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PKC/NF-κB-PXR信号通路对P-糖蛋白基因表达的调控研究

发布时间:2021-02-10 12:02
  P-糖蛋白(P-gp)是ABC(ATP binding cassette)转运体家族重要成员,也是药物在机体内转运的重要载体。本文考察PKC/NF-κB-PXR信号途径对LS174T细胞中P-gp基因表达的调控作用。运用孕甾烷X受体(PXR)-MDR1双荧光报告基因实验探究PKC激动剂佛波酯(PMA)对LS174T细胞中MDR1荧光素酶活性的影响;分别采用real-time qPCR和Western blot检测PMA对LS174T细胞中P-gp mRNA表达、蛋白表达及NF-κB通路相关蛋白的影响。结果表明,PKC激动剂PMA能明显抑制PXR介导的P-gp荧光素酶活性、m RNA和蛋白表达,并能显著性增加胞内Rel A/p65的核转位。此外,si RNA干扰实验结果显示,PKCα siRNA、Rel A siRNA或PXR siRNA干扰均可显著削弱PMA对P-gp基因表达的下调作用。因此,PKC激动剂能显著抑制PXR介导的P-gp基因表达并伴随NF-κB激活,提示PKC/NF-κB-PXR信号通路对P-gp基因表达具有重要的调控作用。 

【文章来源】:药学学报. 2017,52(01)北大核心

【文章页数】:7 页

【文章目录】:
材料与方法
    实验材料
    实验试剂
    实验仪器
    LS174T细胞的培养
    细胞转染与报告基因实验
    实时荧光定量PCR实验
    Western blot检测实验
    si RNA干扰实验
    数据处理
结果
    1 PMA对PXR介导的P-gp转录作用的影响
    2 PMA对LS174T细胞中P-gp基因表达及蛋白表达的影响
    3 PMA对LS174T细胞中NF-κB通路相关蛋白的影响
    4 si RNA干扰对PMA调控P-gp基因表达的影响
讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]甘草与甘遂的配伍对大鼠肠黏膜P-gp的影响[J]. 孙亚彬,李国锋,唐中昆,吴炳义.  药学学报. 2010(04)



本文编号:3027326

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