miR-206/miR-613对OATP1B1基因和蛋白表达的影响及其机制研究

发布时间：2021-01-30 06:22

　　探究miR-206/mi R-613对OATP1B1基因和蛋白表达的影响及其调控机制。通过生物信息学软件预测可靶向作用于OATP1B1 mRNA 3’-UTR的mi RNAs;采用RT-q PCR和Western blot等分子生物学方法检测mi R-206/mi R-613、OATP1B1 mRNA及蛋白表达水平;采用双荧光报告基因法,研究mi R-206/mi R-613作用于OATP1B1表达的确切机制。结果发现,mi R-206/mi R-613种子序列与OATP1B1 mRNA 3’-UTR互补配对,具有较高的特异性,且它们之间形成的二级结构较为稳定。与对照组相比,过表达mi R-206/mi R-613,Hep G2细胞中OATP1B1的蛋白表达水平分别下调24.7%、38.8%,反之,抑制其表达OATP1B1的蛋白表达水平分别上调25%、38.2%,而OATP1B1 m RNA表达均未发现明显改变;与对照组相比,过表达或抑制表达mi R-206/mi R-613,pMIR/OATP1B1-WT报告基因荧光素酶活性分别下降35%、30%或增加33.1%、32.5%,而在OA... 

【文章来源】：药学学报. 2016,51(12)北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
材料与方法
    仪器与试剂
    生物信息学分析
    细胞培养
    寡核苷酸转染
    RT-q PCR法检测miR-206/miR-613及OATP1B1m RNA表达
    Western blot法检测OATP1B1蛋白表达
    双荧光素酶报告实验
    统计学处理
结果
    1生物信息学分析
    2瞬转miR-206/miR-613拟似物或抑制物到HepG 2细胞对mi R-206/mi R-613表达的影响
    3 miR-206/miR-613对HepG 2细胞OATP1B1 mR NA表达的影响
    4 mi R-206/mi R-613对Hep G2细胞OATP1B1蛋白表达的影响
    5过表达或抑制mi R-206/mi R-613对报告基因荧光素酶活性的影响
讨论



本文编号：3008420