ELB对乳腺癌的抗血管生成及生长抑制作用研究
【学位单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2019
【中图分类】:R96
【部分图文】:
第一部分:ELB 体外抗肿瘤活性的研究。首先通过 MTT 实验检测 ELB 对不同肿瘤细胞增殖的影响,发现 ELB 对 4T1 乳腺癌细胞的抑制作用最显著。进一步通过 q-PCR 方法检测 ELB 对 4T1 乳腺癌细胞血管生成相关因子(VEGF-A、bFGF、MMP-9)mRNA 的表达。第二部分:ELB 体外介导巨噬细胞抗血管生成作用的研究。首先通过 MTT实验、q-PCR 和 ELISA 检测 ELB 对巨噬细胞增殖、血管生成相关因子(VEGF-A、bFGF、MMP-9)mRNA 的表达及 VEGF 蛋白的影响;再通过 MTT 实验、细胞划痕实验、Matrigel 基质胶细胞成管实验,观察 ELB 通过巨噬细胞对内皮细胞增殖、迁移和管腔形成的影响。第三部分:ELB 体内抗肿瘤活性的研究。构建 4T1 荷瘤小鼠模型,分组给予不同剂量的 ELB 后,考察不同组小鼠的肿瘤体积变化、瘤重、抑瘤率及小鼠体重变化,研究 ELB 对肿瘤的抑制作用。然后通过免疫荧光染色观察 ELB 对肿瘤的血管形成、巨噬细胞募集作用、VEGF 蛋白的表达,q-PCR 方法检测肿瘤中VEGF-A mRNA 水平,血常规测血小板的含量。本课题的研究思路如图 1.1 所示。
图 2.1 ELB 作用于不同肿瘤细胞 48h 后的细胞增殖。(A)LLC 细胞。(B)4T1 细胞。(C)SMMC-7721 细胞。(D)A549 细胞。(E)H1299 细胞。2.3.2 ELB 抑制 4T1 细胞血管生成相关因子 mRNA 的表达肿瘤的生长需要血管为其提供氧气和营养物质[75]。为了探讨 ELB 对 4T1 细胞内血管生成因子 mRNA 表达的影响,将不同浓度的 ELB(5 μM、10 μM、20 μM)作用 4T1 细胞 3 h 后提取总 RNA,用 q-PCR 方法检测 4T1 细胞内血管生成相关因子(VEGF-A、bFGF、MMP-9)mRNA 的表达水平。实验结果如图 2.2 所示,与 Control 组相比,ELB 以剂量依赖性抑制细胞内 VEGF-AmRNA、bFGF mRNA的表达,各组与 Control 组相比均有显著性差异,且在 20 μM 时抑制作用最显著(图 2.2 A 和图 2.2 B);ELB 也呈剂量依赖性抑制细胞内 MMP-9 mRNA 的表达,但只有在 20 μM 时有显著性差异(图 2.2 C)。以上结果表明 ELB 能抑制4T1 细胞内 VEGF-A、bFGF、MMP-9 mRNA 的表达。A BC
不同肿瘤细胞 48h 后的细胞增殖。(A)LLC MMC-7721 细胞。(D)A549 细胞。(E)H1 4T1 细胞血管生成相关因子 mRNA 的要血管为其提供氧气和营养物质[75]。为了 mRNA 表达的影响,将不同浓度的 ELB( 后提取总 RNA,用 q-PCR 方法检测 4T1bFGF、MMP-9)mRNA 的表达水平。实,ELB 以剂量依赖性抑制细胞内 VEGF-Aontrol 组相比均有显著性差异,且在 20 μ.2 B);ELB 也呈剂量依赖性抑制细胞内μM 时有显著性差异(图 2.2 C)。以上-A、bFGF、MMP-9 mRNA 的表达。BC
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 李丽英;;套入式血管生成的研究进展[J];四川生理科学杂志;2011年01期
