硫酸化糖纳米粒子诱导肿瘤细胞凋亡的研究

发布时间：2020-12-21 15:41

　　人体内的多糖,如糖胺聚糖（glycosaminoglycan）家族,能通过多糖-蛋白质相互作用来影响蛋白质的活性,调节生命过程中的多种信号通路的传递、转导和调控。糖胺聚糖的糖链上存在大量硫酸基,其图案和密度共同调控多糖生物活性。但是,其图案和密度的差异到底会对蛋白活性产生何种影响,在肿瘤细胞的生命活动中其到底扮演何种角色,以此发挥抗肿瘤活性,还有待深入解析。近年来,超顺磁纳米粒子快速发展,其易于制备,尺寸可控等特点使其在细胞分离,靶向药物传递,肿瘤热疗和磁共振成像等领域发挥重要的作用。本研究拟从HS双糖单元中的N-乙酰氨基葡萄糖出发,合成五种N-乙酰氨基葡萄糖,修饰到Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子表面,再经硫酸化,得到具有不同硫酸基图案的糖纳米粒子,并以胃癌细胞MGC 80-3为模型,研究这五种硫酸化纳米糖粒子对于肿瘤细胞生长的影响。具体包括以下几方面内容:（1）核壳结构的Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子制备首先制备出磁性Fe₃O_... 

【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 糖生物学的研究进展及研究内容
        1.1.1 糖胺聚糖家族研究进展
        1.1.2 肝素多糖及其抑制肿瘤活性的研究进展
    1.2 肝素在应用中存在的问题
    1.3 解决方式
        1.3.1 肝素模拟类似物的构建
        1.3.2 糖纳米粒子的构建
    1.4 糖纳米粒子的研究进展
        1.4.1 糖纳米粒子的制备方式
        1.4.2 糖纳米粒子的应用
    1.5 本文研究思路及意义
第二章 四氧化三铁二氧化硅纳米粒子的制备
    2.1 引言
    2.2 实验材料
        2.2.1 实验试剂
        2.2.2 实验仪器
    2.3 实验方法
3O₄以及Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的制备">        2.3.1 Fe₃O₄以及Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的制备
3O₄@SiO₂纳米粒子表面修饰">        2.3.2 Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子表面修饰
3O₄和Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的粒径及形貌表征">        2.3.3 Fe₃O₄和Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的粒径及形貌表征
3O₄和Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的XRD测定">        2.3.4 Fe₃O₄和Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的XRD测定
3O₄和Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的XPS测定">        2.3.5 Fe₃O₄和Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的XPS测定
3O₄和Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的磁学性能表征">        2.3.6 Fe₃O₄和Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的磁学性能表征
3O₄,Fe₃O₄@SiO₂和Fe₃O₄@SiO₂炔基的红外测定">        2.3.7 Fe₃O₄,Fe₃O₄@SiO₂和Fe₃O₄@SiO₂炔基的红外测定
3O₄,Fe₃O₄@SiO₂和Fe₃O₄@SiO₂炔基的TGA测定">        2.3.8 Fe₃O₄,Fe₃O₄@SiO₂和Fe₃O₄@SiO₂炔基的TGA测定
    2.4 结果与讨论
3O₄和Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的粒径和形貌表征">        2.4.1 Fe₃O₄和Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的粒径和形貌表征
3O₄和Fe₃O₄@SiO₂的XRD表征">        2.4.2 Fe₃O₄和Fe₃O₄@SiO₂的XRD表征
3O₄和Fe₃O₄@SiO₂的XPS表征">        2.4.3 Fe₃O₄和Fe₃O₄@SiO₂的XPS表征
3O₄和Fe₃O₄@SiO₂红外表征">        2.4.4 Fe₃O₄和Fe₃O₄@SiO₂红外表征
3O₄和Fe₃O₄@SiO₂的磁学性能表征">        2.4.5 Fe₃O₄和Fe₃O₄@SiO₂的磁学性能表征
3O₄,Fe₃O₄@SiO₂和Fe₃O₄@SiO₂炔基的表征">        2.4.6 Fe₃O₄,Fe₃O₄@SiO₂和Fe₃O₄@SiO₂炔基的表征
    2.5 本章小结
第三章 硫酸化糖纳米粒子的制备及其活性评价
    3.1 引言
    3.2 实验材料
        3.2.1 实验细胞
        3.2.2 常用试剂的配置
        3.2.3 实验试剂
        3.2.4 实验仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 定点保护的N-乙酰氨基葡萄糖的制备及表征
3O₄@SiO₂纳米粒子的制备">        3.3.2 糖基化Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的制备
        3.3.3 硫酸化糖纳米粒子的制备
3O₄@SiO₂纳米粒子的TGA分析">        3.3.4 糖基化Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子的TGA分析
        3.3.5 硫酸钡比浊法测定硫酸化糖纳米粒子硫酸根含量
        3.3.7 硫酸化糖纳米粒子的细胞毒性评价
        3.3.8 硫酸化糖纳米粒子的细胞凋亡分析
        3.3.9 细胞凋亡过程中的FITC和PI染色
        3.3.10 细胞凋亡过程中Hoechst33258染色
        3.3.11 JC-1检测以及胞内活性氧含量检测
        3.3.12 WesternBlot测定
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 单糖1-5核磁以及质谱结果分析
        3.4.2 糖基化纳米粒子的TGA分析
        3.4.3 硫酸化糖纳米粒子的硫酸根含量确定
        3.4.4 硫酸化糖修饰纳米粒子的表征
        3.4.5 细胞毒性评价
        3.4.6 细胞凋亡学评价
            3.4.6.1 细胞凋亡分析
            3.4.6.2 线粒体膜电位分析
            3.4.6.3 活性氧含量评价
            3.4.6.4 细胞凋亡形态学评价
        3.4.7 Westernblot分析
    3.5 本章小结
主要结论与展望
    主要结论
    展望
致谢
参考文献
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]四氧化三铁纳米粒子表面接枝聚L-谷氨酸苄酯多孔微载体的构建和性能[J]. 徐盛华,夏鹏飞,张坤玺,高龙,尹静波.  高等学校化学学报. 2017(07)
[2]硫酸钡比浊法测定皂角多糖修饰物中硫酸基的研究[J]. 张亚男.  泰山学院学报. 2011(03)
[3]褐藻硫酸多糖硫酸基含量测定—硫酸钡比浊法研究[J]. 丛建波,王长振,李妍,吴可.  解放军药学学报. 2003(03)



本文编号：2930080