血小板细胞膜色谱构建及柱温研究

发布时间：2021-01-12 07:33

　　目的建立血小板细胞膜色谱模型,考察不同温度下抗血小板聚集药物在该色谱柱上的保留行为,模拟药物在正常和发热病理状态下与血小板的相互作用。方法通过物理吸附法,构建血小板细胞膜色谱固定相,湿法装柱,制成血小板细胞膜色谱柱,BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白含量,Na⁺、K⁺-ATPase检测试剂盒测定生物活性,应用该色谱模型,考察色谱柱的特异性及在35.0～42.0℃温度范围下药物的保留特性。结果构建的血小板细胞膜色谱模型其血小板ATP酶活性值为0.214,固定前血小板膜蛋白质量浓度为0.340 9 mg·mL^-1,固定后血小板膜蛋白质量浓度为0.080 5 mg·mL^-1。3个抗血小板聚集药物氯吡格雷、双嘧达莫和西洛他唑在血小板细胞膜色谱柱和空白硅胶柱上保留特征有较大差异,36.0℃时3个药物在血小板细胞膜色谱柱上的保留时间均为最大值,然后随温度的升高,保留时间均呈下降的趋势。结论成功构建了血小板细胞膜色谱模型,并首次研究了不同温度下抗血小板聚集药物在该色谱模型上的保留特性,模拟了正常和发热体温时抗血小板... 

【文章来源】：中国药学杂志. 2020,55(15)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

ATP酶活性标准曲线

图1 ATP酶活性标准曲线通过对比发现，3个抗血小板药物在空白硅胶柱和血小板CMC上的保留特征各不相同，且相较于不保留成分亚硝酸钠，其保留特征均有明显的区别(空白硅胶柱保留时间为2.405 min，血小板CMC的保留时间为2.018 min)。以亚硝酸钠溶液所测得的保留时间作为死时间(t0)，通过公式k=(tR-t0)/t0，计算容量因子k，结果见表1。

本实验以血小板膜蛋白为研究对象，硅胶为固定相载体，构建了血小板CMC色谱模型;在35.0～42.0℃，研究了抗血小板聚集药物氯吡格雷，双嘧达莫和西洛他唑在血小板CMC上保留时间变化。在36.0℃时，3个药物保留时间都有一个最大值，然后随着温度升高，保留时间均减小，其中双嘧达莫减小最多，氯吡格雷减小最少，表明温度对双嘧达莫与血小板相互作用影响最大，对氯吡格雷影响最小，初步揭示了温度对药物与血小板CMC相互作用的影响，为正常体温和发热体温下药物与蛋白质的相互作用提供借鉴。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2972433