基于三维细胞模型的氯乙基亚硝基脲耐药性研究

发布时间：2021-02-04 18:20

　　氯乙基亚硝基脲（CENUs）是临床上重要的抗癌烷化剂,然而O⁶-烷基鸟嘌呤-DNA-烷基转移酶（AGT）介导肿瘤细胞对CENUs产生耐药性是其临床应用中的重要问题;设计开发AGT抑制剂作为辅药与CENUs联合使用能够有效克服CENUs的耐药性。因此,合理地评价CENUs及其联合用药策略的耐药性对于CENUs的临床应用和新药开发具有重要意义。利用微孔纤维素支架培养人脑神经胶质瘤SF763细胞（AGT高表达）和SF126细胞（AGT低表达）,建立了三维肿瘤细胞模型;并将其应用于对CENUs类药物尼莫司汀（ACNU）、卡莫司汀（BCNU）和洛莫司汀（CCNU）以及CENUs与AGT抑制剂联合用药的耐药性研究。结果表明,三维肿瘤细胞对各CENUs均表现出明显的耐药性,其IC₅₀值为传统二维细胞组的1.7～3.5倍;在CENUs与AGT抑制剂联合用药组中,虽然二维细胞组的耐药性有所下降,但三维细胞组仍然表现出了明显的耐药性。由于体外三维肿瘤球比传统二维细胞更加接近体内实体瘤的生长状态及肿瘤微环境,因此,使用三维细胞模型评价药物的耐药性有利于得到更加准确... 

【文章来源】：化学试剂. 2020,42(06)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

CENUs对三维和二维培养下SF763和

将SF763和SF126同时在三维和二维条件下进行培养,用Alamar Blue法监测细胞的增殖情况。由图2可知,2种细胞在2种培养方式下增殖活性均表现出先增加后降低的趋势。二维培养下2种细胞均在第4 d达到最大增殖活性,之后呈下降趋势,这是由于随着细胞密度的增加,发生接触抑制,导致细胞增殖能力下降[18]。而在三维培养条件下,SF763和SF126细胞分别在第6 d和第5 d达到最大增殖活性,随着细胞呈球形生长,肿瘤球核心细胞接触到的氧气和营养不足,导致内部细胞活性下降,仅外层细胞发挥增殖活性。因此,三维培养条件下细胞的增殖能力整体上略低于二维培养的细胞[19,20]。Chaicharoenaudomrung等[21]用钙-藻酸盐支架对人胶质母细胞瘤U-251细胞进行三维培养。Wang等[22]用壳聚糖-透明质酸支架对多形性胶质母细胞瘤GBM6细胞进行三维培养,均发现三维培养的细胞其增殖能力低于二维培养的细胞。以上结果说明二维培养的细胞为单层生长,相对于三维培养的细胞能够更加充分的接触氧气和营养,具有更强的增殖活性。2.3 CENUs对三维和二维培养人脑胶质瘤细胞的抑制作用

2.1 三维细胞的形态表征分别使用倒置显微镜和扫描电镜对二维和三维培养的肿瘤细胞形态进行了观察。如图1所示,二维培养的2种细胞均呈贴壁状态单层生长(见图1a和1c);而细胞在纤维素支架上进行三维培养后,2种细胞均生长成为肿瘤球,其中SF763细胞肿瘤球的体积较大,平均直径达到30 μm(见图1b);SF126细胞肿瘤球体积较小,平均直径不足10 μm(见图1d)。这是由于SF763恶性程度比SF126细胞高,因此在纤维素支架中生长较快,进而长成体积较大的细胞球;这与二维培养中观察到的SF763细胞比SF126细胞增殖快的结果一致。该结果表明,SF763和SF126细胞经过纤维素支架三维培养后,可以在支架上生长成为结构完整的三维细胞球体,形成多细胞球体微环境,从而模拟体内胶质瘤的形态和结构[17]。

【参考文献】：
期刊论文
[1]低氧激活偶氮苯类AGT抑制剂的合成及还原性研究[J]. 余然,张黎黎,孙国辉,崔鑫,任婷,赵丽娇,钟儒刚.  化学试剂. 2019(10)
[2]新型多功能抗癌烷化剂研究进展[J]. 葛瑶,任婷,崔鑫,赵丽娇,钟儒刚.  化学试剂. 2018(08)



本文编号：3018738