甲啶铂与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究
发布时间：2020-12-17 13:00
用稳态荧光光谱及时间分辨荧光技术研究水溶液中甲啶铂与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。加入甲啶铂后,BSA荧光发射峰从335 nm红移到337.5 nm,并伴随着荧光强度的猝灭,表明甲啶铂与BSA发生了相互作用;单指数拟合得到的荧光寿命结果证实,甲啶铂对BSA的猝灭为静态猝灭;荧光寿命的双指数拟合结果表明,BSA的内在荧光主要是由第212位和第134位的色氨酸残基贡献的,BSA中第212位色氨酸残基和苯丙氨酸残基可能是甲啶铂的靶向目标。
【文章来源】：贵金属. 2020年01期 北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
测量波长为335 nm的荧光衰减曲线(a)和单指数拟合曲线(b)
由图1(c)可知，加入甲啶铂后的BSA溶液在281 nm左右处有一细小的发射峰，可用于测量时间分辨荧光。甲啶铂在283 nm处有最大荧光发射峰，因此测量时要考虑甲啶铂自身的荧光衰减情况。在281 nm波长测定了甲啶铂溶液(0.005 mmol/L)、BSA溶液(0.16 mg/mL)、甲啶铂(0.005 mmol/L)-BSA(0.16mg/mL)混合液的时间分辨荧光，进行双指数拟合，拟合结果列于表2，拟合图如图3所示。由表2可知，加入甲啶铂的BSA溶液有2个荧光寿命，分别为τ1≈0.26 ns，τ2≈4.2 ns。τ1小于仪器激发光源的激发脉冲(1 ns)，没有实际意义而不需讨论；仅需分析加入单一BSA的荧光寿命(τ2≈4.4 ns)，以及加入甲啶铂的BSA的荧光寿命(τ2≈4.2 ns)。根据文献[24]数据，Phe的最大荧光发射峰在281 nm，荧光寿命为4.67 ns，与单一BSA的τ2(≈4.4 ns)十分接近；加入甲啶铂的BSA的荧光寿命τ2=4.2 ns，小于Phe的4.67 ns，且小于甲啶铂的寿命τ2。推测甲啶铂与BSA中的Phe残基可能发生了相互作用。
图1(b)是在256 nm波长激发下，BSA溶液(0.16mg/mL)、甲啶铂稀释液系列、甲啶铂与BSA混合液系列的荧光光谱。由图1(b)可以看出，在甲啶铂的荧光发射峰283 nm处。甲啶铂稀释液系列(a～h)浓度变化范围800，而荧光强度为750～1200，变化范围约450，荧光强度与甲啶铂浓度变化无规律性关系。加入甲啶铂后，BSA的荧光发生猝灭，荧光强度从大约1700降低到400左右，猝灭程度与甲啶铂浓度同样无规律性的关系。混合液系列(a"～h")中甲啶铂的浓度是甲啶铂稀释液系列(a～h)中的1/5，荧光强度波动范围约为100，也约为荧光强度变化范围的1/5。由此推测，不同浓度的甲啶铂与BSA混合液的荧光强度波动是甲啶铂自身造成的。据此推测甲啶铂对BSA的荧光猝灭为静态猝灭。根据图1(b)，在256 nm波长激发下，甲啶铂在300～400 nm处的荧光发射强度很小，因此在后续测定中，当测量波长为335 nm时，不考虑甲啶铂自身的荧光衰减情况。在甲啶铂和BSA的混合液中，当甲啶铂的浓度为0.001 mmol/L时，BSA荧光发射峰发生最大红移，从335 nm红移到337.5 nm，红移了2.5 nm，如图1(c)所示。推测甲啶铂对BSA的荧光猝灭为静态猝灭。2.2 时间分辨荧光技术测定荧光寿命
【参考文献】：
期刊论文
[1]依巴斯汀与牛血清蛋白相互作用的荧光光谱研究[J]. 陆从文,兰秀风,张林,陈霞. 光子学报. 2015(10)
[2]基于三维荧光光谱技术的食用油快速分析研究[J]. 丁志群,王金霞,赵洪霞,程培红,胡劲松,贾辉. 光子学报. 2015(06)
[3]Pd(Ⅱ)与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究[J]. 郑枭,叶满萍,李裔. 中国计量学院学报. 2015(01)
[4]牛奶水溶液的偏振三维荧光光谱研究[J]. 兰秀风,顾春峰,于银山,卢礼萍. 光谱学与光谱分析. 2012(12)
[5]甲啶铂的合成、表征、理化性质与晶体结构[J]. 普绍平,丛艳伟,王庆琨,贝玉祥,栾春芳,李学杰,孙加林. 中国新药杂志. 2010(17)
[6]荧光法研究奥沙利铂与牛血清白蛋白的相互作用[J]. 邱瑾,邵爽,游金宗. 分析测试学报. 2007(01)
[7]铂类抗癌药物研究进展[J]. 余邦良,马亚平,刘全忠,苏照英,白威,周宗贞,杨柳. 海南大学学报(自然科学版). 2005(01)
[8]荧光光谱在蛋白质分子构象研究中的应用[J]. 王守业,徐小龙,刘清亮,解永树. 化学进展. 2001(04)
[9]丝裂霉素C与牛血清白蛋白结合作用的研究[J]. 易平贵,商志才,俞庆森,邵爽,林瑞森. 化学学报. 2000(12)
