低剂量花色苷干预小鼠结肠炎的效果及其机制研究

发布时间：2020-12-24 09:22

　　研究背景:炎症性肠疾病（inflammatory bowel disease,IBD）是一种慢性消化道疾病,具有病因复杂、难以治愈的特点。IBD极易复发,其发病率近年来在全球范围内逐年升高,长期患有IBD的患者如果不进行及时、有效的治疗,就会诱发形成结直肠癌（colorectal cancer,CRC）。探究IBD的发病机制及干预方法对于IBD的治疗及CRC的预防意义重大。花色苷（Cyanidin-3-O-glucoside,C3G）是六种花青素中在自然界分布最广泛的一种,其普遍存在于各类水果和蔬菜当中。膳食花青素的许多生物学益处已被报道,包括抗癌活性、抗炎活性、神经保护活性、预防心血管疾病、抗肥胖和抗糖尿病活性等。然而,C3G对于葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的结肠炎的干预作用效果及相关机制很少有报道。因此本研究以肠炎小鼠为模型,以C3G为治疗药物,并把CD169+巨噬细胞作为治疗靶点,探索C3G在IBD中的调控作用及相关机制。研究目的:利用DSS诱导的IBD动物模型,研究C3G在小鼠结肠炎发病过程中的干预效果,探讨IBD发病机制,从而为结肠炎新型药物的研发提供具有理论价值和临床应用潜能... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．?Ｃ３Ｇ给药方式和剂量的选取

图３Ｃ３Ｇ可以显著降低小鼠结肠和ｍＬＮｓ中ＣＤ１６９＋巨噬细胞数量。ＤＳＳ给予７??天后，分离ＷＴ小鼠、ＤＳＳ及注射ＰＢＳ组、ＤＳＳ及注射Ｃ３Ｇ组小鼠的相应组织??及细胞进行检测分析。（Ａ，Ｂ）各组小鼠结肠切片和ｍＬＮｓ切片免疫荧光分析。（Ｃ，Ｄ）??采用流式细胞仪（ＦＡＣＳ）检测ＷＴ小鼠、ＰＢＳ处理组小鼠和Ｃ３Ｇ处理组小鼠ｍＬＮｓ??中ＣＤｌｌｂ＋ＣＤ１６９＋巨噬细胞和Ｆ４／８０＋ＣＤ１６９＋巨噻细胞的比例对比分析。＊＊Ｐ?＜??０．０１，＊＊＊Ｐ＜?０．００１。（Ｅ）?ＰＢＳ处理组小鼠和Ｃ３Ｇ处理组小鼠结肠中ＣＤ?１６９表达??的实时荧光定量?ＰＣＲ?分析。＊Ｐ＜?０．０５，＊＊Ｐ＜?０．０１，＊＊＊Ｐ＜?０．００１。??Ｆｉｇｕｒｅ３．?Ｔｈｅ?Ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ?ｏｆ?ＣＤ?１６９＋Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ?Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ?ａｆｔｅｒ?Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ｗｉｔｈ??Ｃ３Ｇ?ｉｎ?Ｃｏｌｏｎｓ?ａｎｄｍＬＮｓ．ＷＴ?ｎａｉｖｅ，?ｃｏｌｉｔｉｓ?ａｎｄ?ｃｏｌｉｔｉｓ?ｗｉｔｈ?Ｃ３Ｇ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ｍｉｃｅ??ｗｅｒｅ?ｈａｒｖｅｓｔｅｄ?ａｆｔｅｒ?７?ｄａｙｓ?ｏｆ?ＤＳＳ?ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．（Ａ，Ｂ）?Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ??４０??

图４?Ｃ３Ｇ促进ＣＣＬ２２的表达水平升髙及Ｔｒｅｇ细胞的增多。ＷＴ小鼠、结肠炎??并注射ＰＢＳ组及结肠炎并注射Ｃ３Ｇ组小鼠均于７天后收获。（Ａ，Ｂ）?ＷＴ小鼠、??Ｃ３Ｇ处理小鼠与ＰＢＳ注射小鼠结肠和ｍＬＮｓ中ＣＣＬ２２、抑炎细胞因子的实时荧??光定量ＰＣＲ分析。（Ｃ）流式细胞术测定小鼠ｍＬＮｓ的ＣＤ４＋ＣＤ２５＋细胞中Ｆｏｘｐ３??表达的变化。（Ｄ）流式细胞术测定ＷＴ小鼠、Ｃ３Ｇ处理小鼠与ＰＢＳ注射小鼠ｍＬＮｓ??中ＣＤ４＋ＣＤ２５＋细胞的百分比。（Ｅ）?Ｃ３Ｇ注射组小鼠与ＰＢＳ注射组小鼠结肠中??Ｆｏｘｐ３表达量的实时荧光定量ＰＣＲ分析。（Ｆ）流式细胞术检测各小鼠组ｍＬＮｓ中??ＣＣＲ４＋ＣＤ４＋细胞的百分比。（Ｇ）（Ｈ）流式细胞术检测小鼠ＣＤ８０和（Ｉ）（Ｊ）?ＣＤ８６的表??达，＊Ｐ＜０．０５，?＊＊Ｐ＜０．０１，＊＊＊Ｐ＜０．００１。??Ｆｉｇｕｒｅ?４．?Ｉｎｃｒｅａｓｅ?ｏｆ?Ｔｈｅ?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?Ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ＣＣＬ２２?ａｎｄ?Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｔｒｅｇｓ?ｉｎ??Ｃ３Ｇ?Ｔｒｅａｔｅｄ?Ｍｉｃｅ．Ｔｈｅ?ｃｏｌｏｎｓ?ａｎｄ?ｍＬＮｓ?ｏｆ?ｎａｉｖｅ?ｇｒｏｕｐ，?ｏｏｌｉｔｉｃ?ｇｒｏｕｐ?ａｎｄ?Ｃ３Ｇ??ｉｎｊｅｃｔｅｄ?ｇｒｏｕｐ?ｗｅｒｅ?ｈａｉＴｅｓｔｅｄ?ａｆｔｅｒ?７?ｄａｙｓ?ｏｆ?ＤＳＳ?ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．?（Ａ，Ｂ）?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ??

【参考文献】：
期刊论文
[1]Status of colitis-associated cancer in ulcerative colitis[J]. Tetsushi Kinugasa,Yoshito Akagi.  World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2016(04)



本文编号：2935399