UPLC-MS/MS法测定人血浆中多沙唑嗪的质量浓度
发布时间：2020-12-08 13:29
目的建立UPLC-MS/MS法测定多沙唑嗪（doxazosin）在人血浆中的质量浓度,研究其在人血浆中的药代动力学行为。方法采用Acquity Uplctm Beh C18色谱柱（100mm×2.1mm,1.7μm）,以甲醇-10mmol·L-1醋酸铵溶液-甲酸（体积比23∶77∶0.1）为流动相,样品处理先用1 mol·L-1的Na OH碱化后再用甲基叔丁基醚提取,内标物为盐酸特拉唑嗪;离子源:ESI;流速:0.2mL·min-1;柱温:25℃。结果多沙唑嗪线性范围为0.10040.0μg·L-1（r=0.996 1）,定量下限（LLOQ）为0.100μg·L-1,日间和日内精密度RSD均小于12.5%,提取回收率在80.1%85.6%内。主要的药动学参数如下:ρmax为（27.4±7.4）μg·L-1,tmax为（3.0±1.0）h,t1/2为（19.3±4.7）h,AUC0→t为（409.3±82.7）μg·h·L-1,AUC0→∞为（427±73.2）μg·h·L-1。结论本方法简便、快捷、重现性好,适用于测定多沙唑嗪在人血浆中的质量...
【文章来源】：沈阳药科大学学报. 2015年05期 第381-385页 北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
多沙唑嗪的化学结构式
方法与结果2.1色谱条件色谱柱:AcquityUplctmBehC18柱(100mm×2.1mm，1.7μm);流动相:甲醇-10mmol·L－1醋酸铵溶液-甲酸(体积比23∶77∶0.1);流速:0.2mL·min－1;柱温:25℃;进样量:20μL。2.2质谱条件离子源:ESI(正离子);扫描方式:MＲM，离子分别为m/z452.3→344.2(多沙唑嗪)和m/z388.1→290.1(内标特拉唑嗪)，扫描时间为100ms;IS:4kV，TEM:400℃，GS1:50psi，GS2:45psi，CAD:6psi;多沙唑嗪:CE为38V，DP为110V，EP为4V，CXP为15V;特拉唑嗪:CE为33V，DP为110V，EP为8V，CXP为20V。碎片离子质谱图见图2。Fig．2Productionspectraof［M+H］+ofdoxazosin(A)andinternalstandard(B)图2多沙唑嗪(A)和内标特拉唑嗪(B)［M+H］+的产物离子全扫描质谱图2.3溶液的配制2.3.1标准溶液和质量控制溶液取甲磺酸多沙唑嗪对照品适量，精密称定。以体积分数50%甲醇溶液溶解后制得质量浓度为1.00g·L－1多沙唑嗪对照储备液。分别取对照储备液适量，用体积分数50%甲醇溶液稀释制成质量浓度为1.00、3.00、10.0、20.0、50.0、100、200和400μg·L－1的系列标准溶液和质量浓度分别为2.00、40.0、300μg·L－1的质量控制溶液置4℃冰箱冷藏备用。2.3.2内标溶液取盐酸特拉唑嗪对照品适量，精密称定。以体积分数50%甲醇溶液溶解后制得质量浓度为1.00g·L－1内标储备液。取内标储备液适量，用体积分数50%甲醇溶液稀释制成质量浓度为200μg·L－1内标溶液，置4℃冰箱冷藏备用。2.4血浆样品处理吸取于室温下融化的血浆样品200μL，置10mL具塞试管中，依次加入多沙唑嗪系列标准溶液20μL，内标溶液20μL，加入1mol·L－1NaOH溶液100μL，涡旋30s，再加入甲基叔丁基醚3mL，涡流1min，于4000r·min－1
