紫草素减轻低氧-复氧致大鼠心肌细胞系H9c2损伤

发布时间：2021-02-04 08:46

　　目的探索紫草素对低氧-复氧（H/R）损害的H9c2心肌细胞的保护作用。方法将心肌细胞系H9c2分为对照组、H/R组、紫草素（0. 1、1和10μmol/L）干预组,每组3个平行孔; MTT法检测紫草素对H9c2细胞毒性;流式细胞计量术检测细胞凋亡和周期; DCFH-DA检测细胞活性氧水平;生化检测细胞中MDA、8-OHdG和GSH含量;qPCR检测细胞γ-GCS、HO-1和NQO1 mRNA表达; Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved caspase-3、Keap1和Nrf2蛋白表达;免疫荧光检测细胞Nrf2蛋白进核情况。结果紫草素呈浓度-时间依赖性抑制H9c2细胞增殖（P<0. 05）; H/R诱导H9c2细胞凋亡、细胞周期阻滞及促进Bax及cleaved caspase-3蛋白表达,抑制Bcl-2蛋白表达（P<0. 05）,紫草素呈浓度依赖性抑制细胞凋亡、解除细胞周期阻滞及cleaved caspase-3和Bax蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达;紫草素可降低H/R所致活性氧水平、MDA及8-OHdG升高,增高H/R所... 

【文章来源】：基础医学与临床. 2020,40(03)

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞与药物:
        1.1.2 材料:
    1.2 方法
        1.2.1 细胞的分组及处理:
        1.2.2 MTT法检测细胞增殖:
        1.2.3 流式细胞计量术检测细胞凋亡和周期:
        1.2.4 2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐（2',7'-dichlo-rofluorescin diacetate,DCFH-DA）检测细胞中活性氧水平:
        1.2.5 Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、Keap1和Nrf2蛋白表达:
        1.2.6硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid,TBA）法、ELISA和微量酶标法分别检测细胞中MDA、8-OHd G、GSH含量:
        1.2.7 qPCR检测细胞中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（humanγ-glutamyl systeine synthetase，γ-GCS）、HO-1和醌氧化还原酶1[NAD（P）H dehydrogenase1,NQO1]mRNA表达:
        1.2.8 免疫荧光检测紫细胞中Nrf2进核:
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 紫草素对H9c2细胞增殖的影响
    2.2 紫草素对H/R损伤的H9c2细胞凋亡周期的影响
    2.3 紫草素对H/R损伤的H9c2细胞中活性氧水平的影响
    2.4 紫草素对H/R损伤的H9c2细胞中Bax、Bcl-2、caspase-3和cleaved caspase-3蛋白含量的影响
    2.5 紫草素对H/R损伤的H9c2细胞中MDA、8-OHdG和GSH含量的影响
    2.6 紫草素对H/R损伤的H9c2细胞中γ-GCS、HO-1和NQO1 mRNA表达影响
    2.7 紫草素对H/R损伤的H9c2细胞中Keap1和Nrf2蛋白含量的影响
    2.8 紫草素对H/R损伤的H9c2细胞中Nrf2蛋白进核的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]紫草素抗肿瘤作用的分子机制[J]. 瞿成名,徐文娟,许梅梅,孙贝贝.  临床医药文献电子杂志. 2019(29)
[2]心肌缺血再灌注损伤中西医机制及相关药物治疗的研究进展[J]. 姜彤伟,郝珍珠,王冰梅,郭慧文,朴星虎,程祺.  中国医药导报. 2019(09)
[3]紫草素对高糖诱导的血管内皮细胞凋亡和氧化应激的影响[J]. 王喜欢,张金华,胡亚南,张洪.  中国病理生理杂志. 2018(07)
[4]紫草素清除自由基和抑制脂质过氧化活性研究[J]. 魏梦涛,徐佳,舒青龙,侯吉华,邵文祥,左爱仁.  食品工业. 2018(03)
[5]辛伐他汀对老年小鼠心肌缺血再灌注时氧化应激及细胞凋亡的影响[J]. 廖小龙,王首红,王中华,郭伟新,温剑艺,覃铁和.  中国药房. 2016(19)



本文编号：3018054