[10]氧氟沙星与牛血清白蛋白相互作用机制[J]. 易平贵,俞庆森,商志才,宗汉兴. 药学学报. 2000(10)
硕士论文
[1]纳米银溶胶与蛋白质相互作用机制的研究[D]. 陈玉菡.河南师范大学 2014
本文编号：2922085
【文章来源】：贵金属. 2020年01期 北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
测量波长为335 nm的荧光衰减曲线(a)和单指数拟合曲线(b)
由图1(c)可知，加入甲啶铂后的BSA溶液在281 nm左右处有一细小的发射峰，可用于测量时间分辨荧光。甲啶铂在283 nm处有最大荧光发射峰，因此测量时要考虑甲啶铂自身的荧光衰减情况。在281 nm波长测定了甲啶铂溶液(0.005 mmol/L)、BSA溶液(0.16 mg/mL)、甲啶铂(0.005 mmol/L)-BSA(0.16mg/mL)混合液的时间分辨荧光，进行双指数拟合，拟合结果列于表2，拟合图如图3所示。由表2可知，加入甲啶铂的BSA溶液有2个荧光寿命，分别为τ1≈0.26 ns，τ2≈4.2 ns。τ1小于仪器激发光源的激发脉冲(1 ns)，没有实际意义而不需讨论；仅需分析加入单一BSA的荧光寿命(τ2≈4.4 ns)，以及加入甲啶铂的BSA的荧光寿命(τ2≈4.2 ns)。根据文献[24]数据，Phe的最大荧光发射峰在281 nm，荧光寿命为4.67 ns，与单一BSA的τ2(≈4.4 ns)十分接近；加入甲啶铂的BSA的荧光寿命τ2=4.2 ns，小于Phe的4.67 ns，且小于甲啶铂的寿命τ2。推测甲啶铂与BSA中的Phe残基可能发生了相互作用。
图1(b)是在256 nm波长激发下，BSA溶液(0.16mg/mL)、甲啶铂稀释液系列、甲啶铂与BSA混合液系列的荧光光谱。由图1(b)可以看出，在甲啶铂的荧光发射峰283 nm处。甲啶铂稀释液系列(a～h)浓度变化范围800，而荧光强度为750～1200，变化范围约450，荧光强度与甲啶铂浓度变化无规律性关系。加入甲啶铂后，BSA的荧光发生猝灭，荧光强度从大约1700降低到400左右，猝灭程度与甲啶铂浓度同样无规律性的关系。混合液系列(a"～h")中甲啶铂的浓度是甲啶铂稀释液系列(a～h)中的1/5，荧光强度波动范围约为100，也约为荧光强度变化范围的1/5。由此推测，不同浓度的甲啶铂与BSA混合液的荧光强度波动是甲啶铂自身造成的。据此推测甲啶铂对BSA的荧光猝灭为静态猝灭。根据图1(b)，在256 nm波长激发下，甲啶铂在300～400 nm处的荧光发射强度很小，因此在后续测定中，当测量波长为335 nm时，不考虑甲啶铂自身的荧光衰减情况。在甲啶铂和BSA的混合液中，当甲啶铂的浓度为0.001 mmol/L时，BSA荧光发射峰发生最大红移，从335 nm红移到337.5 nm，红移了2.5 nm，如图1(c)所示。推测甲啶铂对BSA的荧光猝灭为静态猝灭。2.2 时间分辨荧光技术测定荧光寿命
【参考文献】：
期刊论文
[1]依巴斯汀与牛血清蛋白相互作用的荧光光谱研究[J]. 陆从文,兰秀风,张林,陈霞. 光子学报. 2015(10)
[2]基于三维荧光光谱技术的食用油快速分析研究[J]. 丁志群,王金霞,赵洪霞,程培红,胡劲松,贾辉. 光子学报. 2015(06)
[3]Pd(Ⅱ)与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究[J]. 郑枭,叶满萍,李裔. 中国计量学院学报. 2015(01)
[4]牛奶水溶液的偏振三维荧光光谱研究[J]. 兰秀风,顾春峰,于银山,卢礼萍. 光谱学与光谱分析. 2012(12)
[5]甲啶铂的合成、表征、理化性质与晶体结构[J]. 普绍平,丛艳伟,王庆琨,贝玉祥,栾春芳,李学杰,孙加林. 中国新药杂志. 2010(17)
[6]荧光法研究奥沙利铂与牛血清白蛋白的相互作用[J]. 邱瑾,邵爽,游金宗. 分析测试学报. 2007(01)
[7]铂类抗癌药物研究进展[J]. 余邦良,马亚平,刘全忠,苏照英,白威,周宗贞,杨柳. 海南大学学报(自然科学版). 2005(01)
[8]荧光光谱在蛋白质分子构象研究中的应用[J]. 王守业,徐小龙,刘清亮,解永树. 化学进展. 2001(04)
[9]丝裂霉素C与牛血清白蛋白结合作用的研究[J]. 易平贵,商志才,俞庆森,邵爽,林瑞森. 化学学报. 2000(12)
[10]氧氟沙星与牛血清白蛋白相互作用机制[J]. 易平贵,俞庆森,商志才,宗汉兴. 药学学报. 2000(10)
硕士论文
[1]纳米银溶胶与蛋白质相互作用机制的研究[D]. 陈玉菡.河南师范大学 2014
本文编号：2922085
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