Ⅰ—Doxazosin;Ⅱ—InternalstandardFig．3Chromatogramsofblankhumanplasmasample(A)，blankhumanbloodsamplespikedwithstandardsolutionofdoxazosin(1.00μg·L－1)andinternalstandard(200μg·L－1)(B)，sampleobtaindat1.5hafteroraladministrationofdoxazosinmesylatetablets(C)图3空白血浆(A)，空白血浆加对照品和内标溶液(B)和口服给药甲磺酸多沙唑嗪片1.5h后样品色谱图(C)2.6标准曲线的绘制吸取于室温下融化的空白血浆200μL，分别加入系列标准溶液及内标溶液各20μL，每个质量浓度2样本分析，配制成相当于血浆质量浓度为0.100、0.300、1.00、2.00、5.00、10.0、20.0和40.0μg·L－1的血浆样品，按“2.4”条方法中“加入1mol·L－1NaOH溶液100μL”处理，制备待测物标准曲线，测定3批。以待测物与内标质量浓度比值为横坐标(ρ)，待测物与内标物的峰面积比值为纵坐标(A)，采用加权最小二乘法［7］(权重系数:1/X2)，求得直线回归方程:A=9.70×10－3ρ+3.60×10－3(r=0.9961)，连续测定3批，结果表明多沙唑嗪质量浓度在0.100～40.0μg·L－1内线性关系良好，定量下限为0.100μg·L－1。2.7精密度，准确度和定量下限的确定吸取空白血浆(于室温下融化)200μL，按“2.6”条方法制备待测物低、中、高3个质量浓度分别为0.200、4.00、30.0μg·L－1的质量控制(QC)样品，同时制备质量浓度为0.100μg·L－1的定量下限样品，每个质量浓度6样本分析，结果见表1。表明本方法适用于测定人血浆中多沙唑嗪并符合相关规范［8］。Table1LLOQ，accuracyandprecisionofdoxazosininplasma(n=6)表1血浆中多沙唑嗪的定量下限，准确度和精密度试验结果(n=6)ρadded/(μg·L－1)?
【参考文献】：
期刊论文
[1]甲磺酸多沙唑嗪片人体生物等效性试验研究[J]. 韩颖,谢云. 亚太传统医药. 2013(10)
[2]高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中多沙唑嗪的浓度[J]. 阮邹荣,袁虹,孙凌. 药物分析杂志. 2009(02)
[3]前列安通联合甲磺酸多沙唑嗪控释片治疗Ⅲ型前列腺炎45例[J]. 涂响安,王文卫,赵亮,梁辉,赵良运,邓立文,曾令友. 广东医学. 2008(10)
[4]HPLC-MS/ESI 法同时测定人血浆中盐酸特拉唑嗪盐酸哌唑嗪和甲磺酸多沙唑嗪[J]. 马宁,刘文英,李焕德,陈本美,张毕奎. 药物分析杂志. 2007(10)
[5]反相高效液相色谱法测定血浆中多沙唑嗪[J]. 陈志琼,余瑜,李龙江. 西南师范大学学报(自然科学版). 2005(06)
[6]以加权最小二乘法建立生物分析标准曲线的若干问题[J]. 钟大放. 药物分析杂志. 1996(05)
本文编号：2905167
【文章来源】：沈阳药科大学学报. 2015年05期 第381-385页 北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
多沙唑嗪的化学结构式
方法与结果2.1色谱条件色谱柱:AcquityUplctmBehC18柱(100mm×2.1mm，1.7μm);流动相:甲醇-10mmol·L－1醋酸铵溶液-甲酸(体积比23∶77∶0.1);流速:0.2mL·min－1;柱温:25℃;进样量:20μL。2.2质谱条件离子源:ESI(正离子);扫描方式:MＲM，离子分别为m/z452.3→344.2(多沙唑嗪)和m/z388.1→290.1(内标特拉唑嗪)，扫描时间为100ms;IS:4kV，TEM:400℃，GS1:50psi，GS2:45psi，CAD:6psi;多沙唑嗪:CE为38V，DP为110V，EP为4V，CXP为15V;特拉唑嗪:CE为33V，DP为110V，EP为8V，CXP为20V。碎片离子质谱图见图2。Fig．2Productionspectraof［M+H］+ofdoxazosin(A)andinternalstandard(B)图2多沙唑嗪(A)和内标特拉唑嗪(B)［M+H］+的产物离子全扫描质谱图2.3溶液的配制2.3.1标准溶液和质量控制溶液取甲磺酸多沙唑嗪对照品适量，精密称定。以体积分数50%甲醇溶液溶解后制得质量浓度为1.00g·L－1多沙唑嗪对照储备液。