诺考达唑和阿非科林对人胚胎干细胞周期的影响

发布时间：2020-12-16 00:29

　　[目的]探究诺考达唑和阿非科林联合应用对人胚胎干细胞周期同步化到G1和S期的作用并观察药物对细胞生长和生物功能的影响。[方法]采用诺考达唑和阿非科林先后作用于胚胎干细胞,流式细胞仪测定细胞周期,显微镜下观察药物对细胞生长状态的影响,荧光染色技术观察胚层标志物α-SMA和β-tubulin表达。[结果]加入诺考达唑和阿非科林后,G1期为66.35%,S期为33.52%,多数细胞被同步化在G1期;诺考达唑作用16 h,G1期为18.45%,S期为79.10%,多数细胞从周期抑制中恢复;能够形成典型的拟胚体;荧光染色显示α-SMA和β-tubulin均有表达。[结论]诺考达唑和阿非科林联合作用能够使胚胎干细胞66.35%同步化在G1期,诺考达唑作用16 h,79.10%的细胞同步化在S期。中胚层标志物α-平滑肌肌动蛋白和外胚层标志物β微管蛋白在蛋白水平均有明显表达。去除药物后,细胞未发生显著性损伤。 

【文章来源】：生物技术. 2015年06期 北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
0 引言
1 材料与方法
    1. 1 材料
        1. 1. 1 实验材料
        1. 1. 2 试剂
        1. 1. 3 仪器
        1. 1. 4 培养基
    1. 2 方法
        1. 2. 1 人胚胎干细胞培养
        1. 2. 2 小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养
        1. 2. 3 实验分组与给药方案
        1. 2. 4碘化丙锭（ PI） 染色流式细胞术细胞周期测定
        1. 2. 5 免疫细胞化学染色
        1. 2. 6 统计学处理
2 结果与分析
    2. 1 诺考达唑和阿非科林对人胚胎干细胞生长的影响
    2. 2 诺考达唑和阿非科林联合作用对人胚胎干细胞存活的影响
    2. 3 诺考达唑和阿非科林联合作用对人胚胎干细胞周期同步化的影响
    2. 4 撤除药物后细胞拟胚体的形成
    2. 5 撤除药物后细胞拟胚体多向分化能力检测
3 讨论
4 结论



本文编号：2919178