Ghrelin抑制Aβ25-35诱导的BV-2细胞炎症反应及改善细胞线粒体功能的机制研究

发布时间：2021-01-20 04:16

　　目的探讨在小鼠小胶质细胞BV-2中过表达Ghrelin对Aβ诱导炎症反应及细胞线粒体功能的影响及相关机制。方法应用慢病毒介导Ghrelin过表达载体感染小鼠小胶质细胞BV-2,免疫荧光观察感染效率,应用RT-PCR及Western blot检测慢病毒感染后细胞中Ghrelin mRNA和蛋白的表达水平;Aβ25-35预处理过表达Ghrelin的BV-2后,利用ELISA、CCK-8、AnnexinV FITC/PI流式细胞术及JC-1法和免疫组化实验检测炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6的分泌水平及细胞增殖、凋亡、线粒体膜电位及胞质中ROS及Cyt-C的表达;电子显微镜下观察过表达Ghrelin后,Aβ25-35对BV-2细胞中凋亡小体产生的影响;Western blot检测上述处理后BV-2细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9的表达。结果免疫荧光显示慢病毒介导Ghrelin过表达载体的感染效率可达85%以上,慢病毒感染的BV-2细胞中Ghrelin mRNA和蛋白的表达显著升高;ELISA及CCK-8、An... 

【文章来源】：免疫学杂志. 2020,36(07)北大核心

【文章页数】：10 页

【部分图文】：

慢病毒感染对小胶质细胞中Ghrelin表达的影响

流式JC-1检测细胞线粒体膜电位实验结果显示与Control组BV-2细胞相比，BV-2+Aβ25-35组、Lv-Ghrelin+Aβ25-35组与LvNC+Aβ25-35组细胞的线粒体膜电位显著下降（P<0.05），表明Aβ25-35可明显破坏BV-2细胞线粒体膜电位；而与BV-2+Aβ25-35组细胞相比，Lv-Ghrelin+Aβ25-35组细胞线粒体膜电位明显升高（P<0.05),Lv-NC+Aβ25-35组细胞无明显变化（P>0.05），这表明Ghrelin可抑制Aβ25-35对BV-2细胞线粒体膜电位的破坏，见图4。2.5 过表达Ghrelin对小胶质细胞中ROS及Cyt-C表达的影响

电镜下观察过表达细胞中Ghrelin对小胶质细胞中凋亡小体产生的影响（×7 200)


本文编号：2988351