辛伐他汀对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血管内皮功能障碍的影响及其机制研究

发布时间：2020-08-11 08:00

【摘要】：目的观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病(DM)大鼠血管内皮功能的变化,并进一步研究辛伐他汀对糖尿病大鼠血管内皮功能障碍的保护作用及其可能的机制。意义:本实验通过对血管内皮功能障碍的机制研究进一步探讨了血管内皮功能障碍与炎症和氧化应激的关系,为预防和减轻心血管疾病提供理论依据,也为辛伐他汀防治糖尿病血管功能障碍提供了实验依据。方法30只雄性SD大鼠,由锦州医科大学实验动物中心提供,腹腔注射STZ50mg/kg,连续注射5天,5天后空腹8小时,经内眦静脉取血测血糖,随机血糖值≥15 mmol/L被认为是糖尿病大鼠造模成功,24只大鼠造模成功,将其随机分为2组,每组12只,分别是:模型组和辛伐他汀组(20 mg/kg/d),另取12只雄性SD大鼠作为空白对照组。辛伐他汀用0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)助溶,然后采用灌胃的方式给药,连续灌胃12周,空白对照组和模型组每日给予相同体积的CMC灌胃。指标测量方法:1)电子天平称体重;2)试剂盒微量法测GLU、TC、TG在血清中的含量;3)血管张力实验检测各组大鼠离体主动脉血管舒张功能;4)冰冻切片进行DHE染色法检测主动脉组织中活性氧;5)ELISA法测定血清中TNF-α和IL-6浓度;6)Western-blot测定内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、Calpain-1、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达;7)免疫组化检测ICAM-1、VCAM-1表达;8)组织形态学研究(HE染色,DHE染色)。结果与空白对照组相比,模型组大鼠体重减轻(P0.05);血清中GLU、TC、TG含量增加(P0.05);血管舒张功能减弱(P0.01);血管中活性氧明显增多(P0.05);血管组织中e NOS蛋白表达降低(P0.05);Calpain-1蛋白表达量增加(P0.05),同时血管组织中炎症因子IL-6、TNF-α的蛋白表达上升,(P0.05);细胞间粘附分子ICAM-1、VCAM-1的蛋白表达增加(P0.05,P0.01);免疫组化检测中血管内膜ICAM-1、VCAM-1的表达明显增加;HE染色和DHE染色显示血管组织形态发生明显改变和血清中的TNF-α、IL-6的浓度升高(P0.01,P0.05)。与模型组相比,辛伐他汀能够增加大鼠体重(P0.05);降低血清中GLU、TC、TG含量(P0.05);改善血管舒张功能(P0.05);减少血管组织中活性氧(P0.05);提高血管组织中e NOS的蛋白表达(P0.05);降低Calpain-1蛋白表达(P0.05);还能够降低血管组织中炎症因子IL-6和TNF-α的蛋白表达(P0.05);减少细胞间粘附分子ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达(P0.05,P0.01)。另外,辛伐他汀能够降低血管内膜ICAM-1和VCAM-1表达,减轻血管组织形态改变,降低血清中TNF-α和IL-6的浓度(P0.05)。结论1.辛伐他汀能够抑制Calpain1的表达,使TNF-α和IL-6的表达降低,减少ICAM-1和VCAM-1的表达,在抗炎方面对STZ诱导的糖尿病大鼠的血管内皮功能障碍进行有效的改善。2.辛伐他汀能够抑制Calpain1的表达,增加eNOS的表达,增加NO的产生,减少ROS的产生,在抗氧化应激方面对STZ诱导的糖尿病大鼠的血管内皮功能障碍进行有效的保护。
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R965
【图文】：

辛伐他汀,糖尿病大鼠,血清

14图1 辛伐他汀对大鼠体重的影响（_x±s, n=10）注：与CON组相比，* P<0.05；与STZ组相比，# P<0.05。二、辛伐他汀对糖尿病大鼠血清中GLU,TC,TG的影响与CON组相比，STZ组GLU,TC,TG的含量均显著增加（P<0.05），与STZ组相比，SIM能够明显降低GLU,TC,TG的含量（P<0.05）,见表2，图2。表 2 辛伐他汀对糖尿病大鼠血清中 GLU,TC,TG 的影响(_x ± s,n = 10 ).分组 GLU(mmol/l)TC(mmol/l)TG(mmol/l)CON 7.34±1.24 1.76±0.21 2.32±0.38STZ 27.4±1.52* 3.28±0.44* 3.34±0.66*SIM 19.4±0.73#2.32±0.26#2.59±0.28#注：与 CON 组相比，* P<0.05；与 STZ 组相比

辛伐他汀,糖尿病大鼠,血清

15图2 辛伐他汀对糖尿病大鼠血清中GLU,TC,TG的影响(_x ± s,n = 10 )注：与 CON 组相比，* P<0.05；与 STZ 组相比，# P<0.05。三、辛伐他汀对糖尿病大鼠血清中 TNF-α,IL-6 的影响与 CON 组比 STZ 组血清中 TNF-α,IL-6 含量明显增加（P<0.01,P<0.05），与 STZ 组比，SIM 组血清中 TNF-α,IL-6 含量明显降低（P<0.05），见表 3，图 3。表 3 辛伐他汀对糖尿病大鼠血清中 TNF-α 和 IL-6 的影响(_x ± s,n = 10 )注：与 CON 组相比，* P<0.05

血管舒张功能,辛伐他汀,糖尿病大鼠,活性氧

与CON组相比，用乙酰胆碱刺激后，STZ组血管舒张力明显减弱（P<0.01）；与STZ组相比，SIM组对STZ导致的血管舒张力减弱有明显的改善作用，并升高了最大舒张力（P<0.05），见图4。图4辛伐他汀对糖尿病大鼠血管舒张功能的影响（_x±s, n=8）注：与CON组相比，** P<0.01；与STZ组相比，* P<0.05。五．辛伐他汀对血管组织中活性氧的影响DHE染色法可以检测出血管组织的活性氧，红色荧光强度越大表明活性氧

【参考文献】