注射用胸腺法新杂质结构鉴定及含量测定

发布时间：2021-02-16 01:07

　　目的:对注射用胸腺法新中与胸腺法新主峰较难分离的杂质结构进行鉴定并测定7家企业样品中杂质的含量。方法:结合使用基质辅助激光解析飞行时间串联质谱（MALDI-TOF/TOF MS）和二维-超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱（2D-UPLC-Q-TOF）测定杂质分子量并对结构进行鉴定,同时采用与合成的杂质对照品通过保留时间比对进行结构确认,并且通过HPLC方法对杂质含量进行测定。结果:测得胸腺法新主峰前后5个杂质分别为3个异构体杂质（[D-Ser1]-胸腺法新、[D-Asp15]-胸腺法新、[D-Asn28]-胸腺法新）、1个缺失肽杂质（[Des-Ala3]-胸腺法新）和1个水解杂质（[Asp28]-胸腺法新）,杂质含量为0.1%～1.0%。结论:使用两种质谱技术对杂质结构进行鉴定,结果可靠,本研究为完善质量标准以及制定合理的杂质限度提供了依据。 

【文章来源】：中国药师. 2020,23(07)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

杂质Ⅱ的一级与二级质谱图

有关物质典型图谱

使用质谱检测时得到的是单同位素峰的相对分子质量，根据计算杂质峰Ⅰ的单同位素相对分子质量约为3 036.5Da。胸腺法新的平均相对分子质量为3 108.2Da，而其单同位素峰的相对分子质量为3 106.5Da，杂质峰Ⅰ与胸腺法新相比相对分子质量少约71Da，推测肽序在偶联过程少连接1个丙氨酸(残基理论相对分子质量71.07)。在胸腺法新序列中共有3个丙氨酸，且其中2个是相连的，故可能的肽序有2种:肽序1为SDAVDTSSEITTKDLKEKKEVVEEAEN，肽序2为SDAAVDTSSEITTKDLKEKKEVVEEEN。对其进行二级质谱图采集，并将谱图与肽序1和肽序2产生的理论碎片离子进行比对。根据匹配结果，与肽序1的匹配度较高，可匹配上21个氨基酸，由此推测杂质Ⅰ的结构为SDAVDTSSEITT-KDLKEKKEVVEEAEN，即胸腺法新在3位或4位缺失一个丙氨酸。在质谱图中除主峰外，还存在一些其他杂峰，根据其分子量推测，质荷比约为2 994.6的峰应为杂质Ⅰ脱去乙酰基产生的峰;质荷比约为3 107.6的峰应为胸腺法新或其同分异构体的峰，这可能是由于在该色谱条件下收集的馏分峰里含有与胸腺法新相对分子质量一致的同分异构体峰所致;质荷比约为3 089.7的峰为3 107.6峰脱去一分子水产生的峰;质荷比约为3 048.5的峰应该是3 107.6峰脱去一分子水和乙酰基产生的峰。因此，杂质Ⅰ中主要为3位或4位缺失一个丙氨酸的胸腺法新，并含有一定量胸腺法新的同分异构体。图3 杂质Ⅱ的一级与二级质谱图

【参考文献】：
期刊论文
[1]胸腺肽α1的功能研究进展[J]. 郑立运.  中国处方药. 2014(07)
[2]HPLC法对胸腺法新及其制剂中杂质检查[J]. 程磊,唐洋明,殷果,毕开顺,陈晓辉,王铁杰.  药物分析杂志. 2013(11)
[3]胸腺肽α1的特征与功能综述[J]. 高德民,王凤山.  中国生化药物杂志. 2007(02)

硕士论文
[1]胸腺法新的质量分析研究[D]. 田妮娜.兰州大学 2015



本文编号：3035863