基于NADPH高通量筛选靶向IDH1突变体的小分子抑制剂DC H 31

发布时间：2021-02-02 05:13

　　长期以来,人们一直在研究新陈代谢在致癌过程中的作用。Warburg等人观察发现,无论是否有氧气存在,癌细胞都是通过将葡萄糖代谢成乳酸来产生能量。他在近100年前就预测到了癌细胞与非癌细胞之间的代谢差异,并在近年来,代谢差异已被人们确定为在致癌过程中发挥重要作用,可作为潜在的治疗靶点。作为三羧酸循环的主要酶之一,异柠檬酸脱氢酶（IDH）的突变对细胞代谢造成显著的影响。IDH1基因的突变已在许多恶性肿瘤中被发现,IDH蛋白的改变和由于突变产生的异常的2-羟戊二酸（2-HG）活性是不同恶性肿瘤发生的新途径,与多种紊乱的生物学过程相关,在肿瘤发生中发挥重要作用,已成为一个重要的治疗靶点。在本篇文章中,我们首先建立了靶向IDH1突变体蛋白的基于NADPH的高通量筛选平台,并且优化了其反应温度、金属离子浓度等理化条件,通过测定Z factor值和阳性化合物AGI-5198的IC50曲线,确证该方法的稳定性和可靠性,可用于发现靶向IDH1突变体的小分子抑制剂;其次,通过该筛选方法,对含有2,5000个不同结构化合物的化合物库进行大规模的初步筛选,并挑选出其中具有浓度依赖抑制活性和对野生型IDH1有选... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

三种IDH同功酶的突变热点(Dang,Jin,&Su2010)

图 2 IDH 的在不同代谢通路中的功能(H. Yang, Ye, Guan, & Xiong 2012)Figure 2 Functions of IDH in separate pathways(H. Yang, Ye, Guan, & Xiong 2012)IDH 在线粒体内外利用 NAD+/NADP+产生 NADH/NADPH 是用于能源生重要途径，是三羧酸(TCA)循环中起到关键作用的脱羧酶。因此，IDH 在线粒细胞质溶质之间的关键代谢物交换和电子传递中起着重要作用，如 脂肪酸合核酸和蛋白质的羟基化以及无丝分裂等（如图 2）。除了合成 TCA 循环中的代谢产物外，IDH1/2 是大多数组织细胞中生成 NADPH 的一个主要途径。IDH化一分子的异柠檬酸氧化脱羧生成α-KG 的同时生成一分子的 NADPH，而 NA作为还原剂，可通过还原谷胱甘肽和硫氧还蛋白(Koehler & Van Noorden 2003)形成活化过氧化氢酶抵御细胞的氧化损伤(Mailloux et al. 2009)。因此，癌细IDH 突变造成的功能的损伤会严重地干扰细胞的解毒机制，最终造成基因组的定以及 DNA的损伤。1.2 IDH 突变以及其介导疾病的机制

4图 3 D-2HG 干扰多种依赖α-KG 双加氧酶细胞过程(L, Boulay, Topisirovic, Huot, & Mallette2017)Figure 3 Different cellular process interfered by (D-2HG)-mediated regulation of (α-KG)-dependent dioxygenases (L, Boulay, Topisirovic, Huot, & Mallette 2017)


本文编号：3014120