分别取对照储备液适量，用体积分数50%甲醇溶液稀释制成质量浓度为1.00、3.00、10.0、20.0、50.0、100、200和400μg·L－1的系列标准溶液和质量浓度分别为2.00、40.0、300μg·L－1的质量控制溶液置4℃冰箱冷藏备用。2.3.2内标溶液取盐酸特拉唑嗪对照品适量，精密称定。以体积分数50%甲醇溶液溶解后制得质量浓度为1.00g·L－1内标储备液。取内标储备液适量，用体积分数50%甲醇溶液稀释制成质量浓度为200μg·L－1内标溶液，置4℃冰箱冷藏备用。2.4血浆样品处理吸取于室温下融化的血浆样品200μL，置10mL具塞试管中，依次加入多沙唑嗪系列标准溶液20μL，内标溶液20μL，加入1mol·L－1NaOH溶液100μL，涡旋30s，再加入甲基叔丁基醚3mL，涡流1min，于4000r·min－1
Ⅰ—Doxazosin;Ⅱ—InternalstandardFig．3Chromatogramsofblankhumanplasmasample(A)，blankhumanbloodsamplespikedwithstandardsolutionofdoxazosin(1.00μg·L－1)andinternalstandard(200μg·L－1)(B)，sampleobtaindat1.5hafteroraladministrationofdoxazosinmesylatetablets(C)图3空白血浆(A)，空白血浆加对照品和内标溶液(B)和口服给药甲磺酸多沙唑嗪片1.5h后样品色谱图(C)2.6标准曲线的绘制吸取于室温下融化的空白血浆200μL，分别加入系列标准溶液及内标溶液各20μL，每个质量浓度2样本分析，配制成相当于血浆质量浓度为0.100、0.300、1.00、2.00、5.00、10.0、20.0和40.0μg·L－1的血浆样品，按“2.4”条方法中“加入1mol·L－1NaOH溶液100μL”处理，制备待测物标准曲线，测定3批。以待测物与内标质量浓度比值为横坐标(ρ)，待测物与内标物的峰面积比值为纵坐标(A)，采用加权最小二乘法［7］(权重系数:1/X2)，求得直线回归方程:A=9.70×10－3ρ+3.60×10－3(r=0.9961)，连续测定3批，结果表明多沙唑嗪质量浓度在0.100～40.0μg·L－1内线性关系良好，定量下限为0.100μg·L－1。2.7精密度，准确度和定量下限的确定吸取空白血浆(于室温下融化)200μL，按“2.6”条方法制备待测物低、中、高3个质量浓度分别为0.200、4.00、30.0μg·L－1的质量控制(QC)样品，同时制备质量浓度为0.100μg·L－1的定量下限样品，每个质量浓度6样本分析，结果见表1。表明本方法适用于测定人血浆中多沙唑嗪并符合相关规范［8］。Table1LLOQ，accuracyandprecisionofdoxazosininplasma(n=6)表1血浆中多沙唑嗪的定量下限，准确度和精密度试验结果(n=6)ρadded/(μg·L－1)?
【参考文献】：
期刊论文
[1]甲磺酸多沙唑嗪片人体生物等效性试验研究[J]. 韩颖,谢云. 亚太传统医药. 2013(10)
[2]高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中多沙唑嗪的浓度[J]. 阮邹荣,袁虹,孙凌. 药物分析杂志. 2009(02)
[3]前列安通联合甲磺酸多沙唑嗪控释片治疗Ⅲ型前列腺炎45例[J]. 涂响安,王文卫,赵亮,梁辉,赵良运,邓立文,曾令友. 广东医学. 2008(10)
[4]HPLC-MS/ESI 法同时测定人血浆中盐酸特拉唑嗪盐酸哌唑嗪和甲磺酸多沙唑嗪[J]. 马宁,刘文英,李焕德,陈本美,张毕奎. 药物分析杂志. 2007(10)
[5]反相高效液相色谱法测定血浆中多沙唑嗪[J]. 陈志琼,余瑜,李龙江. 西南师范大学学报(自然科学版). 2005(06)
[6]以加权最小二乘法建立生物分析标准曲线的若干问题[J]. 钟大放. 药物分析杂志. 1996(05)
本文编号：2905167
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