载自杀基因靶向超声分子探针制备及其超声显像的实验研究

发布时间：2020-12-21 14:11

　　目的制备一种包裹液态氟碳及载肝癌治疗基因质粒,并具有叶酸分子靶向性的纳米级超声分子探针,研究其基本特性及超声显像能力。方法通过碳乙亚胺法在聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）表面连接叶酸分子,制成靶向膜材料（FA-PLGA）后,采用双乳化法制备载有全氟戊烷（PFP）的纳米级靶向超声造影剂,将其与多聚赖氨酸孵育后,形成表面带正电荷的阳离子,利用正负电荷吸附作用,使纳米粒表面载上目标质粒S-HSV1-TK,得到S-HSV1-TK/PFP@FA-PLGA。使用低强度聚焦超声（LIFU）辐照的方式处理纳米粒,显微镜下观察其相变情况,于超声造影模式下观察其体外显影效果,流式细胞仪检测其连靶率;用PLGA代替FA-PLGA,使用相同方法制备无叶酸的非靶向造影剂,将靶向造影剂和非靶向造影剂分别与肝癌细胞HepG2孵育,观察其体外寻靶能力。结果成功制备了载有质粒及PFP的纳米级靶向超声造影剂S-HSV1-TK/PFP@FA-PLGA,该纳米粒大小均一,分散性好,平均粒径（200.50±66.34）nm,平均表面电位（37.40±7.08）mV。使用LIFU 5档辐照5 min后,显微镜下可见较多的纳米粒... 

【文章来源】：临床超声医学杂志. 2020年07期

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

纳米粒荧光显微镜图（×600)

纳米粒普通光镜图（×600)

流式细胞仪双荧光检测显示同时发绿色荧光与红色荧光的纳米粒约占95%，即纳米粒的连靶率约为95%（图9）。共聚焦显微镜下观察示，带红色荧光的纳米粒与带绿色荧光的FA重合度较高，说明纳米粒有较高的连靶率（图10）。体外细胞实验中，共聚焦显微镜下观察示靶向纳米粒较非靶向纳米粒更多地黏附在HepG2细胞周边（图11），说明其对HepG2细胞靶向性明显。图4 纳米粒平均粒径为（200.50±66.34)nm

【参考文献】：
期刊论文
[1]携带cRGD肽的靶向纳米粒超声造影剂的制备以及体外寻靶实验研究[J]. 宣吉晴,陈瑜莉,敖梦,王志刚,郑元义,汪朝霞,李奥.  中国医学影像技术. 2017(06)
[2]叶酸修饰的聚乙烯亚胺-聚乙二醇共聚物载体在体内外转染效率的研究[J]. 梁姬寰,文华颖,冯宇婷,刘国峰,朱莉娜,周毅.  西北药学杂志. 2017(01)
[3]靶向EGFRvⅢ包裹液态氟碳的高分子纳米球的制备及其体外靶向能力的评价[J]. 何燕琼,刘双,景珅,何雨佳,张娜,刘旭杰,王志刚,彭志平.  中国介入影像与治疗学. 2017(01)
[4]叶酸靶向液态氟碳脂质纳米粒的制备及其超声分子显像卵巢癌实验[J]. 刘建新,尚婷婷,徐芬芬,王志刚,李攀,苏琳.  中国医学影像技术. 2016(12)
[5]靶向VEGFR-3载阿霉素脂质微泡超声造影剂体外显影及寻靶能力的实验研究[J]. 叶鸣,王志刚,周鸿,牛诚诚,陈昶宇,刘莹.  中国临床医学影像杂志. 2015(07)
[6]KDR启动子驱动的CD/TK双自杀基因联合survivin基因干扰抑制肝癌细胞生长的体内研究[J]. 杨六成,吴凯,黄宗海,徐帅,王健俊,赵海军.  中国普通外科杂志. 2015(01)
[7]超声微泡破裂法联合阳离子脂质体介导基因转染的实验研究[J]. 丁璐,陈云超,刘晓玲,刘娜香,张青萍.  中华超声影像学杂志. 2013 (08)
[8]超声介导击破微泡增强型绿色荧光蛋白转染正常大鼠关节滑膜组织[J]. 景香香,刘洁,杨炳昂,符少清,吴汤娜,王东林.  中国医学影像技术. 2011(12)



本文编号：2929961