脂肪酶(HSL)和甘油三酯脂肪酶(ATGL)活性。取部分肝脏组织用于组织病理学检查,再将部分组织切片采用DHE荧光探针检测肝组织ROS的含量,部分肝脏制成匀浆检测GSH和MDA含量,其余用Western Blot技术测定Mn-SOD、NF-κB、IL-1β、FABP4、FABP3、FABP1、CPT-1、BAX及BCL-2等蛋白含量。结果:1.动物的一般情况对照组大鼠摄食量、体重及一般活动在2周内未见异常。和对照组相比,阿霉素组动物摄食量下降、体重明显降低(P0.05或0.01)、精神萎靡、竖毛、腹部膨隆、眼周围可见红色分泌物。阿托伐他汀两个剂量组动物的一般状况均优于阿霉素组,但对阿霉素所致的动物体重降低未见明显的缓解作用。2.血清生化结果给药后第一周末,与对照组相比,阿霉素组ALT、AST、TG及NEFA均明显升高(P0.05或0.01),而TP及ALB明显降低(P0.01);与阿霉素组相比,阿托伐他汀低剂量组对阿霉素所致的血清TG、NEFA和ALT水平升高有明显的改善作用(P0.05或0.01),对AST、TP及ALB则无明显影响;与阿霉素组相比,阿托伐他汀高剂量组对血清中ALT、AST、TG及NEFA水平均有明显的降低作用(P0.01),对TP及ALB未见明显影响。第二周末,与对照组相比,阿霉素组ALT、AST、TG及NEFA均明显升高(P0.01),而TP及ALB明显降低(P0.05或0.01);与阿霉素组比,阿托伐他汀低剂量组血清中NEFA、ALT及AST水平均降低(P0.05或0.01),而TP、ALB及TG未见明显影响;与阿霉素组相比,阿托伐他汀高剂量可降低血清中ALT、AST、TG及NEFA水平(P0.05或0.01),升高ALB水平(P0.05),对TP未见明显影响。3.肝脏大体和病理检查对照组肝脏呈红褐色、质地柔软,肝脏病理可见正常肝小叶结构;阿霉素组肝组织颜色浅淡、质韧、边缘钝圆,部分肝组织出现融合现象,病理结果显示肝板结构排列紊乱、肝细胞水肿、空泡变性,偶见坏死现象,周围可见炎细胞浸润;阿托伐他汀两个剂量组动物的肝组织外观均较阿霉素组有所好转,高剂量组部分动物肝脏颜色及外观基本恢复正常,病理结果显示阿托伐他汀能不同程度缓解阿霉素引起的炎细胞浸润、肝细胞及间质水肿。4.肝组织氧化应激指标检测和对照组相比,Dox可引起肝组织GPX水平下降,MDA水平升高(P0.05);阿托伐他汀低剂量组对GPX和MDA水平无明显影响,而高剂量组对Dox所致的GPX水平下降和MDA的升高均有明显的缓解作用(P0.05)。对肝脏组织切片ROS水平的研究结果表明:阿霉素组肝脏组织较对照组ROS含量明显增多,阿托伐他汀各剂量组比阿霉素组表达相对较少。Western Blot结果显示:和对照组相比,阿霉素组肝脏Mn-SOD蛋白含量明显降低(P0.01);阿托伐他汀低剂量组较阿霉素组Mn-SOD含量有所增加,但无显著性差异;阿托伐他汀高剂量组较阿霉素组Mn-SOD含量显著增加(P0.01)。5.脂肪组织酶活性检测阿霉素组脂肪组织中HSL和ATGL较对照组明显增加(P均0.01);阿托伐他汀低剂量组与阿霉素组相比ATGL和HSL明显降低(P0.05);阿托伐他汀高剂量组ATGL和HSL与阿霉素组相比均明显降低(P0.01)。6.肝组织炎症和凋亡指标检测Western Blot结果显示,和对照组相比,阿霉素组NF-κB、IL-1β蛋白含量增加(P0.01),BAX/BCL-2比值增加(P0.05);低剂量阿托伐他汀与阿霉素组相比,NF-κB蛋白含量明显降低(P0.05),IL-1β含量和BAX/BCL-2比值有所减少,但未见统计学显著性;阿托伐他汀高剂量组和阿霉素组相比,NF-κB、IL-lβ蛋白表达和BAX/BCL-2比值明显降低(P0.05)。7.肝组织脂肪酸转运体和代谢酶蛋白表达Western Blot结果显示,和对照组相比,阿霉素组FABP1和FABP4蛋白含量明显增加(P0.05或0.01),CPT1和FABP3蛋白水平明显降低(P0.05或0.01);阿托伐他汀低剂量组和阿霉素组相比,FABP3蛋白明显增加,FABP1、FABP4和CPT1未见明显变化;阿托伐他汀高剂量组和阿霉素组相比,FABP1、FABP4蛋白含量明显降低,CPT1和FABP3蛋白水平明显增加(P0.05)。结论:1.阿霉素可造成大鼠慢性肝损伤和脂肪组织萎缩,阿霉素的肝损伤作用和其可增加肝组织氧化应激、炎症和凋亡有关。对脂肪组织的萎缩作用和其可促进脂肪组织的脂肪分解有关。2.阿托伐他汀对阿霉素所致的肝损伤有一定的保护作用,这种作用和其可减轻氧化应激、炎症和细胞凋亡有关。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R965
【图文】：

阿托伐他汀,阿霉素

图 1 阿托伐他汀对阿霉素致大鼠体重的影响Fig.1 Effects of Ato on body weight in rats with Dox-inducedhepatotoxicity. * P < 0.05, ** P < 0.01 vs Con group

肝毒性,阿托伐他汀,阿霉素

25图 2 阿托伐他汀对给予阿霉素致肝毒性大鼠血清中 TG、 NEFA、ALT、AST、TP 和 ALB 的影响Fig.2 The effects of Ato on the serum levels of TG, NEFA, ALT, AST,TP and ALB in rats with Dox-induced hepatotoxicity. * P <0.05, ** P<0.01vs Con group,#P <0.05,##P <0.01 vs Dox group

【参考文献】