新型CRM1抑制剂M-5抑制胃癌细胞增殖作用机制研究
发布时间：2021-01-16 22:13
染色体区域稳定蛋白1（CRM1）也称为核输出蛋白1（XPO1）,是治疗人类肿瘤的一个有前途的靶点。CRM1在胃癌、卵巢癌、胰腺癌、骨肉瘤、胶质母细胞瘤和宫颈癌等肿瘤组织中表达过高,且与预后不良有关。目前,尚不清楚CRM1是否参与了人胃癌的病理生理过程,以及靶向抑制CRM1是否能成为治疗胃癌的新型治疗方式。近年来,许多研究表明CRM1抑制剂都具有α,β-不饱和δ-内酯环,包括Leptomycin B、Ratjadone等化合物。在本课题中,我们探讨了M-5对胃癌细胞的抗肿瘤作用以及其可能的机制。主要结果如下:1.用MTT法检测M-5对两种胃癌细胞（MGC803和HGC27）和胃正常上皮细胞（GES1）的抗增殖活性。我们发现M-5以浓度依赖的方式抑制两种胃癌细胞（MGC803和HGC27）的增殖,但对胃正常上皮细胞（GES1）基本上无细胞毒性。2.为了证实线粒体在M-5诱导细胞凋亡中所发挥的作用,使用JC-1检测线粒体膜电位。结果表明,M-5使MGC803和HGC27细胞中的线粒体膜电位下降。蛋白质免疫印迹法分析表明,在胃癌细胞中加入M-5,会引起Bax水平升高,同时Bcl-2和Bcl-x...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
CRM1转运货物蛋白的核输出示意图
化合物 d（M-5）通过以下几个步骤合成[94-97]：物 a 的合成：我们将 2-异丙基-5-甲基苯酚加入到含有 NaOH 的水 10 min，然后将形成钠盐的体系缓慢加入到含有环氧氯丙烷的圆加入相转移催化剂四丁基溴化铵（TBAB），在室温下搅拌 12 h，C 检测，反应结束后，反应产物通过乙酸乙酯萃取，得到的萃取液浓中间体 a。化合物 b 的合成[98]：将中间体 a 加入到含四氢呋喃的圆加入 CuI 催化剂，在惰性气体保护下加入乙烯氯化镁，在-10℃-0搅拌 2 h，TLC 检测，反应完毕，将体系加入到含饱和氯化铵的锥0 min，硅藻土过滤，乙酸乙酯萃取，浓缩，柱层析得到中间体 b。成：将中间体 b 加入到含无水二氯甲烷的圆底烧瓶中，然后加入三酸镁，最后缓慢加入丙烯酰氯，30 min 滴加完毕，搅拌 2 h，TLC 检萃取，浓缩，柱层析，得到中间体 c。化合物 d 的合成[99-101]：将 Gru入到 50 mL 的两口瓶中，再加入无水二氯甲烷，惰性气体保护，含中间体 c 的二氯甲烷溶液，50℃-60℃条件，回流 6 h，TLC 检测干法装柱，得到目标化合 d。
图 1M-5 的化学结构示意图细胞（MGC803 与 HGC27）癌细胞（MGC803 与 HGC27)以采用 MTT 法。M-5 按照 5 个浓度803、HGC27 和 GES1 细胞 24 h 得出，M-5 对两种胃癌细胞都有GC803 细胞对 M-5 更为敏感。M活率降低 54.10%，HGC27 细胞.29%。但是，GES1 细胞在 10 μ%。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Expression of CRM1 and CDK5 shows high prognostic accuracy for gastric cancer[J]. Yu-Qin Sun,Jian-Wei Xie,Hong-Teng Xie,Peng-Chen Chen,Xiu-Li Zhang,Chao-Hui Zheng,Ping Li,Jia-Bin Wang,Jian-Xian Lin,Long-Long Cao,Chang-Ming Huang,Yao Lin. World Journal of Gastroenterology. 2017(11)
硕士论文
[1]LMB促进TFEB入核的分子机制研究[D]. 陈太琪.华东师范大学 2014
[2]ACA对CRM1依赖的出核运输抑制作用的初步研究[D]. 卓心明.厦门大学 2007
本文编号：2981638
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
CRM1转运货物蛋白的核输出示意图
化合物 d（M-5）通过以下几个步骤合成[94-97]：物 a 的合成：我们将 2-异丙基-5-甲基苯酚加入到含有 NaOH 的水 10 min，然后将形成钠盐的体系缓慢加入到含有环氧氯丙烷的圆加入相转移催化剂四丁基溴化铵（TBAB），在室温下搅拌 12 h，C 检测，反应结束后，反应产物通过乙酸乙酯萃取，得到的萃取液浓中间体 a。化合物 b 的合成[98]：将中间体 a 加入到含四氢呋喃的圆加入 CuI 催化剂，在惰性气体保护下加入乙烯氯化镁，在-10℃-0搅拌 2 h，TLC 检测，反应完毕，将体系加入到含饱和氯化铵的锥0 min，硅藻土过滤，乙酸乙酯萃取，浓缩，柱层析得到中间体 b。成：将中间体 b 加入到含无水二氯甲烷的圆底烧瓶中，然后加入三酸镁，最后缓慢加入丙烯酰氯，30 min 滴加完毕，搅拌 2 h，TLC 检萃取，浓缩，柱层析，得到中间体 c。化合物 d 的合成[99-101]：将 Gru入到 50 mL 的两口瓶中，再加入无水二氯甲烷，惰性气体保护，含中间体 c 的二氯甲烷溶液，50℃-60℃条件，回流 6 h，TLC 检测干法装柱，得到目标化合 d。
图 1M-5 的化学结构示意图细胞（MGC803 与 HGC27）癌细胞（MGC803 与 HGC27)以采用 MTT 法。M-5 按照 5 个浓度803、HGC27 和 GES1 细胞 24 h 得出，M-5 对两种胃癌细胞都有GC803 细胞对 M-5 更为敏感。M活率降低 54.10%，HGC27 细胞.29%。但是，GES1 细胞在 10 μ%。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Expression of CRM1 and CDK5 shows high prognostic accuracy for gastric cancer[J]. Yu-Qin Sun,Jian-Wei Xie,Hong-Teng Xie,Peng-Chen Chen,Xiu-Li Zhang,Chao-Hui Zheng,Ping Li,Jia-Bin Wang,Jian-Xian Lin,Long-Long Cao,Chang-Ming Huang,Yao Lin. World Journal of Gastroenterology. 2017(11)
硕士论文
[1]LMB促进TFEB入核的分子机制研究[D]. 陈太琪.华东师范大学 2014
[2]ACA对CRM1依赖的出核运输抑制作用的初步研究[D]. 卓心明.厦门大学 2007
本文编号：2981638
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/2981638.html
最近更新
教材专著
