PD-1/PD-L1肽类抑制剂设计与抗肿瘤活性研究

发布时间：2021-01-30 19:28

　　近十年来,癌症免疫疗法已经取得了很大的进步,特别是免疫检查点的阻断方面更加突出,其中PD-1/PD-L1的抑制更受关注,而PD-1/PD-L1抗体发展比较迅速,目前FDA已经批准的PD-1抗体和PD-L1抗体在治疗黑色素瘤,尿路上皮癌,胶质母细胞瘤的临床疗效上也很突出,这些抗体药物有很高的亲和性和特异性,然而抗体药物存在的缺陷是无法忽略的,包括成本高,免疫相关毒性,药代动力学和肿瘤渗透不足等,这些因素阻碍了抗体类药物更广泛的临床应用;因此寻找有效的小分子抑制剂成为目前研究的热点,小分子抑制剂可以很好的弥补抗体药物的不足,小分子抑制剂又可分为肽类和非肽类抑制剂,其中肽类小分子抑制剂具有更好的生物相容性,所以本文主要目的是设计一条小于20个氨基酸的多肽并研究其阻断效果和抗肿瘤活性。我们通过研究发现PD-1/PD-L1复合物的结合界面是一个发夹结构,并在其核心确定了14个氨基酸的短肽（p1）,我们对序列进行一系列改造,包括稳固发夹结构（p2-p4）设计成环肽（p5）、削弱发夹结构（p6-p8）和引入非天然氨基酸（p9-p12）的方法,共设计了12条多肽抑制剂;用Fmoc固相肽合成法合成多肽,... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

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缩略词表
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 研究背景
        1.1.1 肿瘤的发生与免疫逃逸
            1.1.1.1 肿瘤的发生
            1.1.1.2 肿瘤的生物学特点
            1.1.1.3 肿瘤免疫逃逸
            1.1.1.4 肿瘤微环境与肿瘤免疫逃逸
        1.1.2 免疫检查点—PD-1/PD-L1 通路
        1.1.3 基于PD-1/PD-L1 通路的肿瘤免疫治疗
            1.1.3.1 癌症免疫治疗
            1.1.3.2 PD-1/PD-L1 单克隆抗体抑制剂
            1.1.3.3 PD-1/PD-L1 小分子多肽类抑制剂
    1.2 立题依据
    1.3 实验设计
第二章 实验材料和方法
    2.1 实验用试剂材料
        2.1.1 细胞来源
        2.1.2 溶液配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 固相肽合成法
        2.2.2 HPLC及质谱分析
        2.2.3 PD-1/PD-L1 与多肽结合常数测定-KD值测定
        2.2.4 细胞常规培养
        2.2.5细胞毒性实验
        2.2.6细胞活性实验
第三章 结果与讨论
    3.1 PD-1/PD-L1 抑制剂设计
        3.1.1 多肽设计思路
        3.1.2 多肽合成与纯化
        3.1.3 多肽与PD-1/PD-L1 亲和常数测定
        3.1.4 多肽对细胞活性检测
        小结
    3.2 多肽优化设计
        3.2.1 多肽设计思路
        3.2.2 多肽的合成与纯化
        3.2.3 多肽与PD-1/PD-L1 亲和常数测定
        3.2.4 多肽对细胞活性检测
        小结
    3.3 多肽的优化设计
        3.3.1 多肽优化设计思路
        3.3.2 多肽合成及纯化
        3.3.3 多肽与PD-1/PD-L1 亲和常数测定
        3.3.4 多肽对细胞活性检测
        小结
结论
参考文献
附录
作者简介及科研成果
致谢



本文编号：3009459