丙氨酸异羟肟酸类氨肽酶N抑制剂的合成及活性测定

发布时间：2020-12-08 21:24

　　氨肽酶N作为锌离子依赖Ⅱ型糖蛋白,广泛分布在哺乳动物的各种细胞膜上和中枢神经系统中。氨肽酶N作为一种外切蛋白酶,与各种疾病关系密切,在关节炎、类风湿、胆结石和阿尔兹海默症等免疫和中枢神经系统中都有表达,在人结肠、卵巢、乳腺、肝脏等部位的肿瘤细胞中高度表达。氨肽酶N在生物学功能方面具有多样性,作为免疫抗原参与免疫调节过程、参与病毒感染过程、抑制剂参与镇痛过程、与肿瘤细胞血管的生成、参与肿瘤细胞的生长、侵袭和转移等等,结合氨肽酶N结构的特异性,这些理论都为合成先导化合物提供基础。本课题根据氨肽酶N的结构特点对化合物进行设计,由于其水解底物的专属性和优先性,首先选择丙氨酸作为连接基团,在结合实验室已有的活性研究结果基础上,选择连接具有良好抗肿瘤活性的肉桂酸结构、苯甲酸结构、苯乙酸结构。通过化合物合成线路改造,经酰胺化、缩合、水解、混合酸酐法等反应合成出了目标化合物,经过氢谱、质谱、红外光谱确认并查阅相关文献,所合成21个化合物均为全新的化合物。对所有新化合物通过CCK-8法体外细胞活性试验测定目标化合物对人肺泡上皮癌细胞A549生长抑制作用,结果显示,本课题设计合成出的化合物7a,9b,9c... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１人源氨肽酶Ｎ与同族肽酶家族基因序列比对结果［１４］??（以Ｃｌｕｓｔａｌ?Ｘ进行序列比对，保守序列为：ＧＡＭＥＮ和ＨＥＸＸＨ）??

的锌离子依赖型金属蛋白酶具有相同的锌离子结合模式。并且发现哺乳科动物氨??肽酶Ｎ的全一级序列同源性超过８０％［１３］。活性位点中含有高度保守的ＨＥＸＸＨ??和ＧＡＭＥＮ氨基酸序列，其中ＨＥＸＸＨ序列为锌离子结合区，如图１－１。??＿＿龜＿??，人ｆＷ?■ｒｍ??ＶＺＡＰ．７ＤｆｆＡｆＩ＞Ｆｌ＾ＬＤＩＢｍｃ?ｉｔｔｌＰｐＨＴＱｉＲＶ｜ＣＲＩ＞ＭＦ＾〇Ｌ：?ＵＷ?ｌｙｐｒＴｒ．－?－ＩｇＳ７Ｓ３??ＰＣＬｊｒｖ７ｉ｜－－?ｌｌｍｐｋ???－?＾ｍｕ?－ｕｆｉ?ｍ＃?Ｊｉｆｘｃｓ??ＴＬＨ?Ｌｉｆ＾ＷＭ３ＵＩ＿ｇｙｊ｜＆｜ｙ＾｜ｌＷＡｎｉｉｑｉ＾（ＶｇｇｇＱＤＣＣｆＦｍ＾ｑｉＩ，ＶＶＪ?ｌｉＭ＾Ｖ｜ＤＹ｜ｌＬＧＬｌ｜ｇ｜｜＾４＾｜ｉａｒｔｉｐｄ－ＴＬＶ￡Ｆ｜??ｉｐ：Ｈ＊：：；ｉ??ｌｔａ４?—?－ｖｊｆｌｇＬｇ！ｗｖ＿＜３ｆ＿ｐｐ｜ｎｌＷＤｉ１ｎ）５ｔ３：ｉＡ＾｜：ｉ＿ｊ｜球ａｔＡｕｒｉｕｃ’ｉｔｏｓ?ｐ｜ｘｐ：．??？ｌｋ?ｗｗｒＤｎｎｃｑｆＰｐｉ＞ｓ?３ｆ肛ｐｎＨｙｓＫ］ａｆ３ｐｃＰＭＳ５＼＃Ｎ｜＃海沙桑停觯酰瞟枺铮瘢?穑颍觯妫鲑\ｉａｐｗｉａＦＹ??图１－１人源氨肽酶Ｎ与同族肽酶家族基因序列比对结果［１４］??（以Ｃｌｕｓｔａｌ?Ｘ进行序列比对，保守序列为：ＧＡＭＥＮ和ＨＥＸＸＨ）??氨肽酶Ｎ二级结构是一个以非共价键结合的同源二聚体［１５］，这与Ｍｌ家族??蛋白酶的其他单体有所不同。氨肽酶Ｎ的活性位点位于二聚体的中间位置，此??位置有一条５ｎｍ的裂隙，是由氨基酸Ｈｉｓ－Ｇｌｕ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ｈｉｓ组成，这也是锌离子??结合位点。二级结构中由７个不同功能的结构域组成

