低剂量环境污染物TCBPA对酿酒酵母氧化毒性损伤的评估及其活性氧产生机制探究

发布时间：2021-02-14 01:49

　　四氯双酚A（TCBPA）是一种重要的氯代双酚类结构类似物,因具有优异的阻燃性能,故被世界各国作为阻燃添加剂大量应用到各类材料中,TCBPA在环境中分布广泛且保有量巨大,目前在水体、土壤、甚至生物体中均有发现。由于TCBPA为有机质,因此易吸附在生物体表面而被吸收进入生物体,并通过食物链的级联作用在高等生物中大量累积,进而对环境及生物体健康造成严重危害。然而,目前对TCBPA的生物毒性及致病机理仍知之甚少,虽然TCBPA在环境中分布广泛,但浓度较低,一般维持在微克级别;因此,了解TCBPA在低浓度下对生物的毒性更具现实意义。本实验选用被广泛使用的真核模式生物酿酒酵母作为研究材料,对低浓度TCBPA胁迫下的生物毒性进行了评估,并对其毒性诱发的机制进行了初步探究,使人们更深入了解TCBPA的毒性,以期为后续将要继续进行的TCBPA对人类等高等生物的毒性损伤研究提供理论依据。首先,将酿酒酵母暴露于低浓度TCBPA（0、5、10和20 μM）胁迫下,利用分光光度计及蓝白染色检测TCBPA对酿酒酵母生长及存活所造成的影响;并利用血球计数板显微观察测定酿酒酵母在对数期时的细胞溶胀率,以初步评估低浓度... 

【文章来源】：北京化工大学北京市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：103 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３－３不同低剂量下ＴＣＢＰＡ酿酒酵母ＭＤＡ的含量??Ｆｉｇ．３－３?Ｃｏｎｔｅｎｔｓ?ｏｆ?ＭＤＡ?ｉｎ?Ｓ．?ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ?ｕｎｄｅｒ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｌｏｗ?ｄｏｓｅｓ?ｏｆ?ＴＣＢＰＡ??

?２０??ＴＣＢＰＡ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（｜ｉＭ）??图３－５不同低剂量ＴＣＢＰＡ下酿酒酵母胞内８－ｏｘｏｄＧ的含量??Ｆｉｇ．３－５?Ｃｏｎｔｅｎｔｓ?ｏｆ?８－ｏｘｏｄＧ?ｉｎ?Ｓ．?ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ?ｕｎｄｅｒ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｌｏｗ?ｄｏｓｅｓ?ｏｆ?ＴＣＢＰＡ??３．４．５不同低剂量ＴＣＢＰＡ下酿酒酵母损伤与ＲＯＳ之间的相关性分析??为探究酿酒酵母胞内ＲＯＳ积累与这些损伤之间的相关性，我们使用了?ＰＡＳＷ??Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ软件对ＲＯＳ与各损伤之间的相关性进行了双变量相关性分析，结果如??图３－６所示，ＲＯＳ含量与ＭＤＡ含量和８－ｏｘｏｄＧ含量成显著正相关（ｒ＝０．７８４，??Ｐ＜０．０１），与线粒体膜电位水平成显著负相关性（ｒ?＝－０．７４３，Ｐ?＜０．０１）。??表明，即使低剂量的ＴＣＢＰＡ仍可促使酿酒酵母胞大量产生ＲＯＳ，并导致细胞出??现一系列的氧化损伤。??３３??

ＴＣＢＰＡ所引发的生物毒性具有重要意义。??本章主要通过前期文献检阅，确认了促使胞内ＲＯＳ积累相关的多条信号通??路，如图４－１所示，然后通过特异性抑制剂抑制特定信号通路中对应的关键酶，??通过检测此时细胞活性氧的产生情况来评估该通路在胞内ＲＯＳ产生中所起到的??作用，进而初步筛选出与ＴＣＢＰＡ胁迫下酿酒酵母ＲＯＳ积累相关性较高的途径，??并通过实时荧光定量ＰＣＲ技术检测与ＲＯＳ产生相关蛋白激酶的表达情况，从基??因表达层面探宄ＴＣＢＰＡ诱发酵母ＲＯＳ产生的机制，最终对ＴＣＢＰＡ下酵母胞内??ＲＯＳ积累做出合理解释。??［Ｃａ２＋］?个▲??［ｉ?／ＰＴｍｅ?＼??｜?Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ?■?／?＼?／?ＥＴＣ?１??Ｉ?Ｔ－￣＾?＼?／?＾＾＂１??％?ｆ?；?Ｘ?ＭＡＰＫ?？?＼?／?，，：？?ｅｌｅｃｔｒｏｎ?Ｍ??＼?Ｎｕｃｌｅｉ?（?Ｃｒｚｉ?—？?ｇｅｎｅ?ＰＫＣ?）?Ｍ??ＳＯＤ?Ｉ?｜?ＣＡＴ?｜?＊??图４－１?ＴＣＢＰＡ胁迫下酿酒酵母活性氧产生机制的分析??Ｆｉｇ．４－１?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＲＯＳ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｏｆ?Ｓ．?ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ?ｕｎｄｅｒ?ＴＣＢＰＡ??３５??

【参考文献】：
期刊论文
[1]超临界流体萃取在环境污染物分析中的应用[J]. 梁玮,崔兆杰.  山东师大学报(自然科学版). 1997(04)



本文编号：3032924