2 朱兆恩 ,郭凯霞 ,张子英;抗血管生成中药研究进展[J];人民军医;2005年05期
3 王淑美,徐晓玉,张文亮;调控血管生成中药的研究现状[J];时珍国医国药;2004年09期
4 王国庆,易成,周宏远;因特网上的血管生成研究资源[J];中国微循环;2004年04期
5 练燕;抑制血管生成:第五类抗癌疗法?[J];国外医学.护理学分册;2004年10期
6 邹戈;肿瘤血管生成与抗血管生成研究进展[J];国外医学.泌尿系统分册;2003年01期
7 王国庆,易成;中药与血管生成的研究进展[J];微循环学杂志;2003年01期
8 丁志山,沃兴德;中药对血管生成影响的研究进展[J];中国中西医结合杂志;2002年03期
9 曹健,郭德玉,张恩娟;血管生成与疾病治疗[J];中国药房;2001年07期
10 方栩;;银屑病外周血单—核细胞的血管生成能力[J];国外医学.皮肤病学分册;1987年01期
相关博士学位论文 前10条
1 林金端;长链非编码RNA UBE2CP3在肝细胞癌血管生成中的作用及机制研究[D];南方医科大学;2018年
2 王新志;告达庭诱导凋亡和抗血管生成抑制人脑胶质瘤生长机制研究[D];山东大学;2018年
3 范明君;长链非编码RNA TUG1通过上调LRG1促进卵巢癌血管生成的研究[D];山东大学;2019年
4 宋虹瑾;速激肽Hemokinins促血管生成和手性小分子化合物抗肿瘤活性研究[D];兰州大学;2012年
5 张仁文;人胃癌细胞中miR-574表达调控及其促血管生成机制的研究[D];吉林大学;2017年
6 陈刚;川芎嗪对大鼠胶原性关节炎血管生成与巨噬细胞分泌VEGF的影响[D];重庆医科大学;2005年
7 孟繁平;Raf-1在胃癌及其血管生成中的作用及分子机制研究[D];第四军医大学;2005年
8 邓勇;整合素α_vβ_3受体抑制剂的分子设计、合成及生物学活性研究[D];四川大学;2001年
9 郑国静;消痰散结方调控诱导型一氧化氮合酶表达抗胃癌血管生成的实验研究[D];第二军医大学;2005年
10 王心华;力达霉素和大黄素的抗血管生成和抗转移作用及其机制研究[D];中国协和医科大学;2001年
相关硕士学位论文 前10条
1 张丹;Sapylin(OK-432)在体内和体外对炎症反应和血管生成的影响的研究[D];华中科技大学;2019年
2 杨喜燕;ELB对乳腺癌的抗血管生成及生长抑制作用研究[D];郑州大学;2019年
3 胡澄;OP-B抑制NSCLC血管生成及迁移侵袭的相关机制[D];南京中医药大学;2019年
4 葛乔枫;KPNA2对人骨肉瘤细胞增殖和血管生成的体内实验研究[D];山西医科大学;2019年
5 吴湘光;子宫颈鳞癌细胞外泌体介导miR-221-3p调节血管生成的作用机制研究[D];南方医科大学;2018年
6 康恩铭;DNMT1对MGMT启动子低甲基化状态人胶质瘤干细胞血管生成能力调控研究[D];中国人民解放军空军军医大学;2018年
7 郑继泰;MiR-222在砷诱导肺癌形成和新的血管形成中的作用机制研究[D];南京医科大学;2014年
8 张晨曦;千层纸素A抑制YAP/HIF-1α信号通路抗肝纤维化中血管生成的机制研究[D];南京中医药大学;2018年
9 张浩;重组PTHrP 87-139蛋白治疗小鼠心肌梗死的实验研究[D];南京医科大学;2017年
10 李香香;IL-17促进肺癌血管生成作用的研究及其机制探讨[D];吉林大学;2017年
本文编号:2865959
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/2865959.html