生物样品分析中常见的代谢物反向转化及避免策略

发布时间：2020-12-29 19:24

　　已知和未知代谢物的反向转化可能影响到生物分析的准确度和精密度,由于这种反向转化是由代谢物引起的,而方法学考察的研究样品是由空白基质制备的,其中不存在代谢物,最终不能反映出是否存在代谢物反向转化的情况。生物样品中分析物的不稳定性将使分析验证复杂化,有些原形药物/代谢物的不稳定性是不容易预测的,这就需要在方法开发和验证的早期阶段进行必要的评估,以确认代谢物逆转为母体分析物的可能性。 

【文章来源】：中国临床药理学杂志. 2020年08期 北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

氯吡格雷的代谢途径

用正离子模式分析时,内酯和羟基酸之间的质量数相差18,而这2种化合物的[M+H]+与[M+NH4]+离子之间质荷比相差17,二者只有一个质量数的差别。因此羟基酸使用[M+H]+离子作为母离子时,内酯的[M+NH4]+离子的A+1同位素响应会对其产生干扰,必须将二者色谱分离[13]。随着质谱快速极性切换功能的改进,同时监测正负离子(正离子模式下检测辛伐他汀,负离子模式下检测辛伐他汀酸)可以避免这种干扰的发生。见图2。1.3 代谢物的源内裂解

氯氮平(CLZ)主要经肝脏代谢,主要代谢物有N-去甲基氯氮平(DMC)和氯氮平N-氧化物(NOX),N-去甲基氯氮平的药理活性与原形药物相当,而N-氧化物本身没有药理活性。由于CLZ向NOX的转化是可逆的,其生物分析过程需要格外注意。使用APCI源分析氯氮平和N-氧化物时,如果原形药物与其代谢物共同洗脱,则原形药物浓度可能会被高估,NOX能产生2个m/z值与([CLZ+H] +和[DMC+H]+)相同的碎片离子,可能是NOX在源内还原为CLZ以及消除了NOX中的OCH2的结果。使用APCI源时,由于NOX存在源内转化,应该将CLZ,DMC和NOX的色谱峰完全分离,以避免NOX的干扰;而使用ESI源进行检测时则找不到这2种m/z值相同的碎片离子[15]。见图3。在一项奥卡西平(OCN)的生物等效性研究中[16],药物和代谢物ISR结果均符合接受标准,但随后的样品分析时,偶尔会观察到一个肩峰,该峰有时会干扰OCN定量,有时能够与OCN完全分离。因此为了评估此额外峰的性质和影响,启动了一项调查。通过分析,可能的影响来自于II相代谢产物的源内转化。在验证的方法条件下,将OCN-葡萄糖醛酸苷标准溶液进样,并与OCN溶液进行比较。在该检测条件下,OCN-葡萄糖醛酸苷未引起额外的峰,这表明OCN-葡萄糖醛酸苷没有与OCN的额外峰共洗脱,也没有对其信号做出贡献。最终发现,该情况是由于OCN硫酸盐结合物与OCN共洗脱,在源内SO3损失,从而观察到硫酸奥卡西平向奥卡西平的源内转化,最终对OCN定量产生了一定的影响。


本文编号：2946166