BM-MSCs通过增强MDSCs免疫抑制功能治疗小鼠实验性干燥综合征的实验研究
发布时间:2020-12-05 02:56
目的:研究小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)对实验性干燥综合征小鼠(experimental Sj?gren syndrome,ESS)疾病进程的影响;探究BM-MSCs对髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)的调控作用及其分子机制。方法:(1)构建ESS小鼠模型,于初次免疫后的第18天和第25天经尾静脉过继转移BM-MSCs至ESS小鼠,检测小鼠唾液流速,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中抗SG抗体,抗核抗体和抗M3R抗体的水平。流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测小鼠脾脏及颈部淋巴结中Th1和Th17细胞的比例。(2)尾静脉过继转移BM-MSCs于ESS小鼠,FCM检测小鼠脾脏及颈部淋巴结中总MDSCs及其亚群多核细胞样MDSCs(polymorphonuclear MDSCs,PMN-MDSCs)和单核细胞样MDSCs(monocytic MDSCs,M-MDSCs)的比例。采用免疫磁珠法分选不同处理组ESS小鼠脾脏中的CD...
【文章来源】:江苏大学江苏省
【文章页数】:68 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
原发性干燥综合征中涉及到的细胞和分子机制[8]
图 1.3 MSCs 的免疫调节能力[91]Figure1.3 Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells[91]1.4 本实验的研究目的、方法、实验设计及意义1.4.1 实验的研究目的前期的实验结果我们发现随着 ESS 疾病的发生发展,MDSCs 的免疫抑制功能逐渐丧失,进而促进疾病进程。本研究初步探讨 BM-MSCs 对 ESS 小鼠中 MDSCs 的免疫抑制功能的调控及分子机制作用,为临床干燥综合征的治疗提供新的策略。1.4.2 实验方法BM-MSCs 原代培养及纯化、实验性干燥综合征小鼠模型的构建、流式细胞术、免疫磁珠分选法、逆转录 PCR、实时荧光定量 PCR、转染、CFSE 标记的淋巴细胞增殖实验等。
江苏大学硕士学位论文**: p<0.01, *: p<0.05)。2.3 实验结果2.3.1 BM-MSCs 对 ESS 小鼠疾病进程的影响如图 2.1A 所示,分别在第一次免疫后的第 18 天和第 25 天,通过尾静脉过继转移BM-MSCs 至 ESS 小鼠体内,并观察其对 ESS 小鼠疾病进程的影响。结果显示,过继转移 BM-MSCs 至 ESS 小鼠后,小鼠的唾液流速明显加快(图 2.1B)(**p<0.01);多种与ESS 疾病进程密切相关的自身抗体,包括抗 SG 抗体,抗核抗体和抗 M3R 抗体的水平显著下降(图 2.1C.D.E)(**p<0.01)。
本文编号:2898737
【文章来源】:江苏大学江苏省
【文章页数】:68 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
原发性干燥综合征中涉及到的细胞和分子机制[8]
图 1.3 MSCs 的免疫调节能力[91]Figure1.3 Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells[91]1.4 本实验的研究目的、方法、实验设计及意义1.4.1 实验的研究目的前期的实验结果我们发现随着 ESS 疾病的发生发展,MDSCs 的免疫抑制功能逐渐丧失,进而促进疾病进程。本研究初步探讨 BM-MSCs 对 ESS 小鼠中 MDSCs 的免疫抑制功能的调控及分子机制作用,为临床干燥综合征的治疗提供新的策略。1.4.2 实验方法BM-MSCs 原代培养及纯化、实验性干燥综合征小鼠模型的构建、流式细胞术、免疫磁珠分选法、逆转录 PCR、实时荧光定量 PCR、转染、CFSE 标记的淋巴细胞增殖实验等。
江苏大学硕士学位论文**: p<0.01, *: p<0.05)。2.3 实验结果2.3.1 BM-MSCs 对 ESS 小鼠疾病进程的影响如图 2.1A 所示,分别在第一次免疫后的第 18 天和第 25 天,通过尾静脉过继转移BM-MSCs 至 ESS 小鼠体内,并观察其对 ESS 小鼠疾病进程的影响。结果显示,过继转移 BM-MSCs 至 ESS 小鼠后,小鼠的唾液流速明显加快(图 2.1B)(**p<0.01);多种与ESS 疾病进程密切相关的自身抗体,包括抗 SG 抗体,抗核抗体和抗 M3R 抗体的水平显著下降(图 2.1C.D.E)(**p<0.01)。
本文编号:2898737
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