维生素D3通过抑制NLRP3炎性小体活化改善氮芥诱导皮肤炎性损伤的作用和机制研究

发布时间：2021-01-20 18:49

　　糜烂性毒剂（vesicants或blistering agents）是迄今仍具极大军事威胁的经典化学战剂之一。烷化剂氮芥（nitrogen mustard,NM）是糜烂性毒剂的典型代表,可引起难愈性皮肤损伤,尚缺乏有效治疗措施。研究表明,NM引起皮肤损伤的机制多样且复杂。目前认为,炎症反应在NM引起的皮肤损伤中起关键作用,贯穿NM诱导皮损发生、发展的全过程。然而,NM引起的皮肤炎症损伤的确切机制,至今仍未阐明,也是限制特效抗毒剂研发的关键所在。因此,明确NM诱导皮肤炎症损伤的确切机制,对于研制、开发特效抗毒药物有重要的军用价值,拓展对烷化剂类引起的炎症反应的认识。NLRP3（NLR pyrin domain containing 3）炎性小体是一种细胞内蛋白复合物,可被多种病原、大分子和环境刺激物激活。激活的NLRP3炎性小体可使Caspase-1活化,剪切IL-1β和IL-18而使其成熟,在维持固有免疫系统功能尤其是炎症反应中发挥重要作用;但是,过度激活NLRP3炎性小体可引发严重的炎症反应,进而造成机体损伤。近年来研究发现,NLRP3炎性小体介导的炎性损伤在理化刺激如紫外光、二硝基... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：95 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

蛋白浓度标准曲线

陆军军医大学硕士学位论文26图2.1NM对细胞形态的影响（标尺=100μm）2.2.1.2NM对细胞增殖活力的影响如图2.2所示，CCK-8检测不同浓度（1、5、10、20、50、100和200μM）NM处理HaCaT细胞4h后的增殖活力。当NM浓度≤50μM时，与对照组相比，细胞增殖活力无显著变化（P＞0.05），当NM浓度为100μM和200μM时，细胞增殖活力分为下降10%和40%（P＜0.05）。以上结果表明，当NM浓度为20μM时，对细胞增殖活力和形态都无显著影响，因此后续研究选用NM浓度为1～20μM的浓度梯度或单独用20μM。图2.2NM对细胞增值活力的影响bP＜0.01，与对照组比较2.2.2NM对HaCaT细胞分泌IL-1β的影响如图2.3所示，HaCaT细胞在1～20μM浓度NM处理4h后，ELISA法检测细胞上清液中IL-1β的含量。结果发现，NM处理能够浓度依赖性上调细胞IL-1β释放水平（P＜0.05）。

陆军军医大学硕士学位论文26图2.1NM对细胞形态的影响（标尺=100μm）2.2.1.2NM对细胞增殖活力的影响如图2.2所示，CCK-8检测不同浓度（1、5、10、20、50、100和200μM）NM处理HaCaT细胞4h后的增殖活力。当NM浓度≤50μM时，与对照组相比，细胞增殖活力无显著变化（P＞0.05），当NM浓度为100μM和200μM时，细胞增殖活力分为下降10%和40%（P＜0.05）。以上结果表明，当NM浓度为20μM时，对细胞增殖活力和形态都无显著影响，因此后续研究选用NM浓度为1～20μM的浓度梯度或单独用20μM。图2.2NM对细胞增值活力的影响bP＜0.01，与对照组比较2.2.2NM对HaCaT细胞分泌IL-1β的影响如图2.3所示，HaCaT细胞在1～20μM浓度NM处理4h后，ELISA法检测细胞上清液中IL-1β的含量。结果发现，NM处理能够浓度依赖性上调细胞IL-1β释放水平（P＜0.05）。


本文编号：2989581