ｎｈ２?ＮＨ？??图１－２氨肽酶Ｎ的二级结构（分成７个不同的结构域）［１Ｓ］??关于氨肽酶Ｎ的研宄进行的十分广泛，但是直到２００６年才知悉氨肽酶Ｎ的??三级结构。由日本和美国课题组［１９＿２１］先后从来源于氨肽酶Ｎ的五．Ｃ〇／／分离纯化??得到的氨肽酶Ｎ晶体和Ｂｅｓｔａｔｉｎ的共晶体中解析出的三级结构。人源氨肽酶Ｎ??与其催化区域具有很高的同源性。２０１２年，Ｊａｍｅｓ?Ｍ．Ｒｉｎｉ等首次从人源氨肽酶Ｎ??晶体以及其与底物、氨肽酶Ｎ抑制剂Ｂｅｓｔａｔｉｎ和ａｍａｓｔａｔｉｎ的共结晶体复合物中??解析出人源氨肽酶Ｎ的三级结构［２２］。这些发现对以后氨肽酶Ｎ的研宄具有重要??意义，同时也为先导化合物的设计提供了理论基础。??１．１．２氨肽酶Ｎ的主要功能??１．１．２．１作为免疫抗原参与免疫调节过程??为避免细胞受到不必要的信号干扰或使细胞终止信号，细胞表面的氨肽酶Ｎ??在生长分化过程中发挥着重要的作用。在许多调节肽因子的降解过程都能发现氨??肽酶Ｎ的高浓度表达。据报道，胸腺喷丁、吞嗤刺激素等一些免疫活性物质的??降解过程都有氨肽酶Ｎ的参与［２３］，从而使机体的免疫力下降。而且，在细胞表??面存在主要组织相容性复合物（ＭＨＣ）ＩＩ型识别Ｔ细胞的过程，氨肽酶Ｎ参与上??述过程并使Ｔ细胞对其抗原的识别性降低

【参考文献】：
期刊论文
[1]氨肽酶N在乳腺癌血管生成中的作用及其与VEGF的相关性[J]. 曹文庆,宁殿宾,冯丽,赵玉哲,张静.  天津医科大学学报. 2015(01)
[2]中国癌症流行态势与对策[J]. 赵平.  医学研究杂志. 2013(10)
[3]组蛋白变构及其在恶性血液病治疗中的应用[J]. 房明浩,纪雪梅.  中国实验血液学杂志. 2009(03)
[4]肉桂酸对胃腺癌细胞诱导分化的实验研究[J]. 卢娟,汪晖,卢方安.  中国药理学通报. 2007(02)
[5]国内外羟肟酸的合成及其在浮选中的应用[J]. 高颖剑,林江顺.  国外金属矿选矿. 1997(06)

博士论文
[1]小分子类肽APN抑制剂的活性评价及其抗肿瘤作用机制研究[D]. 王学健.山东大学 2010
[2]1，3，4-噻二唑类氨肽酶N抑制剂的设计、合成及活性研究[D]. 涂国刚.山东大学 2009
[3]环酰亚胺类肽金属蛋白酶抑制剂的设计、合成及其抗肿瘤活性研究[D]. 李乾斌.山东大学 2008

硕士论文
[1]AHPA类氨肽酶N抑制剂的设计、合成与初步活性评价[D]. 张涛.山东大学 2005



本文编号：2905710