C16多肽与血管生成素-1复合药物对视神经脊髓炎大鼠治疗效果研究

发布时间：2020-08-15 10:28

【摘要】：目的:为了进一步验证C16多肽与血管生成素-1(Ang-1)复合药物对中枢神经损伤类疾病的治疗作用,进行此研究。既往研究已经表明C16多肽可与整合素αvβ3特异性识别并结合,能有效改善局部炎性环境;Ang-1可以降低血管通透性,调节血-脑屏障(blood brain barrier,BBB)急性损伤和炎症,从而有效地减少血管渗漏。本研究在模拟视神经脊髓炎病程的大鼠模型上给予C16+Ang-1联合尾静脉注射治疗,阐明C16+Ang-1复合药物对视神经脊髓炎(NMO)大鼠模型的脑和脊髓及视神经等组织内主要病理变化,脱髓鞘及炎性细胞浸润,病程进展是否具有缓解,对中枢神经系统功能改善的作用。方法:取Lewis雄性大鼠90只随机分成正常组、对照组和治疗组。从已确诊为NMO患者的血清中提取纯化的NMO-IgG与人类补体C5混合,对Lewis大鼠(正常组除外)进行脑室和蛛网膜下腔注射,制备具典型症状的NMO大鼠模型。治疗组以每只每天0.5ml C16(4mg/ml)+0.5ml Ang-1(800ug/ml)的剂量进行连续一周的尾静脉注射;对照组注射同剂量的磷酸盐缓冲溶液(PBS)。造模后每天记录实验组大鼠的活动状态进行神经功能评分,在免疫后3天(发病初期),1周(高峰期)和8周(缓解期)后分别麻醉灌注各组大鼠,取其脑、脊髓和视神经,通过组织形态染色、免疫组化、免疫荧光、电生理、Western blot、ELISA、冷冻电镜扫描等检测各组的病理学上的变化情况。结果:C+A给药组大鼠与对照组大鼠相比,运动功能障碍与视力受损伤情况均有所改善,神经功能性评分低于对照组评分。此外治疗组大鼠在髓鞘脱失、轴突损伤、神经元细胞凋亡、炎性细胞浸润及血管水肿渗漏等病理变化有一定程度的缓解与改善。结论:C16与Ang-1复合药物对具典型症状的NMO大鼠有抗炎与神经保护作用。
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R965
【图文】：

多肽,下池,整合素,淋巴

逦Ｔｉｅ２相结合，磷酸化Ｔｉｅ２，活化Ｔｉｅ２表达的内皮细胞吸引血管周围细细胞、周细胞等的包围，促进损伤血管的存活减少渗漏，支持内皮细胞逡逑的血菅壁，并维持血管结构的稳定［ｍ８１，并通过细胞－细胞、细胞－基质维持血管结构［１９］。在稳定毛细血管的结构与减少内皮细胞的通透性方面逡逑的作用［２２１。逡逑的Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ体系体外实验中，正常情况可以看到人Ｔ细胞性白血病细）在上池中游走，同时受到下池中的ＴＮＦ－ａ（＋）趋化作用影响，贴附到人内皮细胞层所附着生物膜上，继而穿越到下池中去。而将血管内皮细胞逡逑１６多肽预孵育过后，从上池穿过血管内皮细胞层到达下池的ＴＨＰ１细胞逡逑用ＳＰ３多肽处理的对照组明显减少。这些结果表明，Ｃ１６多肽特异性识逡逑ｃｃｖｐ３，从而竞争性结合炎性细胞在血管内皮细胞上的位点，阻断炎性细逡逑越血管内皮细胞之间的动态过程［２３１。逡逑２逡逑

结果分析,实验大鼠,联合治疗,病灶

ＭＲＩ结果分析，对照组ＮＭＯ大鼠脑ＣＴ显示病灶出现在大脑半球并融合至区（如下图所示，经过Ｃ＋Ａ治疔的大鼠脑内病灶明显减小，说明有一定治。逡逑Ｎｏｒｍａｌ逦Ｖｅｈｉｃｌｅ邋ｌｗ逦Ｃ＋Ａ邋ｌｗ逡逑

神经功能评分,实验组,神经功能

逑■■■逡逑图３．１邋ＮＭＯ各实验组大鼠ＭＲＩ颅内病灶结果分析逡逑３．２邋Ｃ＋Ａ联合治疗减轻了邋ＮＭＯ实验大鼠的发病程度逡逑如下图所示，正常组老鼠神经功能性评分几乎没有变化。ＮＭＯ对照俎免疫后逡逑第三天开始发病，神经功能性评分在３．０左右（不可自我恢复），具体表现为精神逡逑不振、食欲下降、体重减轻、尾部张力不足、单侧后肢及双侧后肢无力，有极个逡逑别老鼠病情非常严重四肢瘫痪或是濒临死亡。ＮＭＯ对照组在免疫后第一周达到发逡逑病高峰期，神经功能性评分７．０±０．５，其发病严重程度一直持续到第三周，直到免逡逑疫后第八周，幸存的ＮＭＯ对照组大鼠尾部仍软弱无力说明其始终处于患病状态。逡逑２０逡逑

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